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文档简介
北京市延庆区20202021学年高二下学期期中生物试题学校:___________姓名:___________班级:___________考号:___________一、单选题1.果酒和果醋制作过程中,发酵条件的控制至关重要,下列相关措施正确的是()A.葡萄汁要装满发酵瓶,营造无氧环境,以利于发酵B.在葡萄酒发酵过程中,每隔12h左右打开瓶盖一次,放出C.果酒发酵过程中温度控制在30℃,果醋发酵过程中温度控制在20℃D.在果醋发酵过程中,要适时通过充气口充气,以利于醋酸菌的代谢2.禾草灵(FE)是一种现代农业常用除草剂,大量使用后造成的环境污染日益严重,为获得能高效降解FE的菌株,科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果(FE特征吸收峰在239nm处),以下说法不正确的是()A.应从大量使用除草剂的土壤中获取菌株B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选D.据吸收光谱可知,W1菌株对FE有明显降解能力3.微生物培养过程中,需通过选择培养或鉴别培养来筛选目标菌株。下列相关叙述不正确的是A.能够在选择培养基上生长出来的菌落一定是目标菌株B.培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株C.尿素分解菌能够将尿素分解为氨,使酚红指示剂变红D.纤维素分解菌能够分解纤维素,菌落周围出现透明圈4.下图为用取自基因型为AaBb的胡萝卜韧皮部细胞培育出胡萝卜小苗的过程,下列叙述中不正确的是()A.a→b过程是通过细胞有丝分裂完成的B.b→c→d过程发生了细胞分化C.a→b过程中使用的培养基中应含有机碳源和氮源D.杂合植株经上述过程获得的幼苗会出现性状分离5.下图表示用草木樨状黄芪(2n=32)和木本霸王(2n=22)培育抗盐新品种过程,有关叙述正确的是A.①过程需在低渗溶液中用相应的酶处理B.原生质体A和原生质体B的细胞器种类完全相同C.最终培养出的杂种植物应具有双亲所有的性状D.经过④过程所得的愈伤组织细胞含有四个染色体组6.拟利用番茄表达人类凝血因子Ⅸ,操作步骤排序正确的是()①制备工程农杆菌②构建植物表达载体③获取人类凝血因子Ⅸ基因④番茄植株中凝血因子Ⅸ基因的检测⑤用农杆菌转化番茄植株并筛选⑥提取凝血因子Ⅸ并检测活性A.③①②⑤⑥④ B.⑥③①②⑤④C.④③②①⑤⑥ D.③②①⑤④⑥7.某实验室做了下图所示的实验研究。下列相关叙述中正确的是()A.与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较低B.利用该单克隆抗体与H1N1病毒外壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体C.每个Y细胞只产生一种抗体,故过程④不需进行筛选D.过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程8.关于“克隆羊”与“试管羊”的叙述,错误的是()A.克隆羊是无性生殖的产物,试管羊是有性生殖的产物B.培育克隆羊需要进行核移植,培育试管羊需要进行体外受精C.培育克隆羊是细胞水平的技术,培育试管羊是DNA分子水平的技术D.克隆羊的染色体来自提供细胞核的亲本,试管羊的染色体来自双亲9.细胞工程中,选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是()A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞B.选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率C.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体D.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗10.利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂,用于降解某种农药的残留,基本流程如图。下列叙述正确的是()A.过程①的反应体系中需要加入逆转录酶和核糖核苷酸B.过程②需使用限制酶和DNA聚合酶,是基因工程的核心步骤C.过程③需要使用NaCl溶液制备感受态的大肠杆菌细胞D.过程④可利用DNA分子杂交技术鉴定CarE基因是否成功导入受体细胞11.科学家利用深海鱼美洲拟鲽抗冻蛋白基因成功培育出了耐寒的番茄新品种(1~4号),并在低温条件下进行了致死温度的测定,结果如下。有关叙述不正确的是()对照组新品种1号2号3号4号致死温度(℃)5℃6℃6.5℃7℃7℃A.通常采用显微注射法将抗冻蛋白基因导入番茄细胞B.利用组织培养技术将转基因番茄细胞培育成植株C.应使用未转入抗冻蛋白基因的番茄作为对照组D.表中数据表明番茄新品种的抗寒能力有所提高12.关于现代生物技术的应用叙述,不正确的是()A.植物组织培养技术可用于转基因植物的培育B.动物细胞培养技术可以克隆出动物个体C.单克隆抗体技术可用于制备“生物导弹”D.蛋白质工程可以改造自然界现有的蛋白质13.胚胎干细胞的发育和自我更新受多个基因调控(如下图)。下列有关胚胎干细胞的叙述错误的是()A.可分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞B.将干细胞用于疾病的临床治疗没有任何风险C.Nanog基因突变可能使胚胎干细胞自我更新受阻D.抑制Oct3/4表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化14.在现代生物科技的应用中不需要进行检测与筛选的是()A.利用杂交瘤细胞制备单克隆抗体B.利用基因工程培育具有抗虫特性的新植株C.利用植物组织培养技术工厂化繁育兰花D.利用胚胎工程培育具有优良性状的试管动物15.关于生物技术的安全性和伦理问题,下列有关叙述不正确的是()A.虽然生殖性克隆人存在伦理问题,但克隆技术已经成熟B.载体的标记基因(如抗生素抗性基因)可能指导合成有利于抗性进化的产物C.目的基因(如杀虫基因)本身编码的产物可能会对人体产生毒性D.目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内,从而可能打破生态平衡二、综合题16.酸奶是牛奶经过乳酸菌(主要是保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌)发酵制成的。乳酸菌可将牛奶中的乳糖转化为乳酸,从而减轻某些人群的乳糖不耐受症状。请回答问题:(1)为鉴别市售酸奶中的菌种,应该采用平板划线法或_______法,在_______培养基上进行接种,观察所获单菌落的特征。还要对菌落中的菌种进行涂片,并用_______进行进一步的观察和鉴定。(2)实验前需要进行灭菌的是_______。(3)某同学在配制平板时加入CaCO3,从而成功筛选出高效产生乳酸的菌株,其筛选依据的原理是_________________。(4)抗生素在现代商牧业中的广泛应用,不可避免地造成牛奶中抗生素残留。若长期饮用含有抗生素的牛奶,会对人体健康造成危害。利用嗜热链球菌对抗生素的高敏感性,该生进行了如下实验:将灭菌的滤纸圆片(直径8mm),分别浸润在不同处理的牛奶中一段时间后,放置在涂布了嗜热链球菌的平板上(如左图),在37℃下培养24h,测量结果如下表:组别牛奶处理方法抑菌圈宽度(mm)1含抗生素消毒鲜牛奶2不含抗生素消毒鲜牛奶03含抗生素鲜牛奶4不含抗生素鲜牛奶05待测奶样注:消毒方法为80℃水浴加热5min,然后冷却至37℃通过3、4组实验可得出的结论为____________________;通过1、3组实验可得出的结论为:__________________;第5组的实验结果表明,此待测奶样是否适合用于制作酸奶?______________。17.草莓常用匍匐茎进行营养繁殖,植株若感染病毒易传播给后代,病毒在作物体内积累,会导致产量降低,品质变差。科研人员通过一系列的方法、步骤,建立了草莓脱毒快速繁殖体系。(1)外植体经过_________________等过程能够发育成完整植株,体现了植物细胞有______________。若培育脱毒组培苗,通常选取植株分生组织(如茎尖或根尖)作为外植体的主要原因是_________________________________。(2)在超净工作台上,先后用75%酒精和0.1%的氯化汞对草莓匍匐茎尖进行_________,每次处理后均需用_________冲洗3至5次,然后接种到经_____________处理的培养基上。(3)图是两种植物激素不同浓度与形成芽、根、愈伤组织的关系,其中植物激素Y属于_________________(生长素类、细胞分裂素类)激素。不同植物激素浓度与芽、根、愈伤组织的关系(4)科研人员进一步用不同浓度和比例的植物激素处理外植体,一段时间后观察结果如下表(6BA是细胞分裂素类激素,IBA是生长素类激素):处理组6BA(mg/L)IBA(mg/L)接种数(个)萌芽率(%)增殖系数10.501233.35.420.50.11283.36.630.50.21258.34.341.001250.03.951.00.11241.03.861.o0.21233.33.0萌芽率(%)=草莓外植体萌芽数/草莓外植体总接种数×100%增殖系数=草莓组培苗增殖腋芽数/草莓组培苗总接种数从表中可以看出,处理组___________草莓的萌芽率和增殖系数显著高于其他组,该组激素配比可用于草莓的快速繁殖。若将组培苗移植到大田中种植,还需要诱导_________。结合图1分析,此时6BA与IBA比值应_________(大于1、等于1、小于1)。18.牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原菌,它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白,在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体,并进行相关研究。(1)将等量的纯化VspX蛋白作为_________分别注射到5只小鼠体内,经过二次免疫后测定小鼠抗VspX抗体的免疫效果,取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。(2)在融合前三天,对1号小鼠加强免疫一次,目的是_________________。然后取小鼠的脾脏细胞用_________试剂诱导与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到_____________。(3)一段时间后,将(2)所得细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,检测原理如下图。①在检测时需要将VspX蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原,并加入多孔板培养槽中的_________(细胞、上清液),即待测样本。②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与________结合的酶标抗体洗去。③加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表_______________________。(4)将上述细胞经___________酶处理,制成细胞悬液,除添加一般营养物质外,还需加入__________,并置于________培养箱中进行扩大培养,提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测,结果如下图(5)依据(4)的实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与3、4结合,具有很强的________,可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病的____________________等方面的研究。19.苏云金芽孢杆菌产生的Bt毒蛋白具有良好的杀虫效果,且具有高效、安全的优点,Bt基因也因此成为应用最为广泛的杀虫基因。Bt基因位于苏云金芽孢杆菌的质粒A上,为了了解Bt基因的序列信息首先要得到完整的Bt基因,科学家们进行了如下实验:(1)首先用限制酶HindIII处理质粒A,得到多个DNA片段,分别与质粒B连接,获得重组DNA分子,并将这些重组DNA分子导入经_____________处理的大肠杆菌中,由此构建了苏云金芽孢杆菌的部分基因组文库。(2)研究人员利用抗Bt毒蛋白的抗体,进行_____________,并通过电泳检测上述文库中不同大肠杆菌菌株的Bt毒蛋白表达情况,结果如图1所示。根据电泳结果推测菌株3中仅插入了Bt基因的一部分序列,并非完整基因,研究人员作出这一推测的依据是_____________。对菌株3中插入的DNA片段序列进行测序(计为Bt1序列),并根据序列制成了DNA探针X。(3)为了获得完整的Bt基因,研究人员又使用限制酶PstI切割质粒A,得到多个DNA片段。利用探针X通过_____________方法可确定其中含有Bt基因序列的DNA片段,进行测序(计为Bt2序列)。如图2,为了将Bt1和Bt2两段DNA分子连接起来,研究人员用限制酶_____________和DNA连接酶处理两段序列,获得的重组DNA分子计为Bt3。(4)为了进一步验证Bt3中包含完整的Bt基因,请写出简要的实验步骤和检测指标。_____________________________________________________________________20.新型冠状病毒是一种单链RNA病毒,新型冠状病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光PCR鉴定。(1)首先,从样本中提取病毒RNA,经________酶作用生成cDNA。然后以cDNA为模板进行实时荧光PCR扩增,测定样品中病毒核酸量。(2)通过实时荧光PCR扩增目的基因,需额外添加荧光标记探针(一小段单链DNA,可与目的基因中部序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到(如图1)。①当样本中有目的基因时,引物和探针与目的基因退火时,通过________原则而特异性结合。②在PCR循环的延伸阶段,TaqDNA聚合酶催化子链的合成并水解探针。检测到的荧光强度与反应体系中DNA分子数呈_________(正相关或反相关反)关系。(3)通过实时荧光PCR检测新型冠状病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图2所示。①与指数增长期相比,线性增长期目的基因数量的增长率下降,原因有_________。②Ct值的含义:在PCR扩增过程中,每个反应管内的荧光信号达到设定的荧光阈值时所经历的扩增循环数。因此,当样本中初始模板越多时,Ct值就_________。③某新型冠状病毒核酸检测说明书标明,Ct≤37判定为阳性,Ct>40或无Ct值判定为阴性。图2所示新型冠状病毒核酸检测结果应判定为_________。(4)阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素有________。a.取样太早,样本中病毒量少,达不到实时荧光PCR检测阈值b.样本被污染,RNA酶将病毒RNA降解c.病毒发生变异21.阅读下面的材料,回答问题胰岛素的应用是糖尿病治疗历史上的一个里程碑。胰岛素自1922年用于临床以来,就成为治疗糖尿病的特效药物。目前全世界糖尿病患者已超过四亿,为临床提供充足、质量可靠的胰岛素制剂是现代生物制药领域的一项重要工程。人胰岛素由胰岛β细胞合成,核糖体上最初形成的是前胰岛素原单链多肽,进入内质网腔后,信号肽被切除,形成胰岛素原。高尔基体内的特异性肽酶将胰岛素原的C肽区域切除,A链和B链通过二硫键形成共价交联的活性胰岛素(如图)。最初用于临床的胰岛素几乎都是从猪、牛胰脏中提取的。猪、牛胰岛素与人胰岛素生理功能相似,但氨基酸序列有微小差异。接受动物胰岛素治疗的患者有5%~10%出现不同程度的过敏反应,抗动物胰岛素抗体还可能对患者的胰岛β细胞功能产生负面影响。随着基因工程技术的发展,重组人胰岛素逐渐取代动物胰岛素。早期的重组人胰岛素生产,采用A、B链分别表达法。后来该方法被胰岛素原表达法取代,即由大肠杆菌合成胰岛素原,然后经细胞外酶切获得胰岛素。1987年用酵母菌生产重组人胰岛素的方法出现。重组人胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同,但无法完全模拟生理胰岛素曲线,容易导致血糖波动,甚至导致低血糖发生。上世纪90年代,科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构,研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物,包括速效胰岛素和长效胰岛素类似物。例如,将人胰岛素B链第28位的脯氨酸替换为天门冬氨酸,可有效抑制胰岛素单体的聚合,皮下注射这种速效胰岛素类似物后,起效快(1020分钟起效)、血药浓度峰值高、药效消失快,已经在临床上广泛应用。(1)用猪胰岛素进行治疗,易诱导人体产生抗猪胰岛素抗体,原因是____________。(2)人胰岛素基因有2个内含子。利用大肠杆菌通过胰岛素原法生产重组人胰岛素,获取目的基因时,不宜采用的方法是________a.直接从细胞内总DNA中分离目的基因b.用化学方法直接人工合成目的基因c.以mRNA为模板逆转录合成目的基因d.利用PCR扩增人胰岛素原基因的编码序列(3)与大肠杆菌相比,利用酵母菌生产胰岛素的优势有_____________________。(4)重组人胰岛素工程菌构建完成后,还需要通过________工程技术进行胰岛素的生产。(5)正常人胰岛素的生理性分泌,可分为基础胰岛素分泌(24小时持续脉冲式分泌微量胰岛素,维持空腹状态下血糖稳定)和进餐后的胰岛素分泌。能更好地模拟餐时生理胰岛素曲线的是________(选填“速效”或“长效”)胰岛素类似物。参考答案1.D【分析】1.果酒制作菌种是酵母菌,代谢类型是异养兼性厌氧型真菌,属于真核细胞,条件是18~25℃、前期需氧,后期不需氧。2.果醋制作菌种是醋酸菌,属于原核细胞,适宜温度为30~35℃,需要持续通入氧气。【详解】A、葡萄汁装瓶时需要留1/3的空间,以利于酵母菌前期有氧呼吸过程,通过出芽生殖大量,以利于后期发酵,A错误;B、在葡萄酒发酵过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,避免杂菌污染,放出CO2,而不是打开,B错误;C、果酒发酵过程中温度控制在18~25℃,果醋发酵过程中温度控制在30℃左右,C错误;D、在果醋发酵过程中,要适时通过充气口充气,以利于醋酸菌的代谢,因为醋酸菌是需要性微生物,D正确。故选D。【点睛】2.B【分析】选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。选择培养基的制作(1)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物。如以石油是唯一碳源,筛选出能利用石油的微生物生长。(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时,可筛选出固氮微生物。(3)通过某些特殊环境分离微生物。如在高温环境中可分离得到耐高温的微生物。(4)依据某些微生物对某种物质的抗性,在培养基中加入此种物质,以抑制对该物质不具抗性的微生物生长,而不影响对该物质具有抗性的微生物生长。如培养基中加入青霉素,可筛选出酵母菌和霉菌。【详解】A、由于只有被除草剂严重污染过的土壤才可能含有高效降解该除草剂的分解菌,所以为了获取能高效降解该除草剂的菌株,应从大量使用除草剂的土壤采集土壤样品,A正确;BC、为了淘汰不能分解FE的微生物,而仅保留能分解FE的菌种,则在配制选择培养基时应以FE作为唯一碳源,应将土壤稀释液接种到以FE为唯一碳源的选择性培养基上进行筛选,B错误,C正确;D、据吸收光谱可知,经W1菌株降解后在239nm处的特征吸收峰明显减弱,说明W1菌株对FE有明显降解能力,D正确。故选B。【点睛】理解目的菌株的筛选、接种方法和培养基的配制等相关知识是解答本题的关键。3.A【分析】尿素分解菌能够产生脲酶,在脲酶的作用下能够将尿素分解为氨,使pH升高与酚红指示剂反应呈红色;刚果红染液可以与纤维素反.应呈红色,纤维素分解菌能够将纤维素分解而出现无色的透明圈。【详解】A.能够在选择培养基上生长出来的菌落不一定是目标菌株,有可能是能够利用分解纤维素的菌株产生的葡萄糖,这样的假阳性目的菌株,A错误;B、在培养基中加入抗生素能够筛选出具有相应抗性的菌株,B正确;C、尿素分解菌能够将尿素分解为氨,使培养基呈碱性,从而通使酚红指示剂变红,C正确;D、纤维素分解菌能够分解纤维素,在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,D正确。故选A。4.D【分析】离体的胡萝卜韧皮部细胞,在培养一段时间后,脱分化,通过细胞分裂,形成愈伤组织;脱分化的愈伤组织继续培养,又可重新分化成根或芽等器官;再分化形成的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体,说明高度分化的植物细胞具有全能性。【详解】A、a→b过程是脱分化过程形成愈伤组织,该过程的细胞分裂方式是有丝分裂,A正确;B、b→c→d过程为再分化过程,形成根或芽等器官,发生了细胞分化,B正确;C、a→b过程植物不能进行光合作用,所需的营养来自培养基,培养基应含有机碳源和氮源,C正确;D、图中植物组织培养过程的细胞分裂方式是有丝分裂,杂合植株经上述过程获得的幼苗的基因型与亲本相同,仍然为杂合子,不会出现性状分离,D错误。故选D。【点睛】5.D【分析】分析图解:图中①过程是用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁,②过程是原生质体的融合过程,③过程是融合细胞再生出细胞壁,④过程是植物组织培养的脱分化形成愈伤组织。【详解】A、①过程去除植物细胞壁后,原生质体失去细胞壁的保护,所以需要在等渗溶液中进行,以防止原生质体吸水涨破或失去活性,A错误;B、叶肉细胞内有叶绿体,而胚轴细胞没有,原生质体A和原生质体B的细胞器种类不完全相同,B错误;C、理论上,融合后得到的杂种细胞含两种植物的遗传物质,但因为基因之间的相互作用,导致部分基因并不能表达,所以一般都不能表现出双亲的所有性状,C错误;D、该题中的两个植物细胞,各有两个染色体组,并且两个植物细胞体内的染色体组不相同,故两细胞融合形成的细胞内含四个染色体组,D正确。故选D。【点睛】6.D【分析】利用番茄表达人凝血因子属于基因工程的技术范畴。【详解】基因工程的基本步骤:获取目的基因,构架表达载体,受体细胞的转化,目的基因的表达及检测。
对植物细胞进行转化通常用农杆菌转化法。
综合可知正确的排序应为:③②①⑤④⑥,故选D。7.B【分析】据图分析,过程①类似于植物组织培养过程中的脱分化,过程②表示细胞分裂和分化,过程③表示动物细胞融合成杂交瘤细胞,过程④是动物细胞培养。【详解】A、过程①是通过诱导基因作用使纤维母细胞脱分化为干细胞(保留分裂和分化能力),与纤维母细胞(体细胞)相比,干细胞的全能性较高,A错误;B、单克隆抗体作为诊断试剂,与该病毒核衣壳蛋白特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点,因此利用该单克隆抗体与H1N1病毒外壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体,B正确;C、虽然每个Y细胞只产生一种抗体,但不一定是所需的抗体,因此④需要用抗原抗体杂交的方法筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,C错误;D、过程②是干细胞再分化为其他组织器官细胞,细胞分化过程中遗传物质没有改变,D错误。故选B。8.C【分析】克隆羊是经过动物核移植技术得到的,试管羊是经过体外受精,再将胚胎移植后发育得到的。【详解】A、克隆羊没有精子核卵细胞结合过程,直接通过核移植技术得到,是无性生殖的产物,试管羊通过体外精子和卵细胞结合形成受精卵发育而来,是有性生殖的产物,A正确;B、培育克隆羊需要进行核移植,移入去核的卵母细胞发育而来,培育试管羊需要进行体外受精,进行胚胎移植发育而来,B正确;C、培育克隆羊和培育试管羊都是在细胞水平上操作,都属于细胞水平的技术,C错误;D、克隆羊经过完整的细胞核移植,染色体来自提供细胞核的亲本,试管羊经过体外受精,染色体来自双亲,D正确。故选C。9.C【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为克隆个体。2、选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞大,容易操作;卵(母)细胞质多,营养丰富;含有促使细胞全能性表达的物质。3、植物组织培养技术的应用:植物繁殖的新途径(微型繁殖、作物脱毒、人工种子)、作物新品种的培育(单倍体育种、突变体的利用)、细胞产物的工厂化生产。【详解】A、高度分化的动物体细胞不能继续分裂,无法获得大量的细胞,A错误;B、选择去核的卵细胞能够激发体细胞核全能性,而且含有细胞发育需要的早期营养物质,因此选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率,B正确;C、选择植物的愈伤组织还没有分化,进行诱变处理,再进行人工选择,可获得优质的突变体,C正确;D、茎尖等分生区组织几乎不含病毒,因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗,D正确。故选A【点睛】10.D【分析】分析图解:图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA;过程②表示构建基因表达载体(基因工程核心步骤);过程③表示将目的基因导入受体细胞;过程④表示通过筛选获得工程菌。【详解】A、过程①表示通过反转录法合成目的基因,该过程需要逆转录酶和脱氧核糖核苷酸,A错误;B、过程②需使用限制酶和DNA连接酶构建基因表达载体,是基因工程的核心步骤,B错误;C、过程③常用Ca2+处理大肠杆菌使其成为易于吸收DNA的感受态细胞,C错误;D、过程④可利用DNA分子杂交技术鉴定CarE基因是否成功导入受体细胞,D正确。故选D。11.A【分析】表格分析:与对照组相比,转基因新品种番茄的耐寒能力都提高了,其中3号和4号最抗冻。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。【详解】A、将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,A错误;B、植物细胞具有全能性,可利用组织培养技术将转基因番茄细胞培育成植株,B正确;C、应使用未转入抗冻蛋白基因的番茄作为对照组进行比较,C正确;D、表中数据表明,与对照组相比,转基因番茄新品种的抗寒能力都提高了,D正确。故选A。12.B【详解】试题分析:植物组织培养技术可用于转基因植物的培育,A正确;由于动物细胞的全能性难以表达,动物细胞培养技术不能克隆出动物个体,B错误;将抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、化学药物相结合,制成“生物导弹”,可以将药物定向带到癌细胞部位杀死癌细胞,C正确;蛋白质工程可以改造自然界现有的蛋白质,D正确。考点:本题考查细胞工程和蛋白质工程的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。13.B【分析】如图Nanog基因促进胚胎干细胞的自我更新,Stat3基因抑制胚胎干细胞自我更新,两基因均抑制其发育为原始内胚层的过程;Oct3/4基因抑制胚胎干细胞发育为滋养层。【详解】A、胚胎干细胞具有发育全能性,能发育为成年动物体内任何一种类型的细胞,A正确;
B、干细胞用于疾病的临床治疗可能会引起免疫排斥,干细胞肿瘤化等风险,B错误。
C、Nanog基因促进胚胎干细胞自我更新,突变可能使细胞自我更新受阻,C正确;
D、Oct3/4基因抑制胚胎干细胞发育为滋养层,抑制该基因表达会促进胚胎干细胞向滋养层分化,D正确。
故选B。14.C【分析】现代生物技术的应用中,有许多技术是需要筛选和检测的,如制备单克隆抗体时,需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,还需要进行抗体阳性检测得到能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞;植物体细胞杂交过程中,需要筛选出杂种细胞进行组织培养;转基因技术中,需要筛选重组子和检测目的基因是否导入和表达。【详解】A、利用杂交瘤细胞制备单克隆抗体,需进行抗体阳性检测,筛选出出能产生特异抗体的杂交瘤细胞,A错误;B、将抗虫基因导入植物细胞时,需要检测目的基因是否导入受体细胞和目的基因是否表达,B错误;C、利用植物组织培养技术工厂化繁育兰花因通过无性繁殖保持亲本的优良性状,故不需检测或筛选,C正确;D、利用胚胎工程培育具有优良性状的试管动物需要检测是否出现优良性状,D错误。故选C。【点睛】15.A【分析】1、生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆。即用生殖技术制造完整的克隆人,目的是产生一个独立生存的个体。于此相对的是研究性克隆或医学性克隆,指的是产生研究所用的克隆细胞。不产生可独立生存的个体。2、克隆技术的伦理问题:(1)克隆人是对人权和人的尊严的挑战。(2)克隆人违反生物进化的自然发展规律。(3)克隆人将扰乱社会家庭的正常伦理定位。(4)克隆人的安全性在伦理上也难以确认。【详解】A、生殖性克隆人存在伦理问题,且克隆技术也不成熟,A错误;B、运载标记基因(如抗生素基因)多为抗生素基因,可能指导合成有利于抗性进化的产物,如抗除草剂的杂草,需要担心,B正确;C、目的基因(如杀虫基因)本身编码的产物可能会对人体产生毒性,需要担心,C正确;D、目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内,造成基因污染,从而可能打破生态平衡,D正确。故选A。【点睛】16.稀释涂布平板固体显微镜ab乳酸会与CaCO3反应形成透明圈,透明圈直径越大,产生乳酸能力越强。抗生素能够杀死嗜热链球菌,形成抑菌圈80℃水浴加热5min的消毒方法不会使牛奶中的抗生素减少或消除不适合【分析】微生物常见的接种方法:①平板划线法:将已熔化的培养基倒入培养皿制成平板,然后接种,划线,在恒温箱中培养。在最初划线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延续,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,取适量均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。无菌技术:①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌;③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行;④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。【详解】(1)菌落特征是区别不同微生物的重要依据。为鉴别市售酸奶中的菌种,应该采用平板划线法或稀释涂布平板法,在固体培养基上进行接种,观察所获单菌落的特征。还要对菌落中的菌种进行涂片,并用显微镜进行进一步的观察和鉴定。(2)消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子);灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内所有的微生物,包括芽孢和孢子。培养基和培养皿使用前需要灭菌。恒温培养箱和实验者的双手需要消毒。酸奶中含有菌种,不能进行消毒和灭菌,故选ab。(3)某同学在配制平板时加入CaCO3,从而成功筛选出高效产生乳酸的菌株,其筛选依据的原理是乳酸会与CaCO3反应形成透明圈,透明圈直径越大,菌株产生乳酸的能力越强。(4)由表格信息可知,3、4组实验的自变量是有无抗生素,实验结果显示含抗生素鲜牛奶有抑菌圈,不含抗生素鲜牛奶没有抑菌圈,说明抗生素能够杀死嗜热链球菌,形成抑菌圈。1、3组实验的自变量是鲜牛奶是否消毒,实验结果显示不管鲜牛奶是否消毒,其抑菌圈都存在,且大小无明显差异,说明80℃水浴加热5min的消毒方法不会使牛奶中的抗生素减少或消除。第5组待测奶样抑菌圈宽度为5.8mm,说明该奶样含有抗生素,故不适合用于制作酸奶。【点睛】本题考查了微生物的分离与培养相关知识,要求考生能够掌握微生物接种、分离与鉴定的方法,明确消毒和灭菌的区别以及使用范围等,再结合表格信息明确实验变量,并能对比得出正确的实验结论。17.(1)脱分化、再分化全能性分生区附近的病毒极少,甚至无病毒(2)消毒无菌水(高压蒸汽)灭菌(3)生长素类(4)2生根小于1【分析】分析题图:在植物组织培养时,通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组织的生长。所以图中激素Y是生长素,激素X是细胞分裂素。(1)外植体经过脱分化、再分化等过程能够发育成完整植株,体现了植物细胞有全能性。若培育脱毒组培苗,由于分生区附近的病毒极少,甚至无病毒,因此通常选取植株分生组织(如茎尖或根尖)作为外植体。(2)在超净工作台上,先后用75%酒精和0.1%的氯化汞对草莓匍匐茎尖进行消毒,每次处理后均需用无菌水冲洗3至5次,然后接种到经灭菌的培养基上。(3)据题图分析可知,生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时(大于1),有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时(小于1),有利于芽的分化、抑制根的形成;比值适中时(等于1),促进愈伤组织的生长。由图可知,当植物激素Y用量越高时,有利于根的分化,而当植物激素X用量越高时,有利于芽的分化,所以图中激素Y是生长素,激素X是细胞分裂素。(4)从表中可以看出,处理组2草莓的萌芽率和增殖系数显著高于其他组,该组激素配比可用于草莓的快速繁殖。若将组培苗移植到大田中种植,还需要诱导生根。结合图1分析,生长素用量大于细胞分裂素用量时,有利于根的分化,因此6BA与IBA比值应小于1,这样有利于根的分化。【点睛】本题考查植物组织培养的相关知识,意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系的能力;能运用所学知识,对生物学问题作出准确的判断。18.(1)抗原(2)刺激机体产生更多的浆细胞PEG(或灭活的病毒)杂交瘤细胞(3)上清液抗VspX抗体抗VspX抗体的量(4)胰蛋白血清二氧化碳培养箱(5)特异性诊断、治疗【分析】单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内,使其发生免疫,小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体制备过程中的两次筛选:第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为B淋巴细胞,B为骨髓瘤细胞),不需要A、B、AA、BB型细胞;第二次筛选:利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选,获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。间接法测抗体,其基本原理:将特异性抗原包被在固相载体上,形成固相抗原,加入待测样本(含相应抗体),其中抗体与固相抗原形成抗原抗体复合物,再加入酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体,亦称二抗),与上述抗原抗体复合物结合。此时加入底物,复合物上的酶则催化底物而显色。(1)VspX蛋白作为抗原注射到小鼠体内,使小鼠产生特异性免疫应答。(2)为了使刺激机体产生更多的浆细胞,对1号小鼠加强免疫一次。然后用PEG(聚乙二醇)使小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,再通过选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。(3)①将特异性抗原包被在固相载体上,故将VspX蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原,由于抗体主要存在于上清液中,并加入多孔板培养槽中的上清液,即待测样本(含相应抗体)。②加入酶标抗体与上述抗原抗体复合物结合,同时需要用洗涤剂将未与抗VspX抗体结合的酶标抗体洗去。③加入相应酶促反应底物,复合物上的酶则催化底物而显色,颜色的深浅可代表抗VspX抗体的量。(4)加入胰蛋白酶使细胞分散开,制成细胞悬液,培养动物细胞,除添加一般营养物质外,还需加入血清(天然成分),并置于二氧化碳培养箱中(二氧化碳能维持pH稳定)进行扩大培养。(5)实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与3、4结合,具有很强的特异性,VspX单克隆抗体能与1、2结合可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病诊断、治疗等方面的研究。【点睛】本题考查单克隆抗体的制备和检测等有关知识,要求考生能够掌握单克隆抗体制备的过程;明确其中存在两个重要的筛选步骤;识记动物细胞融合的手段等,具有一定难度。19.Ca2+抗原抗体杂交菌株3中Bt基因表达的蛋白质的分子量小于Bt毒蛋白的分子量DNA分子杂交HindIII或PstI将Bt3与质粒B连接构建重组DNA后,导入大肠杆菌,用抗Bt毒蛋白的抗体进行抗原抗体杂交,并通过电泳检测该大肠杆菌菌株的Bt毒蛋白表达情况【分析】1、DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子。DNA分子杂交技术常用于基因工程中检测目标基因是否导入受体细胞。2、基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】(1)用Ca2+处理大肠杆菌,使大肠杆菌处于感受态,有利于重组DNA分子的导入。(2)检测目的基因是否翻译成蛋白质常采用抗原抗体杂交的方法。分析电泳图1可知,菌株3中Bt基因表达的蛋白质的分子量小于Bt毒蛋白的分子量,因此可推测菌株3中仅插入了Bt基因的一部分序列,并非完整基因。(3)利用DNA分子杂交技术,能与探针X形成杂交双链的DNA片段,即可确定其中含有Bt基因序列。分析图2可知,Bt1和Bt2具有部分相同序列,若用限制酶HindIII处理两段序列,可以将Bt2切开,获得相同序列和不同序列两部分,再用DNA连接酶连接Bt1和Bt2的不同序列
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