血红蛋白病和免疫性溶血性贫血检查

关于血红蛋白病和免疫性溶血性贫血检查（一）血红蛋白病定义一组遗传性或基因突变导致生成Hb的珠蛋白肽链的结构或合成速率改变，从而引起功能异常所致的一种溶血性贫血。

一、概述第2页,共98页，星期六，2024年，5月（二）血红蛋白的组成正常Hb的组成:是一种结合蛋白：血红素＋珠蛋白每个Hb单体是由一条珠蛋白肽链和一个血红素组成的４个Hb单体→一个球形四聚体第3页,共98页，星期六，2024年，5月血红蛋白β链一级结构：氨基酸排列顺序类α链：（α、ζ）

141个氨基酸类β链:（β、δ、γ、ε）

146个氨基酸二级结构：肽链盘曲成的空间螺旋

α螺旋、β折叠片层血红蛋白α链，α螺旋结构。（三）血红蛋白的结构第4页,共98页，星期六，2024年，5月三级结构：

整条多肽链的

三维结构四级结构：

四聚体血红蛋白的结构第5页,共98页，星期六，2024年，5月（四）Hb发育演变与遗传控制组成、功能、种类和珠蛋白的合成胚胎早期先合成

和

→HbGowerⅠ（

2

2）

同时或稍后合成

和

→HbGowerⅡ（

2

2

）

HbPortland（

2

2）12周时

和

逐渐消失，

链迅速增加，

开始合成，

HbF为主（

2

2）妊娠末期和出生不久，

链迅速降低，

链迅速

增加，HbA为主（

2

2）成人Hb：HbA

2

2

97～98%

HbA2

2

22～3%Hb发育演变：第6页,共98页，星期六，2024年，5月

2

1

2

1

G

A

1

胚胎Hb胎儿Hb成人HbHb类型珠蛋白链

GowerⅠHb

2

2基因

2

2

2

2

2

2

2

2

2

2GowerⅡPortlandFＡ２Ａ转录翻译Hb发育遗传控制第7页,共98页，星期六，2024年，5月（五）影响血红蛋白结构和功能的因素

珠蛋白基因缺失或缺陷酶缺陷化学药物中毒第8页,共98页，星期六，2024年，5月二、血红蛋白病

人类珠蛋白基因的组织特异性强，仅在RBC及前体中才有大量表达。

由珠蛋白基因突变引起珠蛋白

质量畸变（异常Hb病）和

数量畸变（地中海贫血）

所致的疾病统称血红蛋白病第9页,共98页，星期六，2024年，5月血红蛋白病分类异常Hb病：基因突变导致珠蛋白结构改变例如：镰状细胞贫血珠蛋白合成障碍性贫血：基因突变导致珠蛋白肽链合成缺乏或合成量异常如α、β地贫第10页,共98页，星期六，2024年，5月（一）异常血红蛋白病

由于珠蛋白基因突变导致珠蛋白肽链结构异常,如有临床表现者称为异常血红蛋白病主要类型：

（1）镰状细胞病（2）不稳定血红蛋白病（3）血红蛋白M病

（4）血红蛋白E病（5）氧亲和力改变的血红蛋白病第11页,共98页，星期六，2024年，5月

镰状细胞贫血（HbS病）

纯合子：HbSHbS

镰状细胞病杂合子：HbAHbS

镰形细胞性状正常：HbAHbA

正常人常染色体显性遗传最常见的Hb病好发于非洲裔人群β链第6位谷氨酸被缬氨酸替代HbS多聚体形成（HbS>50%）致红细胞发生镰形改变,变形能力低引起血粘度增高，导致溶血、贫血、血管梗阻性继发症状。第12页,共98页，星期六，2024年，5月第13页,共98页，星期六，2024年，5月NormalvsSickleCells含高浓度HbS，低浓度的氧水平，HbS聚合沉积在红细胞内.HbS聚合物使红细胞镰形变.镰刀形红细胞通过血管的能力下降，转而，可能会阻塞血管，导致组织器官功能丧失SickleCellNormalCell第14页,共98页，星期六，2024年，5月临床表现：①程度不同的小或大细胞性贫血。②颅骨发育畸形。③肝脾肿大。④溶血危象出现后，病人有腹痛、腿痛、小腿溃疡、胆结石、肺梗死及肝、肾功能不全等。⑤易合并肺、骨、胃肠感染。第15页,共98页，星期六，2024年，5月诊断依据阳性家族史外周血Hb电泳或Hb层析分析发现HbS（达80%）血细胞形态学改变---大小不一、有核/靶形/嗜多色/异形红细胞，镰形红细胞不多见HbS与其他Hb病的双重杂合子，如HbSC、HbSE、HbSD等，其临床表现可与镰状细胞贫血相似，统称为镰形变综合征。第16页,共98页，星期六，2024年，5月血红蛋白降低（多为50-100g/L）红细胞多形变网织红细胞增加（>10%）红细胞镰形变实验阳性红细胞渗透脆性明显下降血红蛋白电泳可见HbS(达80%)实验室检查第17页,共98页，星期六，2024年，5月AD（不完全显性）现已发现90余种机制：UHb是有无控制血红蛋白肽链的基因突变，维持血红蛋白分子稳定性的氨基酸被替换或缺失，致使血红蛋白结构不稳定。易变性和沉淀，形成变性珠蛋白小体，附着于RBC膜，使红细胞变形性下降，易被破坏，通过微循环时容易被脾窦滞留破坏，从而导致血管内外溶血。代表疾病：HbBristol

形成原因：

链第67位缬氨酸被天冬氨酸取代临床症状：先天性溶血性贫血、黄疸、脾肿大

不稳定血红蛋白病第18页,共98页，星期六，2024年，5月变性珠蛋白小体检测阳性异丙醇沉淀试验和热变性试验阳性血片多为正细胞性贫血，大小不一，异形碎片可见，聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离不稳定血红蛋白和潜在异常血红蛋白。实验室检查第19页,共98页，星期六，2024年，5月HbE是β链第26位谷氨酸被赖氨酸替代的异常血红蛋白.纯合子型(HbE病),轻度贫血小红细胞症.杂合子型(携带者)无症状.我国最常见的血红蛋白病，东南亚地区也多见.HbE病血象：小红细胞症,较多靶形红细胞（25-75%）返回

血红蛋白E病第20页,共98页，星期六，2024年，5月小细胞低色素性轻度贫血血片可见25-75%靶型红细胞异丙醇沉淀试验和热变性试验阳性变性珠蛋白小体检测阳性红细胞渗透脆性减低血红蛋白电泳HbE占75-92%实验室检查第21页,共98页，星期六，2024年，5月血红蛋白病M病（遗传性高铁血红蛋白病）形成原因：

肽链中与血红素铁原子连接的组氨酸发生替代，导致部分铁原子呈稳定的高铁状态，影响Hb正常带氧功能临床表现：

紫绀和继发性红细胞增多遗传方式：非显性遗传（AD）第22页,共98页，星期六，2024年，5月氧亲和力改变的血红蛋白病形成原因：

由于珠蛋白基因突变致Hb肽链上氨基酸发生置换，致使Hb分子与氧的亲和力增高或降低，运输氧功能改变。

临床表现:

红细胞增多症和紫绀第23页,共98页，星期六，2024年，5月(二)地中海贫血

——珠蛋白链合成障碍性贫血概述

又称地中海贫血（thalassemia）、海洋性贫血。是由于珠蛋白肽链合成减少或完全不能合成引起的遗传性疾病。按肽链合成减少的类型可分为α地贫、β地贫等。我国南方发病比北方高，本病有家族史。第24页,共98页，星期六，2024年，5月β地中海贫血—由于

珠蛋白基因的缺失或缺陷使

链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。特点：ＨbＡ↓

都表现为低色素性贫血α地中海贫血—由于

珠蛋白基因的缺失或缺陷使

链的合成受到抑制而引起的溶血性贫血。地中海贫血第25页,共98页，星期六，2024年，5月地中海贫血第26页,共98页，星期六，2024年，5月

α-珠蛋白合成障碍性贫血

α地中海贫血--

是由于α珠蛋白基因的缺失或缺陷使珠蛋白链合成受到抑制则和β链和γ形成四聚体（β4或γ4）。其临床分型为：

1·静止型

2·标准型

3·HbH病

4·HbBart’s胎儿水肿综合症第27页,共98页，星期六，2024年，5月1·静止型：是缺失一个珠蛋白基因造成（／α－）即α+地贫。无症状，血象无特殊异常，唯一的异常是在出生八个月时发现HbBart’s轻度增加（小于2%)，后消失。2·标准型：缺失2个珠蛋白基因。（／－－）为α0地贫。无症状或轻度贫血。血象中有轻度低色素表现，MCV可降低，可见少量的靶形红细胞，网织红细胞可轻度增高。红细胞包涵体试验阳性，盐水渗透脆性下降，Hb电泳HbBarts增高（3-15%）。

α地中海贫血--

α-珠蛋白合成障碍性贫血

第28页,共98页，星期六，2024年，5月3.血红蛋白H病：重型α珠蛋白生成障碍性贫血缺失3个基因（-／－－）。γ链合成增多，且形成四聚体。轻至中度贫血，肝脾肿大。靶形红细胞增多，MCV、MCH降低，Hb电泳出现HbH、HbBart’s带，分别5-30%和5-18%，包涵体试验，热不稳定试验和异丙醇试验均可阳性，红细胞寿命缩短。

α地中海贫血--

α-珠蛋白合成障碍性贫血

第29页,共98页，星期六，2024年，5月4.血红蛋白Barts病：又名胎儿水肿症，缺失4个基因。胎儿常死于宫内或流产早产等。胎儿全身水肿，皮肤苍白黄疸，肝脾大。Hb明显下降，红细胞中心淡染，异形，靶形和有核红细胞增多。HbBarts大于90%，可见少量的HbH和HbPortland,抗碱血红蛋白增加。

α地中海贫血--

α-珠蛋白合成障碍性贫血

第30页,共98页，星期六，2024年，5月α-珠蛋白合成减少，→β-珠蛋白过剩→聚集成β4（HbH）→不稳定，聚合形成HbH包涵体→红细胞变形性下降→停留在脾索→血管外溶血。

游离β-珠蛋白不稳定，易氧化→自由基产生增加→氧化红细胞膜蛋白脂质→红细胞膜结构破坏→溶血。溶血机制第31页,共98页，星期六，2024年，5月

正常人的第16對染色體帶有四個α血紅蛋白的基因，所以严重度可分成下列四級：α型地中海貧血的症狀

只有一個基因缺失

無症狀

有兩個基因缺失

輕微貧血，紅细胞变小，顏色也變淡（血紅素不足）。

有三個基因缺失

中度到嚴重貧血，患者往往需要輸血。

四個基因全部缺失

患者幾乎都以流產收場，或出生後立即死亡。第32页,共98页，星期六，2024年，5月第33页,共98页，星期六，2024年，5月胎儿水肿第34页,共98页，星期六，2024年，5月（1）发病机制β-珠蛋白基因突变（90%为该原因）β-珠蛋白基因缺失

β-珠蛋白合成障碍性贫血

第35页,共98页，星期六，2024年，5月β-珠蛋白合成减少，α-珠蛋白合成正常→二者结合后，α-珠蛋白过剩→过剩的α链珠蛋白不稳定，聚集成α-珠蛋白包涵体→粘附于红细胞膜上→红细胞变形性下降→无法通过脾窦壁孔→停留在脾索→血管外溶血。游离α-珠蛋白不稳定，易氧化→自由基产生增加→氧化红细胞膜蛋白脂质→红细胞膜结构破坏→溶血

溶血机制第36页,共98页，星期六，2024年，5月β链减少α链过剩α链聚集幼红细胞异常大多数幼红细胞在骨髓中死亡（无效性红细胞生成）少数异常红细胞存活食物铁铁吸收增加铁负荷增加继发性血色病低色素性红细胞含包涵体的红细胞在脾破坏骨髓膨胀骨骼变化第37页,共98页，星期六，2024年，5月

红细胞生成可以增加骨髓的量，并且增加骨髓存储部位的骨髓量，如这里所见的头骨，头骨骨髓的增加可以导致头骨形状变化，“前额隆起”或额头突出。第38页,共98页，星期六，2024年，5月患儿颅骨及面颊部骨骼增大，头颅变大，额部隆起，颧高，鼻梁塌陷，两眼距离增宽，眼睑浮肿，形成地中海贫血的特殊面容。第39页,共98页，星期六，2024年，5月第40页,共98页，星期六，2024年，5月β-地中海贫血临床分类临床类型基因型基因产物临床表现重型

地贫

+/+、

0/0

0/0、

+/0

链几乎不能合成

链合成相对增加HbF>30%和HbA2增高地中海贫血面容溶血性贫血（需输血）轻型

地贫

+/A、

0/A

0/A能合成适量的

链贫血不明显或轻度贫血中间型

地贫

+/+

链部分合成HbA2↑↑,HbF:N/轻度↑介于重型和轻型之间（不需输血）遗传性胎儿血红蛋白持续增多症缺失或突变

链和

链合成受抑制

链合成明显增加成人HbF持续增加，无症状第41页,共98页，星期六，2024年，5月1.血象：

小细胞低色素性贫血、RBC大小不一、靶形红细胞多见（重型>10%），网织红细胞增加。2.骨髓象:

增生明显活跃，粒红比例倒置，呈无效性增生和原位溶血3.基因诊断：

southern印记杂交分析和PCR方法检测基因缺失4.血红蛋白电泳：

异常血红蛋白电泳条带出现,如HbFHbH等实验室检查第42页,共98页，星期六，2024年，5月

小细胞低色素性贫血、靶形红细胞多见（重型10%-35%）网织红细胞增加第43页,共98页，星期六，2024年，5月

三

、血红蛋白病的实验室检查

抗碱血红蛋白检测血红蛋白电泳血红蛋白F酸洗脱试验异丙醇沉淀试验热变性试验红细胞包涵体试验第44页,共98页，星期六，2024年，5月抗碱Hb测定

HbF具有比HbA更强的抗碱作用HbF抗碱变性作用强，没有变性存在于上清液中，HbA变性沉淀，取上清液于540nm处测定吸光度，检测出HbF的浓度。此试验也称为碱变性试验，其检测的是抗碱血红蛋白除HbF外，HbBarts和部分HbH也具有抗碱能力，需通过电泳鉴别第45页,共98页，星期六，2024年，5月第46页,共98页，星期六，2024年，5月原理：根据不同的Hb带有不同的电荷，等电点不同，在一定的PH缓冲液中，缓冲液的PH大于Hb得等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动，经一定电压和时间的电泳，不同的Hb所带电荷不同、分子量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳的各区带进行电泳扫描，可进行Hb定量。参考区间：PH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳：正常Hb电泳区带：HbA>95%、HbF<2%、HbA2为1.0-3.0%.在HbA前出现——快速异常：HbH，J，K组在HbA后出现——慢速异常：HbG，D，E组血红蛋白电泳

第47页,共98页，星期六，2024年，5月PH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳第48页,共98页，星期六，2024年，5月磷酸盐缓冲液(pH6.5)主要用于HbH和HbBarts的检出

HbH泳向（+），HbBarts则在点样点不动，而其余的血红蛋白都向（-）

TEB缓冲液(pH8.6)适合于检出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易与HbA分开，HbH与HbBarts不能分开和显示

箭头所指处为点样点3和6为正常对照标本，1、2、4、5为病人标本第49页,共98页，星期六，2024年，5月第50页,共98页，星期六，2024年，5月

聚丙烯酰胺凝胶电泳第51页,共98页，星期六，2024年，5月第52页,共98页，星期六，2024年，5月

正常值：1.2%~3.5%意义：>3.5%(4%~8%)为β-地贫轻型；如伴缺铁，HbA2可不增加；若>10%，为HbE；

减少见于α-地贫。

HbA2测定

第53页,共98页，星期六，2024年，5月

异丙醇沉淀试验

原理：不稳定Hb较正常Hb更容易裂解，在异丙醇等非极性溶剂中，Hb分子内部氢键减弱，稳定性降低，不稳定Hb很快裂解沉淀，观察Hb液在异丙醇中的沉淀现象，对不稳定Hb进行筛检。第54页,共98页，星期六，2024年，5月第55页,共98页，星期六，2024年，5月原理：将煌焦油蓝液与新鲜血液一起孵育,不稳定Hb易变性沉淀形成包涵体.而Ret保温10min就显现出来,HbH病红细胞包涵体一般在10min至2h之间形成,而其他不稳定Hb形成珠蛋白变性沉淀需温育更长时间（3h或更长）.观察温育2h包涵体的红细胞是否比温育10min的阳性细胞多,科了解是否有HbH等不稳定HbH的存在。对诊断HbH病是一简便且特异性高的方法。有时HbH量少，或其他因素使Hb电泳未见HbH区带，而HbH包涵体为（++）。红细胞包涵体试验

第56页,共98页，星期六，2024年，5月

血红蛋白F酸洗脱试验原理：HbF具有抗碱和抗酸作用，其抗酸能力比HbA强，将血涂片于酸性缓冲液中孵育，含HbF的红细胞不被酸洗脱被伊红染成红色，而含HbA的红细胞被酸洗脱，不能被伊红着色。参考区间:

正常血片韩HbF的红细胞<0.02(<2%);孕妇可轻度增加。临床意义：地中海贫血着色增加，重型患者多数红细胞染成红色，轻型可见少数着色，遗传性胎儿血红蛋白持续综合征全部红细胞染成红色。第57页,共98页，星期六，2024年，5月

热变性试验原理：根据不稳定Hb比正常Hb更容易遇热变性，观察Hb液在50时是否出现沉淀，对不稳定Hb进行筛查。参考区间:正常热沉淀Hb<1%临床意义：Hb沉淀率增加，说明不稳定Hb存在。第58页,共98页，星期六，2024年，5月在分子水平上进行血红蛋白病的诊断和研究血红蛋白基因PCR技术检测第59页,共98页，星期六，2024年，5月

总结※

异常血红蛋白病和地中海贫血有共同的分子基础

——突变、缺失※

基因缺失是引起

地中海贫血的主要原因※

基因突变是引起

地中海贫血的主要原因第60页,共98页，星期六，2024年，5月复习思考题1、何谓血红蛋白病？2、血红蛋白病的分类有哪些？3、如何诊断地中海贫血？4、如何诊断异常血红蛋白病？第61页,共98页，星期六，2024年，5月第五节免疫性溶血性贫血的检查检查抗体性质明确诊断方向判断效价水平评估疾病程度查找疾病原因检查目的第62页,共98页，星期六，2024年，5月一、概述

免疫性溶血性贫血-是由于免疫功能紊乱产生某种抗体能与自己正常红细胞表面的抗原结合或激活补体，引起红细胞过早破坏而导致的一组获得性溶血性贫血，统称免疫性溶血性贫血。

定义：第63页,共98页，星期六，2024年，5月免疫性溶血性贫血的分类依据病因可分为三类自身免疫性贫血同种免疫性贫血药物免疫性贫血第64页,共98页，星期六，2024年，5月二、实验室检查（一）直接抗人球蛋白试验（DATG）【原理】自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（IgG），是不完全抗体，结合在红细胞表面，使其致敏。直接抗人球蛋白试验（DAGT），是应用抗人球蛋白试剂（抗IgG和／或抗C3d）与红细胞表面的IgG分子结合，并出现凝集反应。红细胞表面如果不存在自身抗体，则凝集反应呈阴性。

第65页,共98页，星期六，2024年，5月直接抗人球蛋白试验：已致敏RBC抗人球蛋白RBC凝集检测RBC上含有不完全抗体：如检测新生儿脐血RBC上有无来自母体的抗体。第66页,共98页，星期六，2024年，5月（二）间接抗人球蛋白试验（IAGT）【原理】间接试验是检查血清中游离的不完全抗体的试验。本试验是应用已知红细胞与抗人球蛋白血清，检测被检者血清中是否含有相应的不完全抗体，如果存在，则已知红细胞被致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。第67页,共98页，星期六，2024年，5月间接抗人球蛋白试验：D-RBC待检血清致敏RBC抗人球蛋白RBC凝集

检测血清中是否含有不完全抗体：如检查孕妇血清中有无不完全抗体。第68页,共98页，星期六，2024年，5月【DAGT与IAGT临床意义】

自身免疫性溶血性贫血

药物诱发性免疫性溶血性贫血

新生儿溶血病；结缔组织病Rh和ABO血型不合的妊娠

DAGT和IAGT阳性见于：

DAGT与IAGT阳性见于：第69页,共98页，星期六，2024年，5月（三）冷凝集素试验（CAggT）【原理】冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞、0型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集，凝集反应的高峰在0℃～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失。

第70页,共98页，星期六，2024年，5月【CAggT临床意义】

参考值：正常人血清抗红细胞抗原的lgM冷凝集素效价≤1︰32（4℃）。临床意义：冷凝集素综合征（>1：1000）。支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、肝硬化、淋巴瘤及多发性骨髓瘤者亦可增高，但不超过l︰1000。

第71页,共98页，星期六，2024年，5月（四）冷热溶血试验（D-LT）【原理】

冷热溶血试验，是模拟病人发病的体外试验。将病人的血液置于O～4℃冰箱中，此环境能使D—L型冷反应性抗体与红细胞牢固结合，并同时结合补体，但无溶血，之后再将温度升至37℃使补体激活，并发生溶血，以此与PNH鉴别D-L抗体--双向（温度）溶血素,20℃以下与红细胞结合,并激活补体.当温度升高到37℃,突发急性血管内溶血。第72页,共98页，星期六，2024年，5月【临床意义】阳性反应主要见于阵发性冷性血红蛋白尿（PCH）患者体内D-L效价常大于1∶40～64

【参考值】正常人各管均为阴性，无溶血。【冷热溶血试验临床意义】

第73页,共98页，星期六，2024年，5月三、免疫性溶血性贫血检查的应用（一）温抗体型自身免疫性溶血性贫血（温抗体型AIHA）

温抗体型自身免疫性溶血性贫血，根据病因可分为原发性和继发性两种，20%～30%病例原因未明称原发性，其余为继发性。IgG是引起该贫血的主抗体，与红细胞的最适反应温度为35～40℃的自身抗体称为温抗体。第74页,共98页，星期六，2024年，5月（一）温抗体型自身免疫性溶血性贫血（温抗体型AIHA）病因：分原发性和继发性

原发性：原因不明继发性:A感染：巨细胞病毒肝炎病毒伤寒等

B肿瘤：白血病恶性淋巴瘤MM等

C结缔组织病：SLE类风湿性关节炎

D免疫性缺陷性疾病：低丙种球蛋白血症第75页,共98页，星期六，2024年，5月（一）温抗体型自身免疫性溶血性贫血（温抗体型AIHA）发病机制：1.感染及淋巴组织和结缔组织等产生自身抗体，RBC抗原结构发生改变。2.病原微生物毒素或酶能改变膜的抗原性，红细胞不能识别自身抗体，表面阴电下降，出现自身凝结现象.

3.ATP合成及含量减少，糖酵解作用下降影响RBC寿命和携氧功能第76页,共98页，星期六，2024年，5月（一）温抗体型自身免疫性溶血性贫血（温抗体型AIHA）临床表现：多样性，轻重不一.主要表现:衰竭、苍白,半数左右有黄疸,肝脾肿大。

急性型：急性溶血、休克、血红蛋白尿、

尿毒症等.慢性型：病程迁延至3-6月以上，有淋巴结肿大、出血、血小板减少紫癜（Evan’ssyndrome）.第77页,共98页，星期六，2024年，5月血象:正色素性贫血，红细胞大小不一、可见红细胞自身凝集、碎片.可见嗜多色性、点彩红细胞;数量不等的球形红细胞及幼红细胞。网织红细胞增高.白细胞多数正常，急性型可高达>50×109/L血小板多数正常。10%-20%患者可表现血小板减少——Evan’s综合症【实验室检查】×100×1000×1000第78页,共98页，星期六，2024年，5月【实验室检查】

骨髓象：增生明显活跃,以幼红细胞增生为主，粒/红比例倒置,幼红细胞可呈巨幼样变.再障危象时全血细胞减少.特殊检查:抗人球蛋白试验：直接试验更有意义

①多数为抗IgG和C3型，治疗困难,预后差

②抗IgG型③抗C3型：少见,预后好

红细胞脆性试验：

自溶+纠正试验:且能被ATP纠正

第79页,共98页，星期六，2024年，5月【温抗体型AIHA诊断与鉴别诊断】

【诊断】:有血管外溶血及贫血,Coombs试验阳性【鉴别诊断】：WAIHA是由于抗体附着在红细胞表面，导致红细胞呈球形，故应注意与遗传性球形红细胞增多症(HS)相鉴别，HS可有阳性家族史，但无抗自身红细胞的温抗体。

第80页,共98页，星期六，2024年，5月第九章第五节免疫性溶血性贫血检查（二）冷抗体型自身免疫性溶血性贫血

阵发性冷性血红蛋白尿。

冷凝集素综合征。

冷抗体型自身免疫性溶血性贫血：

又分为两种类型第81页,共98页，星期六，2024年，5月（二）冷凝集素综合征（CAS）

冷凝集素综合征是冷诱导因素导致的冷凝集素IgM抗体引起的自身免疫性慢性溶血性贫血和微循环阻塞为特征的一组疾病，又叫“冷血凝集素病”。抗体与抗原发生作用的最适宜温度是0℃～4℃，在37℃或31℃～32℃以上的温度，抗体与红细胞抗原发生完全可逆的分解，红细胞凝集迅速消失。常见于寒冷季节，中老年患者多见，分为原发性和继发性两种。以血管外溶血为主，亦可见血管内溶血。病人易出现雷诺现象：指（趾）端、鼻尖、耳廓发绀，黄疸。第82页,共98页，星期六，2024年，5月【CAS实验室检查】1.血象红细胞大小不等、异形、嗜多色性、自身凝结现象。室温制备的血涂片上见红细胞成堆，用室温生理盐水稀释不能消除，如将玻片育温在涂片可消除。2.骨髓象

增生活跃，幼红细胞增生显著3.冷凝集素试验

阳性，几乎均为IgM,抗体效价甚至高至1︰1000～1︰16000。

×100×1000第83页,共98页，星期六，2024年，5月4.直接抗人球蛋白试验(Coombs)

阳性。发生阳性的原因是抗人球蛋白血清与红细胞表面的C3补体发生反应。因有冷凝集素的作用，故试验必须在37℃条件下进行，在试验前红细胞应先用温盐水洗涤过。

第84页,共98页，星期六，2024年，5月【CAS的诊断与鉴别诊断】诊断：①有“雷诺现象”发生.②静脉抽血时有红细胞自凝现象。③轻度贫血及黄疸。④Coombs试验阳性，几乎均为C3型.⑤冷凝集素试验阳性，效价可达1：1000甚至1：16000.第85页,共98页，星期六，2024年，5月【CAS的诊断与鉴别诊断】CAS的鉴别诊断1.阵发性冷性血红蛋白尿症

冷热溶血试验阳性。而冷凝集素试验阴性2.温抗体型自身免疫性溶血性贫血冷凝集素的效价低，IgG温抗体效价高3.雷诺综合征(Raynaud)

发病不一定在寒冷季节，冷凝集素试验和Coombs试验均阴性4.冷球蛋白血症患者血浆黏滞性增高，冷凝集素试验和Coombs试验均阴性

冷热溶血试验阳性，而冷凝素试验阴性

冷凝素的效价低，IgG温抗体效价高

发病不一定在寒冷季节，冷凝集试验和coombs试验均阴性

患者血浆粘滞性增高，冷凝集试验和coombs试验均阴性第86页,共98页，星期六，2024年，5月（三）阵发性冷性血红蛋白尿症PCH

PCH是全身或局部受寒后突然发生的以血红蛋白尿为特征的一种罕见疾病.又称：阵发性寒冷性/冷性血红蛋白尿.自免溶贫中的少见类型,分原发性和继发性两种。

原发性：病因不明。

继发性：常见于儿童时期，伴发于一些感染。如麻疹、水痘、传单、先天梅毒等。

抗体：主要是IgG，为冷反应（或称“双相”性抗体）低温时抗体和补体结合于红细胞表面但不发生溶血，温度再升到37℃时在补体的作用下发生血管内溶血。概述第87页,共98页，星期六，2024年，5月【

PCH实验室检查】①血液检查;红细胞大小不一、畸形、并有球形红细胞、红细胞碎片、嗜碱性点彩红细胞、骨髓象：幼红细胞增生。②尿液检查：反复发作者有含铁血黄素尿；发作时尿潜血阳性。③其他检查：冷热溶血试验阳性和抗人球蛋白试验阳性，为确诊试验。第88页,共98页，星期六，2024年，5月【PCH的诊断与鉴别诊断】诊断：①患者受寒出现短暂的寒战、高热、恶心、呕吐等症状②有严重贫血及血红蛋白尿③冷热溶血试验阳性--④Hb尿发作时Coombs试验阳性鉴别诊断：①PNH多为慢性病程,反复出现的血红蛋白尿.实验室检查酸化血清溶血试验（Ham试验）为阳性。②温抗体型自身免疫性溶血性贫血诱因不同，冷热溶血试验阴性。第89页,共98页，星期六，2024年，5月

新生儿同种免疫性溶血性贫血，绝大多数是由于母子血型不合引起，母亲的同种免疫抗体通过胎盘绒毛膜进入胎儿血循环与胎儿红细胞凝集，使之破坏而出现溶血，继而导致贫血等症状。主要原因：ABO或RH母子血型不合（四）新生儿同种免疫性溶血性贫血IHDN

概述第90页,共98页，星期六，2024年，5月【IHDN实验室检查】①血型及血型抗体测定：先查孕妇和丈夫血型，再检测孕妇血型抗体。必要时再做特殊性抗体，如果连续检查发现效价明显上升，提示胎儿受累。②羊水检