GBT 39993-2021 化妆品中限用防腐剂二甲基噁唑烷、7-乙基双环噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的测定(正式版)

化妆品中限用防腐剂二甲基噁唑烷、国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会GB/T39993—2021本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。本标准起草单位：苏州世谱检测技术有限公司、苏州质量检测科学研究院、江苏隆力奇生物科技股州质量监督检测研究院、上海市日用化学工业研究所、欧诗漫生物股份有限公司、上海相宜本草化妆品股份有限公司、汕头市莲娜姬护肤品有限公司、嘉文丽(福建)化妆品有限公司、无限极(中国)有限公司、广州市娇兰化妆品有限公司、强生(中国)有限公司、江苏省产品质量监督检验研究院、江苏省食品药品监督检验研究院、昆山市药品监督管理所、江苏省药品监督管理局苏州检查分局、河北省食品检验研究卢剑。I1GB/T39993—2021化妆品中限用防腐剂二甲基噁唑烷、警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件。1范围本标准规定了化妆品中二甲基噁唑烷、7-乙基双环噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的气相色谱-许差等内容。本标准适用于水剂类、水包油类和油包水类化妆品中二甲基噁唑烷、7-乙基双环噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的测定。其中，第一法适用于水剂类、水包油类和油包水类化妆品中7-乙基双环噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的测定，以及油包水膏霜类化妆品中二甲基噁唑烷的测定；第二法适用于水剂类、水包油类和油包水类化妆品中二甲基噁唑烷的测定。本标准的方法检出限和定量限：第一法的方法检出限均为15.0mg/kg,定量限均为50.0mg/kg;第二法的方法检出限为15.0mg/kg,定量限为50.0mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3第一法气相色谱-质谱联用法3.1原理试样中的待测物经四氢呋喃提取，用气相色谱-质谱联用仪测定；采用选择离子监测(SIM)模式扫3.2试剂或材料3.2.3无水硫酸钠：分析纯，于650℃灼烧4h,储存于密闭干燥器中。际化妆品原料名称(INCI名称)、化学文摘登记号(CAS号)、分子式、相对分子质量及化学结构式参见附录A中表A.1,纯度均不应小于95%。3.2.5混合标准工作溶液：分别准确称取适量标准物质(3.2.4)(精确至0.0001g),用丙酮(3.2.2)配制成质量浓度为1000mg/L的单标标准贮备液(于4℃避光保存，宜保存3个月)。取相应的空白样品，2GB/T39993—2021按照3.4.1进行处理，得到基质溶液。准确移取适量各单标标准贮备液，用基质溶液逐级度为2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L的系列混合标准工作溶液3.3仪器设备3.3.4涡旋振荡器：最高转速不低于3000r/min。3.3.5离心机：最高转速不低于4000r/min。称取试样0.5g(精确至0.001g)于50mL具塞离心管中，准确加入10.0mL四氢呋喃(3.2.1),加3.4.2测定条件a)色谱柱：5%苯基-95%甲基聚硅氧烷石英毛细管色谱柱(30m×250μm×0.25pm),或相b)进样口温度：220℃;d)升温程序：初始温度60℃,保持6min,以10℃/min升温至200℃,再以15℃/min升温至280℃,保持5min;e)进样方式：分流进样，分流比为5:1;j)离子源温度：230℃;l)待测化合物的保留时间、特征选择离子及丰度比见表1。化合物保留时间/min碎片离子(丰度比)7-乙基双环噁唑烷55:83:113#:143(40:50:100:30)5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷85:107:135⁴:137(29二甲基噁唑烷58:70:71#:86(46:38:100:62)“定量离子。3GB/T39993—20213.4.3标准工作曲线绘制3种防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图参见附录B中图B.1。在测定条件(3.4.2)下，试样溶液A和标准工作溶液的特征选择离子色谱峰在相同保留时间处(±0.5%)出现，且试样溶液A的特征离子相对离子丰度与浓度相当的标准工作液的特征离子相对离子丰度的相对偏差不超过表2规定的范围，则可判定试样中存在相关目标化合物。表2定性确证时特征离子相对离子丰度和最大允许偏差k>5050≥k>2020≥k>10k≤10允许的最大偏差/%士10士20本标准采用外标校准曲线法定量测定。以各待测物定量离子色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。以试样中待测化合物的定量离子色谱峰的峰面积与标准曲线比较定量。试样溶液A中待测化合物的响应值均应在标准曲线的线性范围之内，超出线性范围的试样溶液A可适当稀释后进行测定。3.5结果计算试样中待测化合物的含量按式(1)进行计算： (1)式中：w——试样中待测化合物的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);p——试样溶液A(3.4.1)中待测化合物峰面积对应的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L);V——四氢呋喃的体积，单位为毫升(mL);m——试样质量，单位为克(g)。计算结果保留三位有效数字。3.6回收率和精密度在添加浓度为50.0mg/kg～500mg/kg范围内，回收率为80%～110%。相对标准偏差小3.7允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%。4GB/T39993—20214第二法高效液相色谱法试样中的二甲基噁唑烷经50%(体积分数)乙腈溶液提取，提取液经正己烷净化、离心、9-芴甲氧羰4.2试剂和材料4.2.4四硼酸钠(Na₂B₁O₇·10H₂O):优级纯。4.2.59-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl):纯度不小于99%。4.2.99-芴甲氧羰酰氯溶液(10.0g/L):准确称取9-芴甲氧羰酰氯(4.2.5)0.50g,溶于20mL乙腈的标准储备液(于4℃避光保存，宜保存3个月)。准确移取适量的标准储备液，用50%乙腈溶液(4.2.6)逐级稀释成质量浓度为2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L的标准工作溶液(宜现配现用)。4.3.3涡旋振荡器：最高转速不低于30004.4试验步骤4.4.1试样处理旋振荡1min,超声提取10min,冷却至室温，使用50%乙腈溶液(4.2.6)定容至10mL,混匀，取5mL氯溶液(4.2.9),室温反应10min,衍生液经滤膜过滤后得到试样溶液B,供高效液相色谱仪测定。5GB/T39993—20214.4.2测定条件高效液相色谱参考工作条件如下：相当者；d)柱温：30℃;表3高效液相色谱梯度洗脱条件时间/min乙腈/%水/%4.4.3标准工作曲线绘制0.2mL9-芴甲氧羰酰氯溶液(4.2.9),室温反应10min,衍生液经滤膜过滤后按高效液相色谱参考工作条件(4.4.2)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。二甲基噁唑烷标准物质衍生物的液相色谱图参见附录C中图C.1,二甲基噁唑烷标准物质衍生物的光谱图参见图C.2。4.4.4试样测定按高效液相色谱参考工作条件(4.4.2)测定试样溶液B(4.4.1),如果检出的色谱峰的保留时间与标准物质的一致，并且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的光谱图与标准物质的一致，则可初步确定样品为阳性样品，记录色谱峰的峰面积，以外标法定量。试样溶液B中被测物的响应值应在标准工作曲线的线性范围之内。超出线性范围的试样溶液B,应将试样处理中未衍生的下层清液用50%乙腈溶液(4.2.6)适当稀释并重新衍生后进行测定。4.4.5空白试验4.5结果计算试样中待测化合物的含量按式(2)进行计算：…………6GB/T39993—2021式中：w——试样中被测组分的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);p——从标准曲线得到的试样溶液(4.4.1)中被测组分的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L);V——试样溶液定容体积，单位为毫升(mL);结果保留三位有效数字。在添加浓度为50.0mg/kg～500mg/kg范围内，回收率为80%～110%,相对标准偏差小于10%。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%。7GB/T39993—2021(资料性附录)3种限用防腐剂标准物质的信息子质量及化学结构式见表A.1。中文名称英文名称INCI名称分子式相对分子质量化学结构式二甲基噁唑烷4,4-Dimethyl-1,3-oxazolidineDimethyloxazolidine51200-87-4C;H₁NOHN-07-乙基双环噁唑烷5-Ethyl-3,7-dioxa-1-azabicyclo[3.3.0]octane7-Ethylbicyclooxazolidine7747-35-5C,H₂NO₂5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷5-Bromo-5-nitro-1,3-dioxane5-Bromo-5-nitro-1,3-dioxane30007-47-7C₄H₆BrNO₄212.00心二乙心二乙Br08GB/T(资料性附录)3种防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图3种限用防腐剂标准物质的气相色谱-质谱总离子流图见图B.1。328.0×1044.0×10+时间/min说明：1——二甲基噁唑烷；2——7-乙基双环噁唑烷；3——5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷。3种