TCSBM 0050.2-2024 创面修复材料有效性评价 第2部分：水不溶性材料体外浸提液评价方法

ICS11.040.30CCSC30

T/CSBM团 体 标 准T/CSBM0050.2—2024创面修复材料有效性评价2EffectivenessevaluationofwoundrepairmaterialsPart2:Invitroextractsevaluationmethodforwaterinsolublematerials2024-05-14发布 2024-10-01实施中国生物材料学会 发布T/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANIII目 次前言 II引言 III范围 1规范性用文件 1术语和义 1浸提液备 1细胞增试验 1细胞迁试验 3参考文献 5前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准工作导则 第部分：标准化件的结和起草规》的规起草。本文件是T/CSBM0050—2024《创面修复材料有效性评价》的第2部分。包括以下部分：——第1部分：水溶性材料体外评价方法；——第2部分：水不溶性材料体外浸提液评价方法；——第3部分：刺激因子屏蔽评价方法；——第4部分：体外微血管形成试验评价方法；——第5部分：体外细胞粘附和增殖直接接触评价法；——第6部分：动物食管创面模型促修复愈合评价方法；——第7部分：动物胃创面模型促修复愈合评价方法；——第8部分：动物肠道创面模型促修复愈合评价方法；——第9部分：动物皮肤创面模型促修复愈合质量评价方法。本文件由中国生物材料学会团体标准化技术委员会归口。本文件起草单位：杭州英健生物科技有限公司、中国食品药品检定研究院、四川大学。引 言T/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—202411创面修复材料有效性评价第2部分：水不溶性材料体外浸提液评价方法范围本文件规定了水不溶性创面修复材料体外评价的浸提液制备、细胞增殖试验和细胞迁移试验。GB/T16886.12—2023 医疗械生物评价 第部分：样制备与照样品T/CSBM0050.1 创修复材有效性价 第部：水溶性料体外价方法术语和定义T/CSBM0050.1界定的术语和定义适用于本文件。浸提液制备在无菌状态下，按照以下条件制备浸提液：a) 浸提温度：37℃±1浸提时间：24h±2h48h±2h72h±2h；浸提条件：120r/minGB/T16886.12—20231原理器具试验器具如下：T/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—202422酶标仪；电子天平；液氮罐；96试剂和耗材试验试剂和耗材如下：10％DMEM（10％FBSDMEM）；CCK-8细胞系样品制备试验样品将浸提液使用无血清培养基稀释成100％、75％、50％、25％、12.5％的浓度。阳性对照含10％FBSDMEM37120r/min24。空白对照，37120r/min24h。试验方法1×105个/mL96100L，624h124h48h和72hCCK-83hT/CSBM0050.2T/CSBM0050.2—2024PAGEPAGE3450nm的吸光度值，按照式（1）计算细胞增殖率，评估试验样品溶液不同浓度对细胞的增殖作用，并筛选出最佳增殖浓度。表1 细胞增殖验试验分组培养条件检测模型观察时间检验方法阳性对照组含10％FBSDMEM低糖培养基细胞系24h、48h、72hCCK-8法空白对照组无血清培养基试验组样品无血清培养基溶液1𝑃=𝐴450𝑛𝑚×100％·································································(1)1𝐵450𝑛𝑚式中：P1——细胞增殖率，％；A450nm——阳性对照组不同浓度样品组平均吸光度；B450nm——空白对照组平均吸光度。结果分析/（p0.0（p＞0.05）6 原理器具试验器具如下：酶标仪；电子天平；液氮罐；24T75ImageJ试剂和耗材试验试剂和耗材如下：10％DMEM（10％FBSDMEM）；细胞系同5.2.3。样品制备同5.3。试验方法按照表21×105个/mL241个复孔，24h1mL10×012h、hImageJ（2）表2 细胞迁移验试验分组培养条件检测模型观察时间检验方法阳性对照组含10％FBSDMEM低糖培养基细胞系0h、12h、24h显微镜观察拍摄图片空白对照组无血清培养基试验组样品无血清培养基溶液2𝑃=𝑆0−𝑆12/𝑆24×100％·······························································(2)2𝑆0式中：P2——细胞迁移率，％；S0012hS2424h结果分析/（p0.0（p＞0.05）参 考 文 献究[J].,2022,41(04):405-412.HangZ,MuyeH,MinyiY,etal.InVitroandVivoInvestigationonth