病原微生物样本采集保存运输张凡非课件

1病原微生物样本

采集保存包装运输山西省疾病预防控制中心张凡非2实验室的作用3实验室的作用传染病的诊断需要综合实验室检验结果。传染病的诊断应包括流行病资料、临床病史、体格检查以及实验室检验结果等。病原体的检出是确诊传染病的主要依据。应尽一切可能别离到病原体，特别是细菌、真菌等。病毒感染因病原不易被检出，培养需较长时间，一般实验室难以开展病毒别离工作，因此在大多数情况下依赖免疫学试验而确立诊断。此外，还有分子生物学检测、影像检查、活体组织检查等。4实验室的作用5样本的重要性

科学合理地采集、保存、包装和运输样本，直接影响检验结果的准确性和可靠性。6样本采集决策样本采集的质量是获得准确可靠的实验检测结果的重要因素。样本采集的质量主要取决于样品采集的决策。7样本采集决策对样本采集决策者的要求1.有广博的知识，最好是懂临床、流行病、实验室2.对采样质量能够进行正确评价3.对实验室进行评估4.微生物标本的特殊性8样本采集决策采集什么样本，样本送检的目的是什么？在什么时间什么条件下采集？如何采集〔方法和器材〕？如何保存与运送？在临床诊断和流行病学分析的根底上检验工程明确，不能包罗万象。9样本采集要求采样人采样时间样本采集器材样本标识送检单保存运输条件防护用品10样本采集要求11采样时间：一般在疑心细菌感染时应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本，进行细菌的别离培养，否那么这种标本在别离培养时要加药物拮抗剂。样本采集要求12采样时间：作病毒别离和病毒抗原检测的标本，应在发病初期和急性期采样，因为此时病毒在体内大量繁殖，检出率高，病毒分类标本最好在发病1～3天内采取。样本采集要求13抗体检测样本采样时间：①血清：用于检测IgM的血清一般采于发病1个月内；用于检测IgG的血液应收集两次，第一次于发病初期〔1～3天〕，越早越好，第二次血样一般在恢复期〔第一次采血后3～4周〕。双份血清同时检测，如抗体滴度有4倍以上升高才有意义。②脑脊液：一般于出现神经病症时采集，查IgM只需一份脑脊液，而查IgG那么需收集两次，时间间隔同前所述。样本采集要求14样本采集要求样本采集器材：样本容器、记号笔、送检单、酒精灯、剪刀、酒精棉等采集标本应使用无菌容器，一个标本一个容器。对容器根本要求是选耐用材料制成，容器包装好后可防渗漏。能承受空中地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。15样本采集要求16样本采集要求17样本采集要求保存运输条件用于别离细菌的标本，应选择适宜的培养基和推荐保存温度，这取决于运送时间的长短及不同病原微生物对枯燥、温度、营养、pH值的耐受能力。用于别离培养细菌的标本应在运送培养基中运送并保存于适宜的温度。能确保目标细菌的存活并抑制其他微生物的过度生长。18样本采集要求保存运输条件用于别离细菌的标本，一般保存在4℃～8℃，但一些对低温敏感的细菌除外，如志贺氏菌、脑膜炎双球菌、肺炎球菌。总之应尽快别离。19样本采集要求保存运输条件用于别离病毒的标本，一般应放在保温容器〔0˚C～4˚C〕里，最好放置不超过2天，如不能立即别离病毒时，最好在－70˚C或-70℃以下冻存。不应保存在-20℃。标本分装保存，尽量防止反复冻融。如疑心是寄生虫，所取粪便中参加10%福尔马林和PVA防腐剂〔充分混合〕。20样本采集要求保存运输条件用于检测抗原或抗体的标本，可在4˚C～8˚C保存24～48h，在－20˚C保存时间更长。检测抗体的血清，可在4˚C保存约一个星期，最长10天；超过一周必须在-20˚C下冷冻。21样本采集要求防护用品采样中防止标本污染和人员感染和都是至关重要的，应采用防护措施，注意平安操作。采样应戴手套；根据生物危害程度，穿工作衣/防护服、使用口罩/N95口罩、护目镜。使用过的防护用品装入废弃物专用袋内。22粪便的采集方法

一份约450g的冷冻粪便样本送至实验室。样本量是否满足检验需求？适宜吗？实验室如何保存处理该样本？该怎么办？23粪便的采集方法

自然排出粪便取样：选择有粘液、脓血部位。成形5g，稀便3~5ml。放入密封无菌容器送检。肠拭子：应用专用器材，如能立即接种时可用棉拭子插入肛门3~5cm，轻轻转动拭子，取出粪便。不能立即接种时，要放入保存液内送检。24尿液的采集方法

留中段尿法：先消毒外阴，再消毒尿道口，然后用生理盐水再冲洗，以免尿内混入消毒液，用无菌容器取中段尿10~20ml，根据送检的工程处理，可离心后取沉淀物培养，也可以不离心直接计数无菌导尿25血液培养标本的采集方法

无菌操作采集静脉血液，将血液直接注入培养瓶内，最好是用细菌培养液，有不同的培养瓶可供选择，如厌氧、微需氧、需氧等。如无密封培养瓶，可选用无菌三角烧瓶，严格无菌操作，以免污染无菌带有抗凝剂的小瓶，最好带罗帽，每项量最少5ml，根据培养工程确定采集量。26脑脊液标本的采集方法由有经验医生在无菌条件下腰锥穿剌，最好是床边接种采样量3~5ml，也可取离心沉淀物培养27咽拭子标本的采集方法根据不同病种，采集相应部位的分泌物。猩红热病人，采集咽部红肿、化脓性分泌物。白喉病人：在扁桃体两侧取伪膜，采集伪膜往往需用无菌镊子夹取。流脑病人：在鼻咽腔流感/人禽流感：双侧扁桃体及咽后壁。麻疹：鼻咽部和咽喉部

28皮肤创伤标本的采集方法多见于炭疽、结核病，腺鼠疫〔淋巴结破损〕。方法：先用盐水拭子擦外表，如没破，可用无菌注射器抽取液体。如破溃，擦洗后，可取深部脓血液。注意：采集后同时涂片染色镜检。29样本的包装与运输30依据31分类?人间传染的病原微生物名录?中规定的第一类、第二类病原微生物菌〔毒〕种或样本。?人间传染的病原微生物名录?中第三类病原微生物运输包装分类为A类的病原微生物菌〔毒〕种或样本。疑似高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本。32批准运输第三条规定的菌〔毒〕种或样本〔以下统称高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本〕，应当经省级以上卫生行政部门批准。未经批准，不得运输。33申请单位从事疾病预防控制、医疗、教学、科研、菌〔毒〕种保藏以及生物制品生产的单位，因工作需要，可以申请运输高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本。34运输申请申请单位在运输前应当向省级卫生行政部门提出申请，并提交以下申请材料〔原件一份，复印件三份〕：35申请材料可感染人类的高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本运输申请表；法人资格证明材料〔复印件〕；接收高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本的单位(以下简称接收单位)同意接收的证明文件；<规定>第七条第〔二〕、〔三〕项所要求的证明文件〔复印件〕；容器或包装材料的批准文号、合格证书〔复印件〕或者高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本运输容器或包装材料承诺书；其它有关资料。36接收单位应具备的条件具有法人资格；具备从事高致病性病原微生物实验活动资格的实验室；取得有关政府主管部门核发的从事高致病性病原微生物实验活动、菌〔毒〕种或样本保藏、生物制品生产等的批准文件。37屡次运输申请在固定的申请单位和接收单位之间屡次运输相同品种高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本的，可以申请屡次运输。屡次运输的有效期为6个月；期满后需要继续运输的，应当重新提出申请。38申请在省、自治区、直辖市行政区域内运输申请在省、自治区、直辖市行政区域内运输的，由省、自治区、直辖市卫生行政部门审批。省级卫生行政部门应当在5个工作日内做出是否批准的决定；符合法定条件的，颁发?可感染人类的高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本准运证书?;不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。39申请跨省、自治区、直辖市运输申请跨省、自治区、直辖市运输高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本的，应当将申请材料提交运输出发地省级卫生行政部门进行初审；对符合要求的，省级卫生行政部门应当在3个工作日内出具初审意见，并将初审意见和申报材料上报卫生部审批。40申请跨省、自治区、直辖市运输卫生部应当自收到申报材料后3个工作日内做出是否批准的决定。符合法定条件的，颁发?可感染人类的高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本准运证书?；不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由。41突发事件运输申请对于为控制传染病爆发、流行或者突发公共卫生事件应急处理的运输申请，省级卫生行政部门与卫生部之间可以通过的方式进行上报和审批；需要提交有关材料原件的，应当于事后尽快补齐。42向中国疾病预防控制中心运送申请根据疾病控制工作的需要，应当向中国疾病预防控制中心运送高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本的，向中国疾病预防控制中心直接提出申请，由中国疾病预防控制中心审批；符合法定条件的，颁发?可感染人类的高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本准运证书?；不符合法定条件的，应当出具不予批准的决定并说明理由;中国疾病预防控制中心应当将审批情况于3日内报卫生部备案。43包装要求44专人护送运输高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本，应当有专人护送，护送人员不得少于两人；申请单位应当对护送人员进行相关的生物平安知识培训；在护送过程中采取相应的防护措施。45运输实施陆路运输：有关单位或者个人不得通过公共电〔汽〕车和城市铁路运输病原微生物菌〔毒〕种或者样本〔条例第十二条〕。水路运输民用航空运输：申请单位应当凭省级以上卫生行政部门或中国疾病预防控制中心核发的?可感染人类的高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本准运证书?到民航等相关部门办理手续。承运单位凭批准文件运输！46运输实施47生物平安本卷须知高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本在运输之前的包装以及送达后包装的开启，应当在符合生物平安规定的场所中进行。申请单位在运输前应当仔细检查容器和包装是否符合平安要求，所有容器和包装的标签以及标本登记表是否完整无误，容器放置方向是否正确。48运输后续工作?运输管理规定?第十六条在运输结束后，申请单位应当将运输情况向原批准部门书面报告。49处分对于违反本规定的行为，依照?病原微生物实验室生物平安管理条例?第六十二条、六十七条的有关规定予以处分。50出入境管理高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本的出入境，按照卫生部和国家质检总局?关于加强医用特殊物品出入境管理卫生检疫的通知?进行管理。51第十九条本规定自2006年2月1日起施行。52样品的包装感染性物质53样品的包装指在运输过程中与之接触能对健康人或动物造成永久性残疾或致命疾病的感染性物质。此处“接触〞系指感染性物质离开保护性包装与人或动物的身体接触或经呼吸道吸入的情况。A类感染性物质使人染病或使人和动物都染病者联合国编号为UN2814，其运输专用名称为危害人的感染性物质；仅使动物染病者联合国编号为UN2900，其运输专用名称为仅危害动物的感染性物质。A类感染性物质54样品的包装不符合列入A类标准的感染性物质。其联合国编号为UN3373。运输专用名称为生命物质B类。

B类感染性物质55实验室分级-危害程度分类-感染性物质包装分类实验室分级处理对象危险等级危害程度包装分类BSL-1ABSL-1对人体和环境危害较低，不会引发健康成人疾病Ⅰ级四类A、BBSL-2ABSL-2对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子Ⅱ级三类BSL-3ABSL-3主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有预防治疗措施Ⅲ级二类BSL-4ABSL-4对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明的微生物。尚无预防治疗措施Ⅳ级一类56样品的包装57样品的包装这一包装系统可以应用于所有的感染性物质，由以下三层包装组成：

1.主容器：初级容器防水、防渗漏，内装标本。其外包裹有的吸收材料。

样品必须保存于大小适宜、带胶垫的外螺旋盖的塑料管中，拧紧盖、封好管口〔如用封口膜或防水的塑料胶带袋〕管外要用油性笔注明标本的编号、种类、姓名及采样日期、采集量。58样品的包装2.次级包装：次级包装为第二层持久的、防水、防渗漏的包装，它封闭和保护初级容器。多个包有缓冲材料的初级容器可放于同一个次级包装中，但是，这要求同时也放入足够的吸收材料以确保一旦发生泄漏后所有液体都可被吸收。标本有关信息填写“×××送检单〞，用一塑料袋密封，并粘在塑料容器外面。59样品的包装3.外层包装：次级包装包裹有适宜的缓冲材料后，即可被装入外层运输包装。外层运输包装保护其内容物免受外界影响，如运输过程中的物理损坏。样品的容器要使用能够承受不少于95Kpa压力的高质量的防水包装材料并且密封，以防止运输发生内容物的外泄。60样品的包装感染性物质外包装件上必须做出如下的使用标记：1〕托运人名称地址和收货人名称地址。2〕运输专用名称：A类感染性物质为：感染性物质；B类感染性物质为：生命物质。3〕联合国编号〔UN编号〕4〕运送A、B类感染性物质的净含量：A类感染性物质要标出；B类感染性物质可以不标出。5〕标记负责人姓名和联系。6〕如使用干冰作制冷剂，应标出DryIce(干冰)、UN1845以及干冰的净重。7〕生物危险标识。61样品的包装冷冻剂的使用:

1)在使用冰、干冰或其他冷冻剂进行冷藏运输时，冷冻剂必须放在辅助容器和外包装之间，内部要有支撑物固定，当冰或干冰消耗以后，仍可以把辅助容器固定在原位置上。如使用冰，外包装必须不透水。如果使用干冰，外包装必须能够排放二氧化碳气体，防止压力增加造成容器破裂。在使用冷冻剂的温度下，主容器和辅助容器必须能保持良好性能，在冷冻剂消耗完以后，仍能承受运输中的温度和压力。62样品的包装冷冻剂的使用:

2)当使用液氮对样品进行冷藏时，必须保证主容器和辅助容器能适应极低的温度。此外，还必须符合其他有关液氮的运输要求。

3)主容器和辅助容器须在使用制冷剂的温度下，以及在失去制冷后可能出现的温度和压力下保持完好无损。主容器和辅助容器必须在无泄漏的情况下能够承受95kPa的内压，并能保证在－40℃到＋55℃的温度范围内不被损坏。A类感染性物质的包装与标签63B类感染性物质的包装与标签64A类、B类感染性物质运送外包装的区别主容器外包装放置方向标识高致病性病原微生物危险标签高致病性病原微生物运输登记表79收样单位：

详细地址：邮政编码：

联系人：

联系电话：