空气洁净级别检测技术（药品生物检定课件）

空气洁净级别检测技术

医药工业洁净区空气洁净度标准知识点1洁净区空气洁净度分级医药工业洁净区空气洁净度标准1.1空气洁净度空气洁净度：洁净空气中含尘量多少的程度（即含尘浓度）。含尘浓度高则洁净度低，含尘浓度低则洁净度高。1.2空气洁净度标准现在医药和医疗器械行业，特别是洁净厂房的建造质量标准中，一般都采用A、B、C、D分级标准。虽然空气洁净度分级法与洁净厂房控制环境中微生物水平并没有发现直接的联系，但医药行业均使用和这些分级相应的微生物水平作为一种标准来执行。医药工业洁净区空气洁净度标准1.3空气洁净度分级标准洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米静态动态≥0.5μm≥5.0μm≥0.5μm≥5.0μmA级352020352020B级3520293520002900C级3520002900352000029000D级352000029000不作规定不作规定医药工业洁净区空气洁净度标准1.4GMP对非无菌药品生产环境空气洁净度级别的最低要求C级：非终端灭菌口服液体药品的暴露工序；深部组织创伤外用药品、眼用药品的暴露工序；除直肠用药外的暴露工序。D级：最终灭菌口服液体药品的暴露工序；口服固体药品的暴露工序；表皮外用药品暴露工序；直肠用药的暴露工序。医药工业洁净区空气洁净度标准1.5空气洁净度有关概念1.5.1洁净区（室）：需要对尘粒及微生物含量进行控制的房间（区域）。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染的介入、产生和滞留的功能。1.5.2洁净工作台：一种封闭围挡的工作区域，具有能过滤空气或气体的过滤装置。包括垂直层流罩、水平层流罩、垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台和自净器等。医药工业洁净区空气洁净度标准1.5空气洁净度有关概念1.5.3空气洁净度：洁净环境内单位体积空气中尘粒和微生物的量（程度），含尘（微生物）浓度高则洁净度低，含尘（微生物）浓度低则洁净度高。1.5.4悬浮粒子：可悬浮在空气中，尺寸一般在0.001～1000μm之间的固态、液态物质或两者的混合物，包括生物粒子和非生物粒子。医药工业洁净区空气洁净度标准1.5空气洁净度有关概念1.5.5沉降菌：利用自然沉降原理收集到的微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖可看见的菌落。1.5.6静态测试：洁净区（室）净化空调系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净区（室）内没有生产人员的情况下进行测试。医药工业洁净区空气洁净度标准1.5空气洁净度有关概念1.5.7单向流（层流）：沿着平行流线，以一定流速、单一通路、单一方向流动的气体。1.5.8非单向流（乱流）：具有多个通路循环特性或气流方向不平行，不满足单向流定义的气流。医药工业洁净区空气洁净度标准1.6GMP应用的空气洁净系统空气洁净技术是保证药品质量不受污染的一个必要条件。GMP所应用的空气洁净系统是由处理空气的空调净化设备、输送空气的管路系统和用来进行生产的洁净环境（洁净室）三大部分构成。空气经空调净化设备处理后，由送风口向室内送入干净空气，室内滞留的灰尘和微生物被干净空气稀释后，强迫其由回风口进入系统的回风管路，在空调设备的混合段和从室外引入的经过滤处理的新风混合，再经过空调机处理后又送入室内。空气洁净级别检测技术

空气洁净度测试方法技能点2洁净工作台沉降菌测试规程洁净工作台沉降菌测试规程2洁净室（区）沉降菌的测试方法2.1测试依据依据《药品生产质量管理规范（2010年修订）》，附录1无菌药品。2.2测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于含适宜培养基的平皿中，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。2.3测试规则2.3.1测试状态沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。被洁净室（区）已经过消毒。测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。生产企业一般是静态测试。2.3.2测试人员

测试人员必须穿戴符合环境洁净级别的工作服。静态测试时，室内测试人员不得多于2人。空气洁净度测试方法2.3.3测试时间

对单向流洁净室，如A级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。对非单向流洁净室，如B级、C级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。空气洁净度测试方法2.4测试步骤2.4.1制备平板按肉汤琼脂培养基配方配制好培养基，灭菌，冷至约45℃.在无菌条件下将培养基注入直径为90mm的培养皿中，每皿约15～20ml，待培养基凝固后，将培养基做灵敏度和无菌检查，经检查合格后，培养基在2～8℃的环境中存放，备用。2.4.2采样2.4.2.1采样点数沉降的最少采样点数同悬浮粒子测定点数。空气洁净度测试方法最小培养皿数空气洁净度测试方法洁净度级别培养皿数A14B2C2D22.4.2.2采样点的布置采样点一般的离地面0.8～1.5m高度的水平面（略高于工作台）上均匀布置，避免采样点局部过于集中或过于稀疏，也可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。2.4.2.3培养皿数在满足最少测点数的同时，还应满足最少培养皿数。2.4.2.4采样将已制备好的培养皿，按洁净室沉降菌采样点布置图要求放置，打开培养皿盖，将培养基表面暴露30min,再将培养皿盖盖上后倒置。空气洁净度测试方法沉降菌采样点布置图空气洁净度测试方法2.4.2.5培养全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中。在30～35℃培养箱中培养，时间不少于48h。每批培养基拥有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿做对照培养。2.4.2.6菌落计数用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。在培养皿上有2两个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。空气洁净度测试方法2.4.2.7结果计算用计数方法得出各个培养皿的菌落数，再计算出每皿平均菌落数，公式如下：空气洁净度测试方法控制环境中空气微生物测试空气洁净度测试方法采样区域采样频率采样时间限度（cfu/皿）超净工作台（A级洁净区）1次/4周30min1B级洁净区1次/4周30min32.5结果评定用平均菌落数判断洁净室（区）空气中的微生物。洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。若某洁净室区内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均需合格。空气洁净度测试方法空气洁净级别检测技术

空气洁净度测试方法知识点2空气洁净度测试方法（洁净室、区悬浮粒子的测试方法）空气洁净度测试方法2洁净室（区）悬浮粒子的测试方法洁净室（区）悬浮粒子通常采用技术浓度法测试，即通过测定洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某粒径的悬浮粒子数，来评定洁净室（区）的悬浮粒子的洁净度等级。2.1测试依据依据《药品生产质量管理规范（2010年修订）》，附录1无菌药品。2.2测试仪器医药工业洁净室（区）悬浮粒子测试使用的仪器是尘埃粒子计数器。尘埃粒子计数器空气洁净度测试方法2.3测试步骤2.3.1采样悬浮粒子洁净度检测的采样点数目和采样量根据不同的洁净度级别而有所不同。一般采样点应均匀分布于整个面积内，并位于工作区的高度、悬浮粒子洁净度监洁净度监测的采样点数目及其布置应根据产品的生产及工艺关键操作区设置。悬浮粒子洁净度检测的最小采样点数目可查下表，对于任何小洁净室或局部空气洁净化区域，采样点的数目不得少于2个，总采样次数不得少于5次。每个采样点的采样次数可以多于1次，且不同采样点的采样次数可以不同。空气洁净度测试方法最小采样点数目面积㎡洁净度级别ABCD﹤102～322210≦S﹤20422220≦S﹤40822240≦S﹤10016422100≦S﹤200401032注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对于非单向流洁净室，指的是房间面积。空气洁净度测试方法采样点的布置采样点一般在离地面0.8m高度的水平面上均匀布置。采样点多于5点时，也可以在离地面0.8～1.5m高度的区域内分层布置,每层不少于5点。避免在回风口附近取样,而且测试人员应站在取样口的下风侧。让管口宜向上。采样量不同的洁净级别，采样量不同。悬浮粒子洁净度测试的最小采样量可查下表确定。空气洁净度测试方法每次采样的最小采样量洁净度级别采样量，L/次≥0.5um≥5umA5.66—B2.838.5C2.838.5D2.838.5空气洁净度测试方法2.3.2测试条件温度和湿度：洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应。（温度：18～24℃；湿度45～60%）压差：空气洁净度不同的洁净室（区）之间的压差应≥4.9Pa，空气洁净度级别要求高的洁净室（区）对相邻的空气洁净度级别低的洁净室（区）一般要求呈相对正压。测试状态：静态测试时，室内的测试人员不得多于2人，测试报告中应标明测试时所采用的状态。测试时间：对于单向流，测试应在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始，非单向流要不少于30min后开始。空气洁净度测试方法2.3.3检测结果的计算采样点的平均粒子浓度式中：A——某一采样点的平均粒子浓度，粒（个）/立方米；Ci——某一采样点的粒子浓度(I=1,2,3,…,n)，粒（个）/立方米；N——某一采样点上的采样次数，次；空气洁净度测试方法2.3.3检测结果的计算平均值的均值式中：M——平均值的均值，即洁净室（区）的平均粒子浓度，粒（个）/立方米；Ai——某一采样点的平均粒子浓度(I=1,2,3,…,n)，粒（个）/立方米；L——某一洁净室（区）内的总采样点数，个；空气洁净度测试方法2.3.3检测结果的计算标准误差式中：SE——平均值均值的标准误差，粒（个）/立方米；空气洁净度测试方法2.3.3检测结果的计算置信上限从正态分布抽样得到的实际均值按给定的置信度（此处为95%）计算得到的估计上限将大于此实际均值，则称计算得到的这一均值估计上限为置信上限。UCL=M+t×SE式中：UCL——平均值均值的95%置信上限，粒（个）/立方米；t——95%置信上限的t分布系数，见下表空气洁净度测试方法2.3.3检测结果的计算不同采样点数的95%置信上限t值。采样点数23456789﹥9