《仪器分析》课件-模块四 紫外分光光度法

仪器分析模块四紫外分光光度法项目一

紫外分光光度法原理01项目一紫外分光光度法原理-1·紫外分光光度法法相关术语目标掌握紫外分光光度法的相关术语0102相关标题文字紫外分光光度法相关术语1.生色团

能吸收紫外-可见光的基团叫生色团。主要为具有不饱和键和未成对电子的基团。

例：。

红移

紫外分光光度法相关术语2.助色团

助色团是一种能使生色团的吸收峰向长波方向位移并增强其吸收强度的官能团，一般是含有未共享电子的杂原子基团，如—NH2、—OH、—NR2、—OR、—SH、—SR、—Cl、—Br等。这些基团中的

n电子能与生色团中的π电子相互作用(可能产生p—π共轭)，使π—π*跃迁能量降低，跃迁几率变大。

3.红移、蓝移吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移。吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移4.增色效应和减色效应——波长不变使吸收强度增加的现象称为增色效应。使吸收强度降低的现象称为减色效应

5吸收带（1）R吸收带：为n→π*跃迁。特点：a.跃迁所需能量较小，吸收峰位于200~400nm；b.吸收强度弱，ε＜102。（2）K吸收带：为共轭双键中π→π*跃迁。特点：a.跃迁所需能量较R带大，吸收峰位于210~280nm；b.吸收强度强，ε>104。共轭体系的增长，K吸收带长移，210~700nm，ε增大。K吸收带是共轭分子的特征吸收带，可用于判断共轭结构。

(3)B吸收带和E吸收带—苯环带B吸收带：有苯环必有B带，230-270nm之间有一系列吸收峰，中强吸收，芳香族化合物的特征吸收峰(4)E吸收带：由苯环结构中三个乙烯的环状共轭体系的跃迁产生的，π→π*跃迁E1=185nm，强吸收，ε>104；E2=204nm，较强吸收，ε>103。仪器分析模块四紫外分光光度法项目二紫外分光光度法目标掌握高效液相色谱法中检测器种类01掌握高效液相色谱中几种检测器的原理02相关标题文字01项目一紫外分光光度法原理-1·紫外分光光度法的特点·紫外分光光度法的相关术语紫外-可见分光光度法的原理

物质对光的选择吸收

当一束光照射到某种物质的固态物或溶液上时，一部分光会被吸收或被反射，不同的物质对于照射它们的光束的吸收程度是不同的，对某个波长的光吸收强烈，对另外波长的光吸收很小或不吸收，我们把这种现象称为光的选择吸收。

一切物质都会对可见和不可见光中的某些波长的光进行吸收。

物质呈现各种各样颜色，就是它们对可见光中某些特定波长的光线选择吸收的结果。

吸收光

物质颜色

颜色波长(nm)

黄绿紫400~450

黄蓝450~480

橙绿蓝480~490

红蓝绿490~500

紫红绿500~560

紫黄绿560~580

蓝黄580~600

绿蓝绿600~650

蓝绿红650~750物质颜色和吸收光颜色的关系

物质的结构决定了物质在吸收光时只能吸收某些特定波长的光。我们可以利用测量物质对某种波长的光的吸收来了解物质的结构特性。用经过分光后的不同波长的光依次透过该物质，通过测量物质对不同波长的光的吸收程度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，就可以得到该物质在测量波长范围内的吸收曲线。这种曲线体现了物质对不同波长的光的吸收能力，称为吸收光谱。紫外-可见分光光度法的原理

入射光透射光

不同波长光检测器吸收光谱紫外-可见分光光度法的原理

紫外-可见分光光度法是利用物质对光的吸收光谱，对物质进行定性分析或定量分析的方法。按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。

0.01nm0.1nm800nm10µm500µm1cm

波长200nm400nm2.5µm25µm1m

光谱可

区域见

γ射线χ射线紫外光光红外光微波无线电波

分析分光

方法χ射线紫外分

光度核磁共振

γ射线光谱法光谱法光光度法

法红外光谱法微波光谱法光谱法

05二、液相色谱分离原理及分类根据分离机理可分为：（1）液－固吸附色谱法（2）液－液分配色谱法、（3）离子色谱法和凝胶色谱法。2.分类HPLCHPLCHPLC高效液相色谱法（HPLC）紫外-可见分光光度法的原理-定性分析

不同结构的物质吸收光谱也不同，这是对物质进行定性分析的基础：通过检测吸收光谱来比对鉴定分析物质。

波长范围吸光度利用标准物质定性分析

在相同条件下，测定未知物的吸收光谱，与标准物的吸收光谱进行比较，如果两吸收光谱的形状和吸收峰的数目、位置、拐点等完全一致，就可初步判定未知物与标准物是同一种物质。紫外-可见分光光度法的原理-定量分析Lambert–Beer光吸收定律：当一束平行单色光通过均匀的样品时，其吸光度与吸光组分的浓度、吸收池的厚度乘积成正比.入射光I0透射光ItLC紫外-可见分光光度法的原理-定