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文档简介
专题18基因工程一一回归课本一一23版高考生物复
习
专题18基因工程
基础理论和技术的发展催生了毡因工程一一植物基因工程硕果累累
来源和特点—限制性内切核酸而一1一动物基因工程前景广峭
DNA小售1―DNA重组技术的联本工具一
一落因工裳药物异军突起
具备条件+载体」
一星因治序电光初照
一
」
瘫选合适的H的基・因布的基因的崎选与获取」珏-一蛋白质工程
明
因1-
利用③获取和犷增目的基因」&
PCR^转珞因产M的安钠L转算内成果
1X1
程-IW^
「「对转墓因产品安全性的争论
的
姨H必窿中4AM..山一联因表达载"的杓建一程;
基
二
将目的基因导入植物细总一jI二
本关注生殖性克隆人厂生殖性克隆
将目的基因导入动物细胞一将H的基因导入盲体细施.性
生
掾
和---------——卜*治疗性克窿
置
将目的基因导入微生物细魄」作
伦
步
术1
-理-♦我国禁止生殖性克隆人
骤
的
1问
个体生物学水平•的饕定ZH的基因的检测那生一
安
胭生物武森的种类及特点
LI全
C禁止生物武器
知M姓建
一、重组DNA技术的基本工具
来源主要从原核生物中分离纯化出来
识别双链DNA分子的特定核甘酸序列,并且使每
限制性内一条链中特定部位的磷酸二酯穗断开
切核酸酶结果形成平末端或黏性末场
庙田而砧同防止质粒和目的基因自身环化,保证
邮两种雨点目的基因定向姬_
重组
从大肠杆菌中分离得到的,称为E.coliDNA连
DNA接的(连接黏性末端)
维
技术DNA连接酶是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连
接的(连接平末端瞬£性末端)
的基
功能形成磷酸二酯键
本工
具裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核
DNA之外.并具有自我复制能力的环状双链DNA分子
能在细胞中进行自融制,或整合到受体DNA上,
随受体DNA同步复制
载体特点
常有特殊的标记基因,如四环素抗性基因、氨不
青霉素抗性基因等,便于重组DNA分子的筛选
噬菌体、动
植物病毒等
1.下列有关重组DNA技术的基本工具的叙述,正确的是()
A.限制酶能够识别RNA分子的特定核昔酸序列
B.携带外源DNA片段的质粒可在受体细胞中进行复制
C.DNA连接酶不能连接双链DNA片段的平末端
D.DNA连接酶能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
,慰7知M税建
二、DNA粗提取与鉴定
DNA.RNA、蚩白质和座质等在物理和化学性质方面存在差异,可以利用这些
差异,选用适当的物理或化学方法对它们进行提取.
DNA在不同浓度的NaCI溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L
的NaCI溶液
称取约30g洋葱,切碎,然后放入研钵中,窗
研磨
入10mL研磨液,充分研磨
提取
在漏斗中垫上纱布,将洋葱研磨液过滤到烧杯中,在
4。(2冰箱中放置几分钟后,再取上清液
DNAK直接将洋葱研磨液翻人塑料离心告中,在1500r/minM
转速下离心5min,再取上清液放入烧坏中
榭瓢
在上清液中加入体积相等的、预泠的酒精溶液(体积分数
与鉴定徨取为95%),静置2s3min,溶液中出现的臼色丝状物就
是粗提取的DNA
在一定温度下,DNA遇二基胺试剂会呈现蓝色,因此二苯胺试剂可以作为鉴定
DN虺)试剂
取两支20m集]试售,各加入2mol/L的NaCI溶液5mL将丝状物或沉淀物溶
过程于其中一支试管的NaCI溶液中.然后,向两支试管中各加入4m⑥二羊胺试
-------------\、剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min。
考点演练
2.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是()
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
,弓7瓢次梳观
三、基因工程的基本操作程序
基
植物细胞(农杆菌转化法)
将目的
因
基因导
会商(显触岫冰)
工
细胞
组菌(钙需子艇)
程
的
基
DNAfflRNA(PCRS术)
本
目的基
蛋白质(抗原抗体会技术)
操
因的检
作测与鉴
定
程抗监检测
让基因在受体细胞中甑存在,并且/
序
遗传给下一代;同时,便基因
能弊表达和造作用,这就需要构建
基因表达载
基因表a数立
体的构建
目的基因、标记基因外,它还必须有后动子.终止子
等
flfi考颇晦
3.CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术,Cas9基因表达的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”,
在单链向导RNA(SgRNA)引导下,切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。
CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示,下列分析正确的是()
A.构建重组质粒时,SgRNA编码序列需要插入到质粒的启动子上游
B.SgRNA和Cas9蛋白形成复合体后,其功能类似于DNA聚合酶
C.根据目标DNA设计相应的SgRNA,可实现对目标DNA的定点切割
D.CRISPR/Cas9识别目标DNA序列主要与Cas9蛋白的特异性相关
,弓7乐M机理
四、DNA片段的扩增及电泳鉴定
DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些
基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这
些芾电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动
J在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分
\子的大小和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过染
'\色,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来
加入组分、离心、PCR
配制崛糖溶液加入^^34.导入模具形曲麻孔
片段的步骤
'PCR产物与缓冲液注入加样孔
扩增及
电泳鉴\电泳.观察
V_____
定
为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、枪头
和蒸谣水等在使用前必须进行高际图处理
/,该实验所需材料可以直接从公司购买,缓冲液和函应分装成小份,并在-2
00c储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上绫慢融化
在向微量离心告中添加反应组分时,每吸取一种试剂后,移液器上的
\枪头敏洪更换
*1考点演练
4.PCR技术可用于遗传多样性的研究。下图是对两个跳虫(A和B)DNA分析的实验过程,
有关叙述错误的是()
A.蛋白酶可以分解组织中的蛋白质,在提取DNA时加入蛋白酶有助于释放出DNA
B.Taq酶能够耐高温,高温下不会变性,常在PCR中用于DNA链的合成
C.将已知长度的DNA片段装到凝胶上作参照,可用于估测样本DNA片段的大小
D.阴性对照是已知DNA模板及PCR扩增过程所需的物质,以监测试剂是否污染
期也梳理
五、基因工程的应用
5.1965年9月,我国科学家首次成功合成了结晶牛胰岛素,由此开辟了人工合成蛋白质的
新时代。从生物组织中直接提取到化学合成再到利用基因工程菌生产胰岛素,生命科学的发
展不断造福人类社会。下列有关胰岛素的推测不合理的是()
A.可以利用放射性同位素标记法来研究胰岛素的合成和运输过程
B.人体细胞合成胰岛素的原料来源于自身合成和其生活的内环境
C.治疗糖尿病的胰岛素要注意低温保存,不可直接口服
D.选择大肠杆菌作工程菌产生的胰岛素与天然胰岛素的结构相同
知也税理
六、蛋白质工程
蛋白质工程
预期功能
生物功能
中心法则
d藕演练
6.水蛭是我国的传统中药材,主要药理成分水蛭素是具有抗凝血作用的蛋白质。通过蛋白
质工程操作用赖氨酸替代水蛭素第47位的天冬酰胺,可提高其抗凝血活性,相关流程如下
图,据图分析,下列叙述错误的是()
分子设计|---------顺期功能
C
—*生物功能
折蠡
A.上述研究中目前直接的操作对象是水蛭素基因
B.蛋白质工程进行中难度最大的操作是改造水蛭素基因
C.指导c形成的新水蛭素基因的碱基序列可能不同
D.改造后的水蛭素需要与天然水蛭素进行抗凝血活性比较
知收忧理
七、生物技术的安全性与伦理问题
转基因生物的
安全性J正确的社会舆论导向
一理性看待转基因技术—I社会的监督
生
物T法律制度
技
术
的
安
全
性
与
伦
理
问
题
.「生物武器的种类-致病菌、病毒、生化毒剂,以及经过基因重组的致病菌等
禁止生物武器生物武器尤其是转基因生物武器对人类的威胁
《禁止生物武器公约》及中国政府的态度
考点演练
7.转基因产品是指利用基因工程技术获得的生物制品,其安全性问题一直是大众关注和争
论的热点。下列叙述簿误的是()
A.通过转基因育种可增加或消除原有生物品种的某些性状
B.转基因食品风险评估时还需考虑标记基因的安全性问题
C.严格选择种植区域可减少转基因作物发生外源基因扩散的可能性
D.转基因作物的长期、大规模种植不利于侵染力更强的害虫的出现
专题18基因工程一一回归课本一一23版高考生物复
习
专题18基因工程
基础理论和技术的发展催生了毡因工程一一植物基因工程硕果累累
来源和特点—限制性内切核酸而一1一动物基因工程前景广峭
DNA小售1―DNA重组技术的联本工具一
一落因工裳药物异军突起
具备条件+载体」
一星因治序电光初照
一
」
瘫选合适的H的基・因布的基因的崎选与获取」珏-一蛋白质工程
明
因1-
利用③获取和犷增目的基因」&
PCR^转珞因产M的安钠L转算内成果
1X1
程-IW^
「「对转墓因产品安全性的争论
的
姨H必窿中4AM..山一联因表达载"的杓建一程;
基
二
将目的基因导入植物细总一jI二
本关注生殖性克隆人厂生殖性克隆
将目的基因导入动物细胞一将H的基因导入盲体细施.性
生
掾
和---------——卜*治疗性克窿
置
将目的基因导入微生物细魄」作
伦
步
术1
-理-♦我国禁止生殖性克隆人
骤
的
1问
个体生物学水平•的饕定ZH的基因的检测那生一
安
胭生物武森的种类及特点
LI全
C禁止生物武器
知M姓建
一、重组DNA技术的基本工具
来源主要从原核生物中分离纯化出来
识别双链DNA分子的特定核甘酸序列,并且使每
限制性内一条链中特定部位的磷酸二酯穗断开
切核酸酶结果形成平末端或黏性末场
庙田而砧同防止质粒和目的基因自身环化,保证
邮两种雨点目的基因定向姬_
重组
从大肠杆菌中分离得到的,称为E.coliDNA连
DNA接的(连接黏性末端)
维
技术DNA连接酶是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连
接的(连接平末端瞬£性末端)
的基
功能形成磷酸二酯键
本工
具裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核
DNA之外.并具有自我复制能力的环状双链DNA分子
能在细胞中进行自融制,或整合到受体DNA上,
随受体DNA同步复制
载体特点
常有特殊的标记基因,如四环素抗性基因、氨不
青霉素抗性基因等,便于重组DNA分子的筛选
噬菌体、动
植物病毒等
1.下列有关重组DNA技术的基本工具的叙述,正确的是()
A.限制酶能够识别RNA分子的特定核昔酸序列
B.携带外源DNA片段的质粒可在受体细胞中进行复制
C.DNA连接酶不能连接双链DNA片段的平末端
D.DNA连接酶能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
,慰7知M税建
二、DNA粗提取与鉴定
DNA.RNA、蚩白质和座质等在物理和化学性质方面存在差异,可以利用这些
差异,选用适当的物理或化学方法对它们进行提取.
DNA在不同浓度的NaCI溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L
的NaCI溶液
称取约30g洋葱,切碎,然后放入研钵中,窗
研磨
入10mL研磨液,充分研磨
提取
在漏斗中垫上纱布,将洋葱研磨液过滤到烧杯中,在
4。(2冰箱中放置几分钟后,再取上清液
DNAK直接将洋葱研磨液翻人塑料离心告中,在1500r/minM
转速下离心5min,再取上清液放入烧坏中
榭瓢
在上清液中加入体积相等的、预泠的酒精溶液(体积分数
与鉴定徨取为95%),静置2s3min,溶液中出现的臼色丝状物就
是粗提取的DNA
在一定温度下,DNA遇二基胺试剂会呈现蓝色,因此二苯胺试剂可以作为鉴定
DN虺)试剂
取两支20m集]试售,各加入2mol/L的NaCI溶液5mL将丝状物或沉淀物溶
过程于其中一支试管的NaCI溶液中.然后,向两支试管中各加入4m⑥二羊胺试
-------------\、剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min。
考点演练
2.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是()
A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀
C.在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色
D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
,弓7瓢次梳观
三、基因工程的基本操作程序
基
植物细胞(农杆菌转化法)
将目的
因
基因导
会商(显触岫冰)
工
细胞
组菌(钙需子艇)
程
的
基
DNAfflRNA(PCRS术)
本
目的基
蛋白质(抗原抗体会技术)
操
因的检
作测与鉴
定
程抗监检测
让基因在受体细胞中甑存在,并且/
序
遗传给下一代;同时,便基因
能弊表达和造作用,这就需要构建
基因表达载
基因表a数立
体的构建
目的基因、标记基因外,它还必须有后动子.终止子
等
flfi考颇晦
3.CRISPR/Cas9是一种高效的基因编辑技术,Cas9基因表达的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”,
在单链向导RNA(SgRNA)引导下,切割DNA双链以敲除目标基因或插入新的基因。
CRISPR/Cas9基因编辑技术的工作原理如图所示,下列分析正确的是()
A.构建重组质粒时,SgRNA编码序列需要插入到质粒的启动子上游
B.SgRNA和Cas9蛋白形成复合体后,其功能类似于DNA聚合酶
C.根据目标DNA设计相应的SgRNA,可实现对目标DNA的定点切割
D.CRISPR/Cas9识别目标DNA序列主要与Cas9蛋白的特异性相关
,弓7乐M机理
四、DNA片段的扩增及电泳鉴定
DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些
基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这
些芾电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动
J在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分
\子的大小和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过染
'\色,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来
加入组分、离心、PCR
配制崛糖溶液加入^^34.导入模具形曲麻孔
片段的步骤
'PCR产物与缓冲液注入加样孔
扩增及
电泳鉴\电泳.观察
V_____
定
为
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