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专题20发酵工程专题过关检测(一)一、选择题(每小题只有一个选项符合题目要求)1.“麦曲酶长,酵米复芳;白梅酒娘,伴淋寒香;压滤琼浆,煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。下列相关叙述错误的是()A.“酒娘”中含有酵母菌等发酵所需菌种B.煎煮可除去发酵产品中的菌种,利于储存C.酿酒的整个过程必须保持无氧环境D.酿酒和制作果醋所用的发酵菌种是不相同的答案C2.某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验,实验流程如图所示(清水淋洗时菌T不会流失)。下列分析错误的是()A.在粉碎的秸秆中接种菌T是为了将秸秆中的纤维素大量分解B.淋洗液主要为酵母菌的生长繁殖提供碳源、能源等C.采用湿热灭菌法对培养基进行灭菌时需控制压力为100kPa,温度为100℃D.与以粮食为原料发酵生产乙醇相比,图中方式能节约粮食和提高能量利用率答案C3.味精是以粮食等为原料经发酵制成的一种调味料,发酵中所用的谷氨酸棒状杆菌菌种(需氧型细菌)大都从自然界筛选获得,如图是以小麦为原料生产味精的工艺流程图。下列分析正确的是()A.发酵前将菌种接种到摇瓶培养是为了进一步选育和纯化菌种B.发酵前调整好温度、pH等条件,发酵过程中需关闭发酵罐通气阀门,同时需不断搅拌C.通过基因工程育种可以对谷氨酸棒状杆菌进行定向改造,以获取性状优良的菌种D.发酵结束后,可采用过滤、沉淀和纯化等方法获取单一菌体,并将菌体破碎后提取单细胞蛋白答案C4.青霉素发酵是高耗氧过程。在青霉素的发酵生产过程中总有头孢霉素产生。人们通过对青霉菌代谢途径的研究发现,在青霉素与头孢霉素的合成过程中,它们有一个共同的前体,这个前体经过两种不同酶的作用分别合成两种产物。下列相关叙述错误的是()A.工业化生产之前需要进行青霉菌纯培养,筛选青霉素分泌量高的优良菌种B.进行主发酵前一次性加足所需的营养成分以利于工业化生产C.通过敲除其中一种酶的基因,从而使青霉菌只产生题中所述的一种产物D.将血红蛋白基因导入青霉菌是一种保证发酵过程中高效供氧的思路答案B选择题(每小题有一个或多个选项符合题目要求)5.大曲白酒浓香纯正,是以豌豆、大麦、小麦等为原料,用富含多菌种的大曲糖化后酿造而成的。图示为大曲白酒传统酿造工艺流程。下列说法正确的是()A.糖化主要是利用大曲中的多种微生物将淀粉水解为葡萄糖B.密坛发酵温度控制在18~30℃,每隔约12h需将坛盖打开进行排气C.若酿造过程中酒变酸,可能是醋酸菌大量繁殖所致D.高温蒸粮并摊晾的原料立即密封发酵可提高酒精产量答案AC三、非选择题6.孔雀石绿(简称MG)是广泛使用的有机染料,在自然环境中极难降解,容易引起土壤污染,进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低,含过量MG的固体培养基不透明。(1)培养基的配制:MG降解菌富集培养基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等,再加作为唯一碳源。配制好的培养基,需用 法进行灭菌。

(2)MG高效降解菌株的分离和纯化:图中所示的分离纯化细菌的方法是 ,用该方法统计样品的菌落数目比活菌的实际数目(“少”或“多”),原因是。将1mL样品稀释1000倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液;经正确操作培养后,3个平板上的菌落数分别为150、158和160,据此可得出每升样品中的活菌数至少为个。

(3)黑曲霉是一种丝状真菌,黑曲霉的PDA液体产酶培养基组成为:麸皮、豆粉饼、(NH4)2SO4、MgSO4·7H2O、KH2PO4,培养时需要通气振荡。豆粉饼可提供黑曲霉生长所需的;若要分离黑曲霉菌落,上述培养基中还需要添加,在培养基灭菌前需将培养基调至(填“酸性”“中性”或“碱性”)。

(4)计数黑曲霉菌液孢子浓度的方法为:用多层纱布过滤黑曲霉培养液得到孢子悬浮液,取1mL悬浮液用无菌水逐级稀释104倍,再取稀释液滴加至血细胞计数板(规格为1mm×1mm×0.1mm,由400个小格组成)进行计数,统计得到计数的小格中平均孢子数2个,则黑曲霉培养液中孢子浓度为个·mL-1。

(5)以大豆为主要原料,利用黑曲霉产生的蛋白酶可将原料中的蛋白质水解成 ,然后经淋洗、调制可得到酱油。

答案(1)孔雀石绿(MG)高压蒸汽灭菌(或湿热灭菌)(2)稀释涂布平板法少当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落1.56×109(3)碳源和氮源琼脂酸性(4)8×1010(5)小分子肽和氨基酸

专题过关检测(二)一、选择题(每小题只有一个选项符合题目要求)1.下列有关传统发酵技术和发酵工程的叙述,错误的是()A.传统发酵技术通常未严格灭菌,发酵工程则需严格灭菌B.传统发酵技术常用混合菌种,发酵工程菌种则较为单一C.传统发酵技术多为厌氧发酵,发酵工程则多为需氧发酵D.传统发酵技术的培养基为天然取材,发酵工程常根据需要添加化学试剂答案C2.某研究小组用马铃薯琼脂培养基对新酿米酒中的酵母菌进行初步分离,结果如图,下列叙述正确的是()A.图a中每一次划线总是从上一次划线的首端开始的B.配制马铃薯琼脂培养基时,需要调节到中性C.浸泡在酒精中消毒的涂布器使用前需要在火焰上灼烧D.图a、图b的方法都可以实现对酵母菌的分离和计数答案C3.图1为谷氨酸发酵装置示意图,所用培养基中有豆饼水解液、玉米浆等,图2为谷氨酸产生机理图。下列有关谷氨酸发酵的叙述,错误的是()A.4为充气口,发酵过程需不断通入无菌空气,说明谷氨酸发酵的菌体为异养需氧型微生物B.培养基中包含多种天然物质,化学成分不确定C.谷氨酸的发酵生产中,在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸D.提高产物量的关键是抑制菌体膜的通透性答案D4.我国科学家利用如图所示的液态厌氧发酵工艺,实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌蛋白。下列叙述错误的是()A.乙醇梭菌可利用CO2、CO和H2合成菌体蛋白B.乙醇梭菌是自养厌氧型细菌,其厌氧发酵的过程需要进行搅拌C.通过该工艺高效生产清洁能源乙醇,可降低生态足迹D.乙醇梭菌单细胞蛋白是通过发酵工程而生产的微生物菌体答案A5.新型绿色高分子材料聚乳酸(PLA)是以植物发酵产物乳酸为主要原料的聚合物,在自然条件下能被生物缓慢降解。某科研机构拟从黄粉虫肠道中筛选PLA降解菌(需氧细菌),按照如图所示流程进行培养鉴定。下列叙述错误的是()A.获得乳酸主要利用乳酸菌进行无氧发酵,要保持发酵罐内严格无氧B.物质X是PLA,为降解菌提供碳源并且对肠道中的其他微生物起一定选择作用C.图中选择培养过程需同时将接种和未接种的平板在无氧环境中倒置培养D.工业化发酵之前需要对菌种扩大培养、配制培养基并灭菌答案C6.为探究某物种的等位基因“CST1”与“cst1E81K”的功能,科研人员将表达CST1和cst1E81K的质粒分别导入无法吸收葡萄糖的酵母菌(以麦芽糖为碳源),经处理后再将其接种在含不同碳源的培养基上,结果如图所示,下列叙述错误的是()A.上述实验运用了稀释涂布平板法接种B.在含葡萄糖类似物的培养基上,导入CST1的酵母菌存活率最低C.据图推测,cst1E81K的功能可能是转运葡萄糖进入细胞D.导入CST1的酵母菌葡萄糖吸收速率大于导入cst1E81K的酵母菌答案C二、非选择题7.营养缺陷型菌株是指野生型菌株经过人工诱变或自然突变失去合成某种营养的能力,只有在基础培养基中补充所缺乏的营养因子后才能生长的菌株,包括氨基酸缺陷型菌株、维生素缺陷型菌株和碱基缺陷型菌株等。筛选营养缺陷型菌株的常规步骤:诱变育种→淘汰野生型→检出缺陷型→鉴定缺陷型。(1)用紫外线诱变大肠杆菌,诱变后常采用选择培养基淘汰野生型大肠杆菌,使营养缺陷型大肠杆菌得以富集。培养大肠杆菌时,需将培养基调至性,再在压力和温度分别为的条件下进行高压蒸汽灭菌。

(2)夹层平板培养法可用于营养缺陷型菌株的检出,其原理如图1所示,先在培养皿上倒一薄层基础培养基,凝固后再接种一层诱变处理的菌液,其上再浇一层基础培养基,凝固后放入中培养出菌落,再倒一层完全培养基继续培养。若结果如图2所示,其中菌落(填“A”或“B”)即检出的营养缺陷型大肠杆菌菌株。

(3)研究小组一利用生长图谱法初步确定检出的营养缺陷型大肠杆菌的类型,即在基础培养基的A~E这5个区域中分别添加不同的营养物质,然后用法将检出的营养缺陷型大肠杆菌接种在图3培养基上,若培养一段时间后在图3的B、C交界处长出了菌落,则说明该菌株是。

a.氨基酸营养缺陷型菌株b.维生素营养缺陷型菌株c.碱基营养缺陷型菌株(4)研究小组二用(3)中所述方法鉴定了某菌株属于维生素营养缺陷型,为了进一步确定该菌株的具体类型,他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组,用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素,然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。组别维生素组合1维生素A维生素B1维生素B2维生素B6维生素B122维生素C维生素B1维生素D2维生素E烟酰胺3叶酸维生素B2维生素D2胆碱

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