河南省郸城县第二高级中学2025届高三最后一模生物试题含解析

河南省郸城县第二高级中学2025届高三最后一模生物试题注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下图甲、乙表示两种蛋白质分子，其中“△○

口”各代表一种氨基酸，“-S-S-”代表二硫键。下列关于这两种蛋白质的差异比较的叙述，错误的是（）A．氨基酸的种类不同 B．氨基酸的元素组成不同C．氨基酸的数目不同 D．氨基酸的排列顺序不同2．下列对种群数量变化曲线的解读，不合理的是（）A．图1、2为种群在自然环境条件下的增长规律，图3所示为曲线Ⅱ条件下种群的存活率B．鱼类捕捞在图1的e点、图2的g点和图3的i点时进行，能获得最大日捕捞量C．若图1为酵母菌种群数量增长曲线，则Ⅰ为培养早期，Ⅱ的cd段酒精大量积累D．图3曲线的k点，种内斗争最激烈3．下列关于神经细胞生物电现象的叙述，正确的是A．将电位计的两电极置于神经纤维膜的外侧，给予一适宜刺激后可测出动作电位的大小B．将离体的神经纤维置于适宜的生理盐溶液，适当增加溶液的KCl浓度其静息电位的绝对值增大C．将离体的神经纤维置于适宜的生理盐溶液，适当增加溶液的NaCl浓度其动作电位的峰值增大D．神经纤维膜上动作电位的峰值会随刺激强度的增大而增大，随传导距离的增大而减小4．某生态系统中，除分解者外，仅有甲、乙、丙、丁、戊5个种群。调查得知，该生态系统有4个营养级，相邻营养级之间的能量传递效率为3%~24%，且每个种群只处于一个营养级。一年内输入各种群的能量数值如表所示，表中能量数值的单位相同。下列叙述正确的是（）种群甲乙丙丁戊能量1．562．843．34．485．54A．表中所示的能量总和是流经该生态系统的总能量B．若土壤中含有一定浓度的重金属铬，则甲生物比乙生物体内污染物浓度铬含量低C．该生态系统中第二营养级与第三营养级之间的能量传递效率约为6．4%D．该生态系统内实现了物质循环，碳元素在各种群间循环的主要存在形式是CO25．下列根据各概念图作出的判断，正确的是（）

A．若甲图表示植物细胞内糖类物质，则甲图可以表示多糖b和糖原a的关系B．若乙图中a和b分别代表DNA和RNA，则乙图可以代表硝化细菌的核酸C．丙图可体现出细胞生物膜系统c、核糖体a和线粒体b的关系D．丁图能体现生态系统消费者c、各种动物a和各种真菌b的关系6．马利筋（一种植物）含有强心苷对鸟兽有毒，故鸟兽一般不食用，而斑蝶却可以食用并将强心苷贮存于身体组织中从而出现一种怪味，导致一般的食虫鸟不吃它，同时还有另一种蝶类，其体色和体型都与斑蝶相似，但没有怪味儿，以下说法不能推出的是（）A．马利筋通过产生毒素进行自我保护，降低被捕食概率B．斑蝶可以免疫强心苷毒性从而增强自身种间竞争力C．类似班蝶的蝶类因不能产生怪味儿，易被食虫鸟捕食D．马利筋与斑蝶是长期自然选择协同进化的结果7．如图中的曲线表示人体内某抗体在两种免疫接种方式后的含量变化。下列说法正确的是（）A．疫苗必须通过注射进入人体B．采用方法1会使人体产生细胞免疫应答C．方法2中注射的可以是减毒的微生物D．注射天花疫苗属于方法1的免疫接种8．（10分）促红细胞生成素(ESF)既能刺激骨髓造血组织，使红细胞数增加，改善缺氧，又能抑制肝脏中的促红细胞生成素原(ESF原)的生成。下列分析正确的是（）A．血浆是红细胞与外界环境进行物质交换的媒介B．红细胞具有接收ESF的受体蛋白，从而改善缺氧C．ESF抑制肝脏中的ESF原的生成属于正反馈调节D．B细胞在骨髓中成熟，在细胞免疫中发挥重要作用二、非选择题9．（10分）图1为某湖泊生态系统的能量金字塔简图，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别代表不同的营养级，M1、M2表示不同的能量形式。图2表示能量流经营养级Ⅱ的变化示意图，其中a～g表示能量的值，a表示营养级Ⅱ摄入的总能量值。请据图回答：（1）图1中，营养级________________中的生物种类属于次级生产者。M2表示的能量形式为________________。位于营养级Ⅳ的生物个体数量往往少于营养级Ⅲ，主要原因是________________。（2）图2中，若甲表示营养级Ⅱ的摄入量，则乙表示________________。由图2推测生态系统能量流动的特点是________________。若营养级Ⅲ的同化量为h，则营养级Ⅱ、Ⅲ之间的能量传递效率为________________。（3）已知营养级Ⅳ中有一种杂食性生物（X），它的食物中有2/5来自营养级Ⅲ，2/5来自营养级Ⅱ，1/5来自营养级Ⅰ。若生物（X）要增加50g体重，需要消耗植物________________g。10．（14分）某哺乳动物的基因型为AABbEe，下图1～4是其体内某一个细胞增殖过程中的部分分裂图像，图5、图6为描述该动物体内细胞增殖过程中相关数量变化的柱形图,图7为该过程中细胞内染色体数目的变化曲线。请回答相关问题：（假设该动物体细胞染色体数目为2n）（1）图1～4细胞分裂的先后顺序是____________，图1细胞的名称是____________，由图1和图4所标注基因可推知，在该细胞增殖过程中发生的变异类型是____________。（2）若图5中的b代表核DNA含量，则c最可能代表____________含量。图1～4中，与图5表示数量变化相符的是____________。（3）该动物体内的细胞在增殖过程中，当发生着丝点分裂后，细胞将处于图6中的____________组。（4）图7中CD段，细胞内含有____________个染色体组。图1～4中，与图7中HI段相对应的是____________。11．（14分）大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。（1）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。成分含量蛋白胨1．4g乳糖3．4g蔗糖3．4gK3HPO43．4g显色剂4．3g琼脂13．4g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到144mL根据用途划分，该培养基属于___________（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_________换成__________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成___________。（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是_______________________。（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________。对已使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL水样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释13稀释度。各取4．1mL已稀释13倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为33、36、37，则每升原水样中大肠杆菌数为____________。（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是____________________________________。12．萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

根据题干信息和图形分析，图示两种蛋白质都是由氨基酸组成的，甲含有9个氨基酸（4种）、2条肽链、1个二硫键，乙含有8个氨基酸（3种）、2条肽链、2个二硫键。【详解】A、根据以上分析已知，即甲含有4种氨基酸，乙含有3种氨基酸，A正确；B、组成不同氨基酸的基本元素都是C、H、O、N，B错误；C、根据以上分析已知，即甲含有9个氨基酸，乙含有8个氨基酸，C正确；D、据图分析可知，甲乙两种蛋白质的氨基酸的排列顺序不同，D正确。故选B。2、B【解析】

1、J型曲线：在食物充足，无限空间，无天敌的理想条件下生物无限增长的情况。2、S型曲线：自然界的资源和空间总是有限的，当种群密度增大时，种内竞争就会加剧，以该种群为食的动物的数量也会增加，这就使种群的出生率降低，死亡率增高，有时会稳定在一定的水平，形成“S”型增长曲线。【详解】A、图1、2为种群在自然环境条件下的增长规律，图1中的曲线Ⅱ为“S”型曲线，种群存活率越高种群的增长越快，图3所示曲线种群数量达到K/2时增长最快，达到K时增长最慢，符合曲线II条件下种群的存活率，A正确；B、图1的e点、图2的g点和图3的i点时种群数量增长最快，但种群密度不是最大，不能获得最大日捕捞量，B错误；C、实验条件下培养酵母菌，早期种群数量增长呈J型曲线增长，而酿酒时，要使酒精大量积累则种群数量应较长时间保持K值，C正确；D、种群密度越大，个体间因食物和空间等资源的斗争越激烈，图3曲线的K点种群密度最大，达到最大种群数量，D正确。故选B。3、C【解析】测定动作电位应该把电位计的两电极分别放在细胞膜内侧和外侧，观察有无电势差，若表现为外负内正即是动作电位，A项错误；神经细胞膜主要对钾离子有通透性，造成钾离子外流，使膜外阳离子浓度高于膜内，这是静息电位形成的原因，适当增加溶液的KCl浓度，使细胞膜内外K+浓度差变小，造成钾离子外流的数量减少，使得静息电位的绝对值变小，B项错误；发生动作电位时，细胞膜对钠离子的通透性增大，Na+内流，膜电位表现为内正外负，适当增加溶液的NaCl浓度，使得膜内外Na+浓度差增大，Na+内流增多，动作电位的峰值增大，C项正确；兴奋的传导具有“全或无”和“不衰减”的特点，前者指在神经元细胞膜上任意一点施加的阈刺激与任何强度的阈上刺激引起的动作电位水平是相同的，后者指在细胞膜上任意一点产生动作电位，那整个细胞膜都会经历一次完全相同的动作电位，也即神经纤维膜上动作电位的峰值不受刺激强度和传导距离的影响，D项错误。【点睛】解答此题的关键是弄明白“静息电位”和“动作电位”与钠离子和钾离子的跨膜运输的关系，然后结合物质跨膜运输和兴奋传导的知识进行解答。4、C【解析】

根据相邻两个营养级之间能量的传递效率为3%～24%以及表格中的数据，可写出相应的食物网：。【详解】A、表中生产者固定的太阳能总量，表示流经该生态系统的总能量，A错误；B、根据生物富集的特点，有害物质在食物链中随着营养级别的升高含量逐渐升高，若土壤中含有一定浓度的重金属铬，则甲生物比乙生物体内污染物浓度铬含量高，B错误；C、该生态系统中第二营养级同化总量是2.8+3.1=21.1，第三营养级同化总量是1.56，故第二营养级与第三营养级之间的能量传递效率为1.56÷21.1×34%=6．4%，C正确；D、该生态系统内实现了物质循环，碳元素在各种群间循环的主要存在形式是含碳有机物，D错误。故选C。5、B【解析】

多糖有纤维素、淀粉和糖原，纤维素是构成植物细胞壁的主要成分，淀粉是植物细胞的储能物质，糖原是动物细胞的储能物质。核酸包括DNA和RNA，细胞生物既含有DNA又含有RNA。生物膜系统由细胞膜、细胞器膜和核膜构成。【详解】A、糖原是动物细胞内的多糖，植物细胞内的多糖是淀粉和纤维素，A错误；B、硝化细菌为原核生物，细胞中含有DNA和RNA两种核酸，B正确；C、核糖体没有膜，不构成生物膜系统，C错误；D、真菌一般属于分解者，寄生的真菌属于消费者；动物不都是消费者，部分动物属于分解者，如某些原生动物和蚯蚓、白蚁等，D错误。故选B。6、C【解析】

共同进化是指不同物种之间、生物与环境之间在相互影响中不断进化和发展。【详解】A、马利筋通过产生毒素进行自我保护，降低被捕食概率，A正确；B、斑蝶既可以免疫强心苷毒性，使其免受该物质的影响，又可以积累这一物质，降低被捕食的概率，从而增强自身种间竞争力，B正确；C、类似班蝶的蝶类虽不能产生怪味儿，但它们采用拟态作用逃避鸟类捕食，C错误；D、马利筋发展了防御机制，产生强心苷。斑蝶在进化过程中产生了相应的适应性，可以食用马利筋并将强心苷贮存于身体组织中，因此马利筋与斑蝶是长期自然选择协同进化的结果，D正确。故选C。【点睛】解答本题的关键是理解共同进化的概念，根据现代生物进化论的相关内容分析各选项。7、C【解析】

分析题图可知：图中的曲线显示了两种使人体获得免疫力的方法，其中方法1是注射抗体，属于被动免疫；方法b是注射抗原，引发机体产生免疫反应后生成抗体，增强机体的免疫能力。【详解】A、蛋白质类疫苗必须通过注射进入人体，但多糖类疫苗可口服，A错误；B、方法1是在患病时给患者注射抗体以消灭抗原，属于免疫治疗，不会引发人体产生细胞免疫应答，B错误；C、方法2中注射的是抗原，抗原可以是减毒或灭活的微生物，C正确；D、注射天花疫苗属于注射抗原，对应图中的方法2，D错误。故选C。【点睛】解答此题需要掌握免疫学原理的应用，能分析曲线图，明确方法1和方法2的作用及应用。8、A【解析】

血液是流动在人的血管和心脏中的一种红色不透明的粘稠液体，血液由血浆和血细胞组成。多细胞动物绝大多数细胞并不能直接与外部环境接触，他们周围的环境就是动物体内细胞外面的液体，叫做细胞外液，也称为内环境，包括血浆、组织液和淋巴等。细胞通过细胞膜直接与组织液进行物质交换，同时组织液又通过毛细血管壁与血浆进行物质交换。血浆在全身血管中不断流动，再通过胃肠、肾、肺、皮肤等器官与外界进行物质交换。【详解】A、红细胞生活在血浆中，通过红细胞与外界环境进行交换，A正确；B、根据题意分析，促红细胞生成素（ESF）作用的靶细胞是骨髓造血干细胞，说明造血干细胞上有该信号分子的受体，而不是红细胞有其受体蛋白，B错误；C、促红细胞生成素一方面刺激骨髓造血组织，使周围血液中红细胞数增加，另一方面又反馈性的抑制肝脏中的促红细胞生成素原的生成，所以促红细胞生成素抑制肝脏中的促红细胞生成素原的生成这种反馈属于负反馈调节，这种机制保证生物体内物质含量的稳定，不会造成浪费，C错误；D、B细胞成熟的场所在骨髓，在体液免疫中发挥重要的作用，D错误。故选A。二、非选择题9、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ热能营养级高、可利用的能量少营养级Ⅱ的同化量单向流动、逐级递减(h/b)×100%或(h/(a-e))×100%22100【解析】

根据题意和图示分析可知：图1中，Ⅰ表示生产者，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ表示初级消费者、次级消费者、三级消费者，M1、M2分别代表太阳能和呼吸作用散失的能量。图2中，a表示初级消费者的摄入量，b表示同化量，戊表示呼吸作用散失的能量，c表示用于生长、发育和繁殖的能量，e、f表示分解者利用的能量．【详解】（1）次级生产者指异养生物，包括消费者和各种分解者，图1中，营养级Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中的生物种类属于次级生产者。在能量金字塔中，处于第一营养级的生物是生产者，M1表示进入该生态系统的能量光能，M2是指在生态系统食物链各营养级散失的能量（热能）。能量在营养级之间只能单向传递，且逐级递减，营养级高、可利用的能量少，因此位于营养级Ⅳ的生物个体数量往往少于营养级Ⅲ。（2）每一营养级的同化量=摄入量-粪便量，若甲表示图1中营养级Ⅱ所摄入的全部能量，则乙表示Ⅱ同化的能量。由图2推测生态系统能量流动的特点是单向流动、逐级递减。Ⅱ同化的能量为b=a-e，若营养级Ⅲ的同化量为h，则营养级Ⅱ、Ⅲ之间的能量传递效率为（Ⅱ营养级同化量÷Ⅰ营养级同化量）×100%=(h/b)×100%或(h/(a-e))×100%。（3）若生物（X）要增加50g体重，它的食物中有2/5来自营养级Ⅲ，则需消耗植物为50×2/5÷10%÷10%÷10%=20000g，2/5来自营养级Ⅱ，则需消耗植物为50×2/5÷10%÷10%=2000g，1/5来自营养级Ⅰ，则需消耗植物为50×1/5÷10%=100g，需要消耗植物22100g。【点睛】学会分析图形信息，熟悉生态系统的成分及能量的计算是解答本题的关键。10、图2、图3、图1、图4次级卵母细胞基因突变染色单体图3b、c4图1和图4【解析】

分析图1：该细胞不含同源染色体，着丝点位于赤道板上，处于减数第二次分裂中期；分析图2：该细胞中含有同源染色体，且着丝点分裂，处于有丝分裂后期；分析图3：该细胞中同源染色体正在分离，处于减数第一次分裂后期；分析图4：该细胞不含同源染色体，且着丝点分裂，处于减数第二次分裂后期；分析图5：该细胞中染色体：染色单体：DNA=1：2：2，且染色体数目与体细胞相同，处于减数第一次分裂、有丝分裂前期和中期；分析图6：a组细胞中染色体含量是体细胞的一半，是减数分裂形成的配子；b组细胞中的染色体含量与体细胞相同，处于有丝分裂前期和中期、减数第一次分裂、减数第二次分裂后期；c组细胞中染色体含量是体细胞的2倍，处于有丝分裂后期；分析图7：AF段表示有丝分裂；FI表示减数分裂。【详解】（1）原始生殖细胞先通过有丝分裂方式增殖，再通过减数分裂方式形成配子，因此图1～4细胞分裂的先后顺序是图2、图3、图1、图4；根据图3细胞的不均等分裂可知该生物的性别为雌性，图1细胞处于减数第二次分裂中期，再结合图1和图3中染色体颜色可知，其名称是次级卵母细胞；由图1和图4所标注基因可推知，在该细胞增殖过程中发生的变异类型是基因突变。该细胞最终形成的最重要的子细胞基因型为AbE或Abe。（2）若图5中的b代表核DNA含量，则c最可能代表染色单体含量。图5细胞中染色体：染色单体：DNA=1：2：2，且染色体数目与体细胞相同，处于减数第一次分裂、有丝分裂前期和中期，因此图1～4中，与图5表示数量变化相符的是图3。（3）该动物体内的细胞在增殖过程中，当发生着丝粒分裂后，细胞处于减数第二次分裂后期或有丝分裂后期，分别将处于图6中的b、c组。（4）图7中CD段，细胞处于有丝分裂后期，此时细胞内含有4个染色体组，8个核DNA分子。图7中HI段表示减数第二次分裂，因此图1～4中，与图7中HI段相对应的是图1和图4。【点睛】本题结合图解，考查细胞的有丝分裂和减数分裂，要求考生识记细胞有丝分裂和减数分裂不同时期的特点，掌握有丝分裂和减数分裂过程中染色体行为和数目变化规律，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。11、鉴别蛋白胨尿素酚红指示剂平板划线法和稀释涂布平板法将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生灭菌3．6×18黑色当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌【解析】

培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。【详解】（1）该培养基含有显色剂，根据用途划分，该培养基属于鉴别培养基。若要分离能分解尿素的细菌，培养基中需要以尿素作为唯一的氮源，故需要将蛋白胨换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成酚红指示剂，观察是否变红。（3）培养大肠杆菌时，可以选择平板划线法和稀释涂布平板法进行接种。（3）培养大肠杆菌时，在接种前可以将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，来检测培养基是否被污染。对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）每升原水样中大肠杆菌数为（33+36+37）÷3×14×13=3.6×18。（3）由于代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色，故要检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为黑色的菌落进行计数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，故可以通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。【点睛】筛选尿素分解菌的原理：培养基中以尿素作为唯一氮源，只有能利用尿素的微生物才能生长。12、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其