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【创新方案】高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段创新演练大冲关每课一练新人教版选修1(时间:20分钟;满分50分)一、选择题(每小题3分,共21分)1.TaqDNA聚合酶的特点是()A.耐强酸 B.耐强碱C.耐高温 D.最适温度37℃解析:TaqDNA聚合酶是从热泉中一种嗜热细菌中提取到的,此酶具有以下特点:①耐高温,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%;在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%。②在热变性时不会被钝化,不必每次在扩增后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率,增加了扩增长度。答案:C2.用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸,是一小段单链()A.DNA B.RNAC.单链DNA或RNA D.双链DNA解析:体内DNA复制所需引物是一小段RNA,而PCR过程所需引物是一小段DNA或RNA。答案:C3.PCR技术中,如何设计引物()A.PCR引物要根据需要扩增的目标DNA的碱基序列来设计B.PCR引物要根据已知的DNA序列对应的RNA序列来设计C.PCR引物要根据已知的DNA序列对应的tRNA的序列来设计D.以上都不是正确方法解析:DNA复制需要引物,引物是一小段DNA或RNA,能与DNA母链的一段碱基序列互补配对,故引物的设计要根据目标DNA的碱基序列来确定。答案:A[4.右图表示DNA变性和复性示意图,下列相关说法正确的是()A.向右的过程为加热(80℃~100℃)变性的过程B.向左的过程必须在DNA解旋酶的作用下才能完成C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基团、4个3′端解析:DNA体外的变性同体内的解旋,实质是相同的,都是使氢键断裂,DNA双链打开,只是体内需解旋酶,体外是高温条件。图中实际上是一个DNA分子,共含2个游离的磷酸基团和2个3′端。答案:A5.在PCR实验操作中,下列说法不正确的是()A.在微量离心管中添加各种试剂时,只需一个枪头B.离心管的盖子一定要盖严,防止液体外溢C.用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合D.离心的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果解析:在微量离心管中添加各种试剂时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必须更换,以确保实验的准确性。答案:A6.关于PCR技术的应用,错误的一项是()A.古生物学、刑侦破案、DNA序列测定B.诊断遗传疾病、基因克隆、古生物学C.DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案D.诊断遗传疾病、合成核苷酸、DNA序列测定解析:PCR技术能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。这项技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题,被广泛应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆、DNA序列测定等各个方面,但不能用于合成核苷酸。答案:D7.DNA扩增过程中DNA片段经若干次扩增,其数目理论值变化应与下图中曲线相符的是()解析:DNA在扩增过程中呈指数式增长,即一个DNA分子连续扩增n次,理论上所产生的DNA分子数为2n个。答案:C二、非选择题(共29分)8.(12分)多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。(1)DNA的两条链是反向平行的,通常将________的末端称为5′端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的________开始延伸DNA链。(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到_________________,它的发现和应用解决了上述问题;要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫________________________。(3)PCR的每次循环可以分为__________________________________________________三步。假设在PCR反应中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有___________________________________________________________________个这样的DNA片段。解析:(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′-羟基上,与DNA母链结合的引物就提供这个羟基。(2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制两条链均作为模板,进行半保留式复制,所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25=32个。答案:(1)磷酸基团3′端(2)耐高温的TaqDNA聚合酶选择培养基(3)变性、复性和延伸329.(17分)结合右图回答下列问题:(1)PCR是一种DNA体外扩增技术。1988年,PCR仪问世,并被广泛应用于基因扩增和DNA序列测定。下图是PCR技术示意图,请回答:①引物是此过程中必须加入的物质,从化学本质上说,引物是一小段________________________。②将温度加热到________________,使双链DNA变性,从而导致________________________。③引物延伸需提供________________________作为原料。(2)现代科学研究发现,通过比较不同生物的DNA序列,可以确定不同生物间的亲缘关系。下图为编码甲、乙、丙三种生物血红蛋白的部分相对应的基因片段、DNA单链及DNA单链中的碱基序列。①如果让c′链和b′链分别与a链混合,能配对的碱基间则形成氢键,相同的碱基间则形成环状结构。试填写下表:环的数目配对的碱基对数目b′链与a链混合 c′链与a链混合 分析表中数据可推测:与甲的亲缘关系最近的生物是________________________;引起三种生物碱基序列差异的根本原因是______________________________________。②上述研究为生物进化提供了_____________________________________________(方面)的证据,从______________________的本质上,揭示了生物进化的原因。解析:DNA复制时,DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3'端延伸DNA链,因此需要一小段单链DNA或RNA做引物,DNA聚合酶从引物的3′端开始延伸DNA链;导致DNA变性解开双链的温度是80~100℃;延伸实际就是DNA合成的过程,因此需要四
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