GXAS-沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亚胺唑农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法

Q/LB.□XXXXX-XXXX前言本文件参照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西分析测试协会提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西博测检测技术服务有限公司、广西壮族自治区产品质量检验研究院、广西益谱检测技术有限公司、广西绿保环境监测有限公司、农业农村部亚热带果品蔬菜质量监督检验检测中心、广西壮族自治区分析测试研究中心、百色市检验检测中心、广西众晟生物科技有限公司、广西东盟食品检验检测中心、广西壮族自治区林业科学研究院、南宁市武鸣区经济作物技术服务中心、横州市综合检验检测中心、广西工商学校、北海市农业技术服务中心、金秀瑶族自治县食品药品与计量检验检测中心、凭祥市农业农村局。本文件主要起草人：沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亚胺唑农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法范围本文件描述了沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亚胺唑残留量的气相色谱-质谱联用方法。本文件适用于沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亚胺唑残留量的测定。本文件定量限溴菌腈为0.076mg/kg，氟吡菌酰胺为0.003μg/kg，亚胺唑为0.0005mg/kg。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。原理试样用乙酸乙酯浸泡超声或涡旋振荡提取，盐析离心后，取上清液，经分散固相萃取净化，气相色谱-质谱联用法检测，外标法定量。试剂和材料除另有说明外，在分析中仅使用分析纯试剂和GB/T6682中规定的一级水。试剂乙腈（CH3CN，CAS号：75-05-8）：色谱纯。甲醇（CH3OH，CAS号：67-56-1）：色谱纯。乙酸乙酯，（CH3COOC2H5，CAS号：141-78-6)：色谱纯。氯化钠（NaCl，CAS号：7647-14-5）：优级纯。硫酸镁(MgSO4，CAS号：7487-88-9)。用前在500℃下烘5h，冷却200℃取出，冷却近室温，贮存于干燥器备用。标准品溴菌腈（C6H6Br2N2，CAS号35691-65-7）标准品：纯度≥99%。亚胺唑（C17H13Cl3N4S，CAS号：86598-92-7）标准品：纯度宜≥99%。氟吡菌酰胺（C16H11ClF6N2O，CAS号：658066-35-4）标准品：纯度宜≥99%。标准溶液配制溴菌腈标准储备溶液（1000mg/L）准确称取约10mg（精确至0.1mg）溴菌腈标准品（5.2.1）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解并定容，避光-18℃及以下条件保存，有效期6个月。亚胺唑标准储备溶液（1000mg/L）准确称取约10mg（精确至0.1mg）亚胺唑标准品（5.2.2）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解，并定容至10mL。避光-18℃及以下条件保存，有效期6个月。氟吡菌酰胺标准储备溶液（1000mg/L）准确称取约10mg（精确至0.1mg）氟吡菌酰胺标准品（5.2.3）于10mL容量瓶中，用乙腈（5.1.1）溶解，并定容至10mL。避光-18℃及以下条件保存，有效期6个月。混合标准中间溶液（100μg/mL）分别取适量上述标准储备溶液（3.1～3.3）于10mL容量瓶中，40℃水浴氮气吹至近干，用乙酸乙酯（5.1.3）定容配制成100μg/mL的混合标准溶液，再用乙酸乙酯（5.1.3）稀释，配制10μg/mL的混合标准溶液，避光-18℃及以下条件保存，有效期1个月。材料乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(PSA)：40μm～60μm。微孔过滤膜（有机相）：O.22μm或相当者。仪器和设备气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）。分析天平：感量0.1mg和感量0.01g。组织捣碎仪。涡旋振荡仪。超声波清洗器。离心机：转速不低于4500r/min。旋转蒸发仪。试样制备试样制备样品取样部位按照GB2763的规定执行。对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆。匀浆放入聚乙烯容器中。试样储存将试样按照测试和备用分别存放。于-18℃及以下条件储存。分析步骤提取称取10g试样置于50mL聚丙烯离心管中，加入10mL乙酸乙酯（5.1.3）超声或涡旋振荡提取15min，加入5gNaCl（5.1.4）,涡旋3min，于4500r/min离心5min，待净化。净化吸取8.1中上层清液5mL于内含1000mg无水硫酸镁（5.1.5）、200mgPSA（5.4.1）的塑料离心管中，旋涡2min，于4500r/min下离心5min。准确吸取3mL上清液于l5mL离心管中，40℃水浴氮气吹至约0.8mL，用乙酸乙酯（5.1.3）定容至1.0mL，过微孔滤膜(5.4.2)，转进样小瓶用于测定。测定仪器参考条件仪器参考条件如下：色谱柱：5％苯基-95％甲基聚硅氧烷石英毛细管柱；30m×O.25mm×O.25μm或相当者；色谱柱温度：40℃保持2min，然后以20℃/min程序升温至180℃，保持2min；再以10℃/min升温至280℃，保持5min；载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min；进样口温度：280℃；进样量：1μL；进样方式：不分流进样；电子轰击源：70eV；离子源温度：230℃；GC-MS接口温度：280℃；选择离子监测：每种化合物分别选择一个定量离子，2～3个定性离子。每组所有需要检测的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的丰度比值，参见附录A。基质匹配标准工作曲线空白样品按照8.1、8.2进行前处理得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.010mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.400mg/L、0.800mg/L、1.000mg/L的基质匹配标准工作溶液，根据仪器性能和检测需要选择不少于5个浓度点，供气相色谱质谱联用仪测定。以农药定量离子的质量色谱图面积为纵坐标、相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。定性及定量保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较.相对误差应在±2.5%之内。离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时.如果检出的色谱峰的保留时间标准样相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在这种农药或相关化学品。如果不能确证，应重新进样，以扫描方式（有足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。本方法的标准物质GC-MS选择离子监测质量色谱图参见附录B。定性时离子丰度比的最大允许偏差单位为百分比离子丰度比＞50＞20～50＞10～20≤10允许相对偏差±20±25±30±50定量外标法定量。试样溶液的测定将基质匹配目标准工作溶液和试样溶液依次注入气相色谱-质谱联用仪中，保留时间和离子丰度比定性，测得定量离子的质量色谱图峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行操作。结果计算试样中各农药残留量以质量分数ω计，单位为毫克每千克(mg/kg)，按公式(1)或公式(2)计算。 ω=ρ1×A×V3×V1 ω=ρ2×V3×式中：ω—试样中各被测物残留量的数值，单位为毫克每千克(mg/kg)；ρ1—基质匹配标准工作溶液中被测物的质量浓度的数值，单位为毫克每升(mg/L)；ρ2—从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中被测物的质量浓度的数值，单位为毫克每升(mg/L)；A—试样溶液中被测物的质量色谱图峰面积；As—基质匹配标准工作溶液中被测物的质量色谱图峰面积；V1—提取液的体积，单位为毫升(mL)；V2—移取净化液的体积，单位为毫升(mL)；V3—样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；m—试样质量的数值，单位为克(g)。

（资料性）

溴菌腈、氟吡菌酰胺、亚胺唑农药及其代谢物的相关化学品和内标化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值见表A.1。溴菌腈、氟吡菌酰胺、亚胺唑农药及其代谢物的相关化学品和内标化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的比值序号农药中文名农药英文名保留时间(min)定量离子定性离子1定性离子2定性离子31溴菌腈bromothalonil6.52766.052.0106.079.02氟吡菌酰胺fluopyram15.994173.