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ICS65.020.30CCSB44ICS65.020.30CCSB44山 东 省 地 方 标 准DB37/T4724—2024驴驹大肠杆菌病防治技术规程Codeofpracticeforthepreventionandtreatmentofcolibacillosisindonkeyfoals2024-06-28发布 2024-07-28实施山东省场监理局 发布DB37/T4724DB37/T4724—2024II前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。DB37/T4724DB37/T4724—2024PAGEPAGE5驴驹大肠杆菌病防治技术规程范围本文件适用于养驴场驴驹大肠杆菌病的防治。(GB19489实验室生物安全通用要求GB39707医疗废物处理处置污染控制标准NY/T388畜禽场环境质量标准NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY5027无公害食品畜禽饮用水水质NY/T5030无公害农产品兽药使用准则下列术语和定义适用于本文件。3.1驴驹肠菌病 donkeyfoalscolibacillosis由O78、O101、O8等主要血清型的致病性大肠杆菌引起驴驹的急性、接触性传染病。注:病例特征呈现剧烈的下痢和败血症症状。病原为肠杆菌科大肠埃希氏菌属中O78、O101、O8等主要血清型的致病性大肠杆菌。病原菌为革兰氏阴性菌,在驴驹肠道及其粪便污染的环境中广泛存在。传染源发病驴驹和携带致病性大肠杆菌的驴。该病通过消化道传播,粪-口传播是主要途径。病原菌污染粪便、圈舍、饲料、水槽及饮水等均可传播。可通过脐带或分娩时经产道传播。82d~31d~2胃黏膜脱落,有出血点和出血斑。小肠、盲肠和结肠表现为黏膜脱落。肝脏肿大、淤血。脾肿大,包膜下有出血点。心内膜和外膜也有出血点,肠系膜淋巴结肿大、出血。诊断见附录A。采样按NY/T541的规定执行,主要采集肛拭子、腹泻物等病料。243~4次。将单菌落革兰氏染色,镜检,油镜下呈现两端钝圆,单在或成对的革兰氏阴性菌。V-P24,V-POLB240.52h,制备O抗原。取洁净玻片,吸取O抗原滴于玻片两端,一滴加入10μL抗30°于1minA.1进行16SrDNADNA16SrDNAAPCR(ng/μL~50ng/μL)2μL,2×TaqPCRMasterMix12.5μL(20μmol/L)1μL,ddH2O8.5μL,共25μL反应体系。PCR反应程序为955min;9515s,53s,72min,共30725min,411500PCR将PCRNCBIBLAST按照GB19489规定执行。预防按NY/T388和NY5027的规定执行。夏季食槽和水槽应及时清理。生产区内不得饲养其他动物,不应屠宰和解剖病死驴,不带入其他畜产品。料库应有防鼠防鸟设施。管理驴驹3d~5治疗原则NY/T5030方法采用对因治疗和对症治疗。推荐药物见附录B。10.1定。10.2
病死驴及病害驴的处理见《病死及病害动物无害化处理技术规范》(农医发[2017]25号)的规废弃物与病料处理按照GB39707规定执行。记录存档各种记录保存期限不低于两年,分类归档。附录A(规范性)主要实验室诊断方法原理,PH显G+Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。PCR(PCR)是80DNADNADNA2nDNADNADNALBTAEDNAPCRMixddH2O(10μL、200μL、1000μL)2mLEPPCR:14800RCF:21100xg:-9℃~+4028℃~+70:2~820~-4040℃~-86PCR~60243~4V-P3724hLB240.52h,制备O抗原。取洁净玻片,吸取O抗原滴于玻片两端,一滴加入10μL抗血清,一滴加入等量生理盐水。轻轻晃动玻片,倾斜玻片30°于1min和表A.1LB3720h,DNA为1SrNRNA20gL~0ngμL2μL×TqPRMateMix1.5L7(5-AGGTTGATMTGCCAG-3149('-TCGGTACCTGTTCGATT-')各18.525μLPCRPCR95℃预变性5min;9515s,5315s,722min,共3072min,41%PCR将PCR测序结果使用NCBI中的BLAST进行检索。表A.1O血清型鉴定判定标准反应强度判断依据对应结果++++液体完全透明,出现大的凝集块阳性+++液体几乎完全透明,有明显凝集块阳性++液体不甚透明,有可见凝集块阳性+液体浑浊,有小的颗粒状物阴性—液体浑浊,无凝集现象阴性DB37/T4724DB37/T4724—2024PAGEPAGE1附录B()根据药敏试验结果选择合适药物。消化道给药:口服或灌肠庆大霉素,磺胺
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