维生素类药物的质量分析（药物分析课件）

维生素C原料药的分析L－抗坏血酸结构有什么特点？

612345烯二醇强还原性

鉴别:AgNO3反应2,6-二氯靛酚反应含量测定：碘量法与氧化剂的反应（一）一、鉴别试验去氢抗坏血酸]O[VitC1、与AgNO3反应一、鉴别试验与氧化剂的反应（一）(ChP2015)一、鉴别试验2、与2，6-二氯靛酚反应氧化型玫瑰红色还原型蓝色OHˉ与氧化剂的反应（一）(ChP2015)（玫瑰色）（无色）3.其他氧化剂的反应：亚甲蓝或高锰酸钾试剂褪色

碱性酒石酸铜砖红色沉淀

磷钼酸钼蓝

一、鉴别试验与氧化剂的反应（一）糖类的反应（二）或盐酸50℃吡咯USP一、鉴别试验（蓝色）(糠醛)（戊糖）50℃(吡咯)(ChP2015)红外光谱（三）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致一、鉴别试验利用维生素C分子在红外的特征吸收进行溶液的澄清度与颜色检查（一）铁、铜、炽灼残渣、重金属、细菌内毒素的检查（二）草酸的检查（三）VC代谢产物二、杂质检查

（一）溶液的澄清度与颜色的检查

糠醛戊糖

脱水黄色氧化

聚合

水解脱羧水解性及糖的性质二、杂质检查杂质来源：内脂环水解、脱羧生成的有色产物检查方法：分光光度法原子吸收分光光度法

（二）铁、铜的检查

二、杂质检查----根据物质基态原子蒸汽对特征辐射吸收的作用来进行金属元素分析，能够灵敏可靠地测定

微量或痕量元素。

原理1、碘量法(ChP2015)三、含量测定指示剂淀粉指示液H+

取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6方法2、三、含量测定（1）弱酸性环境（稀醋酸）（2）新沸冷水减慢VitC被O2氧化速度讨论3、（3）立即滴定赶走水中O2减少O2的干扰三、含量测定

称取维生素C供试品（约0.2g），精密称定0.2106g，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸l0ml使溶解，加淀粉指示液lml，立即用碘滴定液(0.05031mol/L)滴定，滴定至溶液显蓝色并在30秒内不褪色，消耗碘滴定液(0.05031mol/L)23.13ml。《中国药典》现行版规定，每lml碘滴定液(0.05mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6，本品含C6H8O6不得少于99.0%。请问该供试品含量是否合格。

三、含量测定实例解析4、该原料药含量符合药典规定吗？

碘量法实例解析

=97.3%三、含量测定维生素C片的分析维生素C片的分析鉴别一、维生素C片的分析薄层色谱法（TLC）药物鉴别试验是依据化学结构和理化性质进行某些化学反应，测定某些理化常数和光学特征，来证明已知药物的真伪。不是对未知药物进行定性分析。药物鉴别是什么？是不是？鉴别方法侧重专属性、再现性和灵敏度，操作应简便、快速。一般进行2~4条鉴别试验，再结合性状项下的物理常数协助，进行真伪鉴别。维生素C片的分析检查二、维生素C片的分析含量测定三、过滤：去除不溶于水的附加剂（淀粉、硬脂酸镁等）实验仪器与试剂药品主要仪器：电子分析天平，称量瓶，研钵、碘量瓶，量筒，酸式滴定管等试剂药品：维生素C片，蒸馏水，稀醋酸、碘滴定液（0.05mol/L）、淀粉指示剂维生素C片的分析含量测定三、维生素C片含量测定计算公式式中V——消耗滴定液的体积，mL；T——滴定度；F——校正系数；W——平均片重，gW样——取样量样品的取样量，g维生素C片的分析含量测定三、维生素B1原料药的分析（一）硫色素反应荧光消失蓝色荧光硫色素正丁醇）（环合¾¾®¾¾¾¾®¾¾¾¾¾¾®¾¾¾®¾¾¾¾®¾¾¾¾®¾+-HCNFeKOHNaOHVitB6321一、鉴别试验鉴别方法：取本品约5mg，加氢氧化钠试液2.5mL溶解后，加铁氰化钾试液0.5mL与正丁醇5mL，强力振摇2min，放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光即消失；再加碱使成碱性，荧光又显出。ChP硫色素(O)环合（二）红外光谱一、鉴别试验维生素Bl的红外光谱图取本品适量，加水溶解，水浴蒸干，在105℃干燥2小时测定。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集1205图）一致。ChP（三）氯化物反应一、鉴别试验维生素B1是一种盐酸盐,故本品的水溶液显氯化物的鉴别反应ChP思考：除了上述《中国药典》中采用的三种鉴别试验，还有哪些方法可用于维生素B1

的鉴别？一、鉴别试验二、杂质检查1．酸度

取本品0.50g，加水20mL溶解后，测定其pH应为2.8～3.3。2．溶液澄清度及颜色

取本品1.0g，加水10mL溶解后，溶液应澄清无色；如显色，与对照液(取比色用重铬酸钾液0.1mL，加水适量使成10mL)比较，不得更深。3．干燥失重

取本品，在105℃干燥至恒重，减失质量不得超过5.0％。4．铁盐

取本品1.0g，加水25mL溶解后，依法用硫氰酸铵显色，与标准铁溶液2.0mL。制成的对照溶液比较，不得更深(0.002％)。5.重金属

取本品1.0克，加水25ml溶解后，依法检查（附录ⅧH第一法），含重金属不得超过百万分之十。6.有关物质

精密称取本品约10mg，加流动相稀释制成每1ml中含维生素B11mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀作为对照溶液。照高效液相色谱法（附录ⅤD）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液（含1%三乙胺，用磷酸调pH至5.5）（9：9：82）为流动相，检测波长为254nm，理论板数按维生素B1计算不低于2000，主峰与前后峰的分离度应符合要求。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20％。精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成份保留时间的3倍，供试品溶液色谱图如有杂质峰（扣除溶剂峰），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积1/2（0.5％）。7.总氯量

取本品约0.2g，精密称定，加水20ml溶解后，加稀醋酸2ml与溴酚蓝指示液8～10滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定至显蓝紫色。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于3.54mg的氯(Cl)。按干燥品计算，含总氯量应为20.6％～21.2％。二、杂质检查指示剂：喹那啶红－亚甲蓝（紫红→天蓝）（一）非水溶液滴定法非水溶剂：将水中极弱酸碱的酸碱性较明显的表现出来，使其易于被滴定。溶剂：冰醋酸作用：消除氢卤酸干扰三、含量测定反应摩尔比为1：2（一）非水溶液滴定法三、含量测定电位滴定法确定终点ChP优点：灵敏度、准确度更高（一）非水溶液滴定法三、含量测定

（一）非水溶液滴定法三、含量测定测定原理

维生素B1在酸性溶液中与硅钨酸作用产生沉淀，根据沉淀质量和供试品的质量即可计算其含量。说明：硅钨酸重量法为测定维生素B1的经典方法，其结果准确、稳定，为《中国药典》(1990)所采用。但本法操作烦琐、费时，因此《中国药典》自1995年版后原料药改用非水滴定法，而对片剂和注射液采用分光光度法。（二）硅钨酸重量法三、含量测定维生素B1片的含量测定一、掌握标准【含量测定】取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15分钟使维生素B1溶解，用上述溶剂稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加上述溶剂稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在246nm的波长处测定吸光度，按C12H17CIN4OS·HCl的吸收系数（）为421计算，即得。请同学们想一想：实验中需要哪些仪器、药品和试剂？该怎样完成这个实验呢？一、掌握标准取样

溶液制备

测定

测定步骤二、取样与检验适量？称量范围？平行称取几份？1、取样

二、取样与检验取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B125mg）1、取样

取用量为“约”若干时，系指取用量不得超过规定量的±10%二、取样与检验摇匀待测加盐酸溶液稀释至刻度精密量取续滤液5ml100mL用干燥滤纸滤过置另一量瓶中振摇15分钟加盐酸溶液稀释至刻度药粉放入量瓶中加盐酸溶液约70ml摇匀100mL2、溶液制备

二、取样与检验3、测定开机预热设置测试方式

设置波长

比色皿装液后放入样品室

测定

二、取样与检验定性鉴别

单组份的含量测定

混合试样中某成份的定量

分光光度法的应用双波长分光光度法吸收系数法（绝对法）标准曲线法对照品比较法三、结果处理及出具检验报告吸光系数法（绝对法）不需待测成份的对照品三、结果处理及出具检验报告片剂的含量测定结果用含量占标示量的百分比表示三、结果处理及出具检验报告吸光度百分吸收系数稀释倍数供试品研细后的取样量（g）起始溶液定容体积（mL）吸收池的光路长度（1cm）三、结果处理及出具检验报告测定波长246nm标示量10mg/片取样数量20片总片重（g）1.6090比色皿规格1cm起始溶液体积（mL）100供试品的稀释倍数20VitB1的百分吸收系数421平行测定次数12VitB1片粉的取样量（g）0.20950.1891测得的吸光度A值0.5530.502标示量%100.9101.5平均值101.2%相对平均偏差（%）0.3样品1样品2三、结果处理及出具检验报告产品名称维生素B1片规格10mg批号140206数