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文档简介

精液和前列腺液检查1.熟悉精液检查的目的和标本送检的注意事项2.学会精液一般性状检验的方法3.能进行精液显微镜检验4.掌握精液正常参考值及临床意义学习目标返回第十四章目录第一节精液检查第二节前列腺液检查

返回第一节精液检查

一、标本收集和送检二、一般性状检查三、显微镜检查四、精子功能检查五、计算机辅助精子分析六、练习题返回精液主要由精子和精浆两部分组成精子是男性的生殖细胞,约占精液的5%精浆是运送精子的载体,约占精液的95%概论返回概论

精浆是由精囊液、前列腺液、尿道球腺及尿道旁腺等多种腺体分泌的混合液体。精囊液中含有大量维持精子生命活动的物质,其中果糖为精子提供营养及活动能量,凝固酶可维持精液的粘稠度。前列腺液为弱碱性乳白色液体,含多种营养物质,其中纤溶酶(液化因子)可使精液在短时间内液化为稀薄的液体,有利于精子运动。返回精液检验的目的①评估男性生育功能,为不育症的诊断和疗效观察提供依据;②协助诊断男性生殖系统疾病;③输精管结扎术后疗效观察;④计划生育科研;⑤为体外受精和精子库筛选优质精子;⑥法医学鉴定。返回精液标本送检的注意事项:①采样前禁欲3~5天;②采样后立即送检;③送检时间不超过1h;④传送时注意保温;⑤精液标本按照潜在生物危害物质处理。返回精液检查项目精液常规检查(简便实用的传统项目)精子功能检查精浆生化分析免疫学检查微生物学检查遗传基因检查计算机辅助精子分析系统。(其他检验项目目前多只在专门的男性实验室中进行)返回一般性状检查{显微镜检查精液检查项目精液常规检验的内容包括

一般性状检查主要包括精液外观、量、粘稠度、液化时间、酸碱度;

显微镜检查主要有精子活率、精子活动力、精子计数、精子形态观察、精液细胞学检查等。返回精液一般性状检查(一)精液外观

正常人刚排出的精液呈胶冻状有高度的粘稠性;外观呈灰白色或乳白色不透明的液体;自行液化后为较稀薄的半透明乳白色;久未排精者可略带灰黄色。

血性精液见于生殖系统急性炎症、结核、肿瘤等。

脓性精液见于精囊炎或前列腺炎时。返回精液一般性状检查(二)精液量

将液化的精液用小量筒或移液管测定全部精液量,以毫升数报告。正常人一次排出精液约为2~5ml,精液量<1ml或>8ml,即可视为异常。返回精液一般性状检查精液量减少:占男性不孕症的22%。见于前列腺和精囊病变、射精管阻塞,先天性精囊缺如等。精液量增多:占男性不育症的5%。此可因垂体前叶促性腺素的分泌功能亢进,使雄激素的水平升高所致。返回精液一般性状检查

(三)精液液化时间指排精后精液自行从胶冻状转变为流动状所需的时间。液化时间观察标本应放在37℃,每10min观察一次。返回精液一般性状检查

(三)精液液化时间正常精液是一种均匀粘稠的液体,射精后立即凝固,5~10min后开始液化,30min完全液化。超过60分钟不液化,视为异常;24小时不液化者,为不育原因之一,可直接报告24小时不液化。返回精液一般性状检查

(三)精液液化时间前列腺炎症时,因炎症破坏纤溶酶,可导致精液不液化或液化不完全,抑制精子活力,从而减少受孕机会。返回(四)精液粘稠度精液一般性状检查

指完全液化后的粘度。在精液全部液化后,可用直接玻璃棒法测定:用玻璃棒提拉粘液丝,正常粘丝长度不超过2cm。粘稠度增加时,精液悬滴可形成长于2cm的长丝。返回精液一般性状检查粘稠度测定可分为3级:Ⅰ级,为30min基本液化,用玻璃棒提拉精液呈细丝状粘液丝;Ⅱ级,为60min不液化,提拉时可见粗大粘液丝,涂片时有粘稠感;Ⅲ级,为24h仍不液化,无法用玻棒提拉起,粘稠度高,涂片困难。返回精液一般性状检查

精液粘稠度增高见于前列腺炎症,常伴有不液化,可阻抑精子活动力。粘稠度减低见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症。返回

用精密pH试纸测定精液的pH值。正常为弱碱性,pH为7.2~8.0。精液pH值应在射精后1小时内测定,放置1小时以上的精液,因为代谢产物可成为酸性。

(五)精液酸碱度精液一般性状检查返回精液一般性状检查返回精液显微镜检查(一)精子存活率(二)精子活动力(三)精子计数(四)精子形态观察(五)精液细胞检查返回精液显微镜检查方法:待精液完全液化、充分混匀后,取适量标本涂于载玻片上,直接湿片观察。通常先在低倍镜下粗略观察有无精子。如果镜下未见精子,应将全部精液离心,取管底沉淀物再涂片观察,如仍无精子,则报告“查无精子”,可判定为无精子症,不必继续镜检。返回

直接涂片观察有无精子,可判断输精管结扎术是否成功,一般于手术后第6周开始检查,每周1~2次,连续观察3次,查无精子则手术成功。精液显微镜检查返回精液显微镜检查(一)精子存活率以活精子所占精子总数的百分率来表示。返回精液显微镜检查

(一)精子存活率检查方法

1.直接涂片法取液化精液一滴涂于载玻片上,高倍镜下直接观察5~10个视野,计数活动精子百分率返回精液显微镜检查

(一)精子存活率检查方法

2.伊红染色法在载玻片上加新鲜精液和5g/L伊红Y染色液各1滴,混匀,30s后推成薄片高倍镜下直接观察。活精子不着色,死精子染成红色。(精子死亡后,细胞膜的完整性受损,失去屏障功能,易于着色)返回精液显微镜检查

(一)精子存活率参考值精子活率≥75%(伊红染色法)

临床意义主要用于男性不育症的检查返回精液显微镜检查(二)精子活动力是指精子向前运动的能力。WHO把精子活力分为a、b、c、d四级返回精液显微镜检查

(二)精子活动力结果判断

a级:快速向前运动

b级:慢速或呆滞的向前运动

c级:非前向运动

d级:不动返回精液显微镜检查

(二)精子活动力方法取10

l标本涂片,连续观察至少5个视野,计数同一视野内各级精子数量。(至少对200个精子进行分级)

返回精液显微镜检查

(二)精子活动力参考值

a级精子≥25%

或a级+b级精子之和≥50%

(正常精液采集后60min内)返回精液显微镜检查

(二)精子活动力临床意义主要用于男性不育症的检查。返回精液显微镜检查(三)精子计数是指每升精液中的精子数量,即精子浓度。返回精液显微镜检查

(三)精子计数原理用碳酸氢钠破坏精液的粘稠性,以甲醛固定精子,稀释后充入计数池内计数。返回精液显微镜检查

(三)精子计数试剂精子稀释液:碳酸氢钠5g,40%甲醛溶液1ml,蒸馏水加至100ml,待完全溶解过滤后使用。返回精液显微镜检查

(三)精子计数操作

1.取精子稀释液0.38ml,

2.加液化并充分混匀的精液20l,摇匀。

3.充池,静置1~2min,

4.在高倍镜下以精子头部做为基准计数。(计数区域一般为中央大方格内的5个中方格)返回精液显微镜检查(三)精子计数计算精子数/L=5个中方格所数精子数×5×10×20×106/L=5个中方格内精子数×109返回精液显微镜检查

第3版《全国临床检验操作规程》规定:如每个中央中方格内﹥40个精子,应计数5个中方格每个中央中方格内10~40个精子,计数10个中方格每个中央中方格内﹤10个精子,计数25个中方格返回精液显微镜检查

(三)精子计数参考值正常精子浓度≥20×109/L返回精液显微镜检查

(三)精子计数临床意义精子计数<20×109/L为精子数量减少,可影响受孕。注意正常人精子数变化较大,出现一次异常结果,应隔1周后复查,反复查2~3次方能得出比较正确的结果。在临床实践中少数计数偏低者,仍有生育能力,故判断一个男性的生育能力应经多次检验后,结合精液检验的其他指标综合分析。返回精液显微镜检查

精子数量减少的原因:

①精索静脉曲张;②先天性或后天性睾丸疾病,如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等;③输精管或精囊缺如;④重金属损害,如铅、镉中毒或放射性损害;⑤某些药物,如抗癌药等;⑥50岁以上男性精子数逐年减少。返回精液显微镜检查(四)精子形态检查方法一:直接涂片高倍镜下观察(湿片法)方法二:瑞-姬染色法(常用的染色法)方法三:改良巴氏染色法(男性实验室常采用)返回精液显微镜检查

(四)精子形态检查方法

1.瑞-姬染色法:取液化混匀的精液1滴涂片,干燥后行瑞-姬氏染色,油镜下观察并计数100~200个精子,报告正常或异常精子百分率(%)。返回精液常规检查精液显微镜检查精子形态正常精子形似蝌蚪状,分头、体、尾三部分,头部呈卵圆形或梨形,体部轮廓直而规则,尾部细长约50~60

m。返回精液显微镜检查

异常精子包括头部异常、体部异常、尾部异常及混合异常。头部异常如大头、小头、双头、不规则头、头部边缘不齐等;体部异常如双体、体分支、体部短小、体消失等;返回精液显微镜检查

(四)精子形态检查2.改良巴氏染色法在载玻片上滴1滴精液,约5~20l制片,待干后,用95%乙醇和乙醚等量混合液固定5~15min;行改良巴氏染色,在油镜下观察100~200个精子。返回精液显微镜检查

(四)精子形态检查参考值正常形态精子为82%~94%临床意义正常精液中异常精子应<20%,如超过20%为不正常。感染、外伤、高温、放射线、酒精中毒、药物、精索静脉曲张均可造成畸形精子数量增加。返回精液显微镜检查(五)精液细胞检查

1.未成熟生殖细胞是指各阶段发育不完全的生精细胞,包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及发育不全的精子细胞。这些细胞的形态、大小及核的形态、大小均不规则。返回精液显微镜检查

(五)精液细胞检查参考值未成熟生精细胞<1%

临床意义正常人成熟精细胞>99%,在病理情况下,当曲细精管受损(药物或他因素),精液中可出现较多的未成熟生精细胞。返回精液显微镜检查返回精液显微镜检查2.红细胞、白细胞正常精液中可存在少量的红细胞、白细胞。精液中白细胞主要是中性粒细胞,在直接涂片镜检时易将生精细胞与白细胞混淆,可用过氧化物酶染色法加以鉴别,前者为阴性,后者为阳性。返回精液显微镜检查

(五)精液细胞检查参考值正常精液中红细胞偶见、白细胞<5/HP。临床意义精液中红细胞、白细胞增高,可见于生殖道炎症、结核、恶性肿瘤等。(按WHO标准,精液中白细胞>1×109/L的不育症患者称为白细胞精子症)返回精液显微镜检查返回精液常规检查参考值及异常情况归纳表检查项目参考值异常情况外观精液量液化时间粘稠度酸碱度精子活率精子活动力(60min内)精子计数精子形态红、白细胞精液常规检查灰白色或乳白色脓性或血性2~5ml/1次<1ml或>8ml30min完全液化>60min不液化Ⅰ级、粘丝长度<2cmⅡ级或Ⅲ级、粘丝长度>2cmpH值7.2~7.8pH<7.0或pH>7.8≥75%(伊红染色法)<60%a级精子≥25%,或a级+b级精子之和≥50%a级<25%;或a级+b级精子<50%≥20×109/L<20×109/L正常形态精子82%~94%异常精子>20%<5/HP>5/HP返回四、精子功能检查(一)体内穿透试验在排卵期或近排卵期性交后数小时,检查宫颈口粘液活精子数量、活率及活动力,从而评价精子穿透宫颈粘液的能力。本试验标本的采集时间必须是女方排卵期或近排卵期。【正常参考区间】性交4~6h后,可见正常活动度精子数>25/HPF;6~8h后,>70/HPF。返回四、精子功能检查(一)体内穿透试验【临床意义】结果取决于精子与宫颈粘液的相互关系。其中任何一方异常均可影响实验结果。①宫颈粘液中如存在抗精子抗体或精子表面结合有抗精子抗体,精子将出现凝集现象;②精子本身若有遗传或代谢障碍、逆行射精等,精子亦不能穿透宫颈粘液;③宫颈粘液异常,如宫颈疾病(炎症、粘连、囊肿等)所致、或粘液粘滞度大、酸性粘液、脓性粘液等,均可导致本试验异常。返回四、精子功能检查(二)体外穿透试验1.精子-宫颈粘液玻片穿透试验【操作】在一块洁净的玻片上相距约4mm处,分别滴排卵期宫颈粘液和液化精液1滴,轻轻加上盖玻片,使两液滴慢慢接触而形成交界面,然后置37℃孵育10~15min,取出镜检。以紧邻界面的第一个高倍视野设为Fl,靠近Fl的第二视野为F2,分别记录Fl和F2中活动的精子数。返回四、精子功能检查(二)体外穿透试验1.精子-宫颈粘液玻片穿透试验【结果判断】

①正常:精子穿透粘液,并90%以上精子呈直线运动;②较差:精子能穿透粘液,但运动距离小,离开粘液与精液界面<500

m;③异常:精子穿透粘液后.很快失去活力或仅有摆动;或精子不能穿透以上界面或于界面精液侧出现凝集。

返回四、精子功能检查(二)体外穿透试验1.精子-宫颈粘液玻片穿透试验【参考区间】精子穿透粘液,且90%以上精子呈直线运动。【临床意义】由于精子-宫颈粘液玻片穿透试验操作尚未完全标准化,所以常有一定的主观性。如试验结果异常,应结合精液其他检查结果综合分析。返回四、精子功能检查2.精子-宫颈粘液接触试验【操作】取精液及近排卵期宫颈粘液等量混合,室温下静置30min,观察并计数非正常运动(摆动)精子的出现率,以未与宫颈粘液混合的精液作对照,求出摆动精子的出现率(%)。摆动精子越多,意味着精子运动功能受损越严重。此外,可用其他供者的精液或宫颈粘液分别进行交叉试验,以确定抗精子抗体是来自精液或宫颈粘液。返回四、精子功能检查2.精子-宫颈粘液接触试验【参考区间】阴性(精子摆动出现率0~25%)【临床意义】试验结果阳性(﹥25%),提示精液或宫颈粘液中存在抗精子抗体。返回四、精子功能检查3.仓鼠卵-精子穿透试验又称为精子穿透试验(SPT),是评价精子功能最常用的试验。SPT是测定精子获能、顶体反应和结合卵子能力的一种技术复杂而严格的生物学试验。试验结果用相差显微镜观察,计算卵子受精率和受精指数。计算公式:受精率(%)=受精卵数/卵细胞总数×100%;受精指数=穿透卵细胞的精子数/卵细胞总数返回四、精子功能检查3.仓鼠卵-精子穿透试验【参考区间】受精率≥10%;受精指数≥5。【临床意义】受精指数<5,示生育力下降。SPT试验结果与体内、外穿透实验结果有良好的相关性,对不育症的诊断符合率达90%,可作为测定精子功能的基础试验。SPT不仅可用于原因不明不育男子的诊断依据,而且可作为评价人工授精试验的依据.但试验影响因素较多,必须加强质量控制。返回四、精子功能检查4.精子低渗肿胀试验(HOS)【试剂】膨胀液:枸橼酸钠0.735g,果糖1.351g,加蒸馏水至100ml。分装,-20℃冷冻保存,使用前解冻,并充分混匀。返回四、精子功能检查4.精子低渗肿胀试验(HOS)【结果判断】

a型,未出现肿胀;

b型,尾尖肿胀;

c型,尾尖弯曲肿胀;

d型,尾尖肿胀伴弯曲肿胀;

e型,尾弯曲肿胀;

f型,尾粗短肿胀;

g型,全尾部肿胀。返回四、精子功能检查4.精子低渗肿胀试验(HOS)【参考区间】尾部肿胀精子>60%。【临床意义】

HOS试验可以预测精子膜有无损害,由于操作简便、快速,且与其他精子功能试验有良好的相关性,常用来判断精液中是否存在AsAb

返回五、计算机辅助精子分析

计算机辅助精子分析(CASA)技术是通过一台高分辨率的显微摄像系统,采集精子形态图象和精子运动图象,用计算机和专用精液分析软件对图象进行处理和分析,能自动测试近20项精液分析指标,包括精子浓度、精子活率、活力、精子运动速度、精子运动方式、精子头运动轨迹图和力度等一系列“运动学”参数,有些仪器还可以检查精子形态学参数等。特别是对精子运动的分析有快速、直观、准确的特点。返回总结

精液常规检查包括一般性状检验及显微镜检验两大方面。具体内容:①精液外观;②精液量;③精液粘稠度;④精液液化时间;⑤精液酸碱度;⑥精子活动率;⑦精子活动力;⑧精子计数;⑨精子形态观察;⑩精液细胞学检查返回总结

正常精液常规检查报告示例:灰白色;3ml;液化时间30min;粘稠度Ⅰ级;pH值7.5;精子活率80%;精子活动力a级+b级精子占70%;精子计数60×109/L;正常形态精子85%;红细胞1~2/HP、白细胞3~5/HP返回名词解释1.精液液化时间指新排出的精液从胶冻状转变为流动状所需的时间.返回名词解释2.精子活动力

是指精子向前运动的能力。

WHO将其分为a、b、c、d四级。返回名词解释3.精子活率是指活精子占精子总数的比例.返回问答题1.简述精液检查的目的返回①评估男性生育功能,为不生育症诊断和疗效观察的提供依据②辅助诊断男性生殖系统疾病③输精管结扎术疗效观察④计划生育科研⑤为体外授精和精子库筛选优质精子⑥法医学鉴定问答题2.试述精子计数的原理返回用碳酸氢钠破坏精液的粘稠性,以甲醛固定精子,稀释后充入计数池内计数。问答题3.试述精子计数的方法返回①于小试管内加精子稀释液0.38ml,吸取

液化后并充分混匀的精液20μl,摇匀;②充分摇匀后,充入计数池内,静置1~2min,以精子头部做为基准进行计数;③在高倍镜下计数中央大方格内5个中方格

(RBC计数区)内的精子数。精子数/L=5个中方格所数精子数

×5×10×20×106/L问答题4.试述精子计数的结果计算返回问答题5.试述精子计数的参考值精子计数≥20×109/L返回第二节前列腺液检验

一、一般性状检验二、显微镜检查三、练习题返回1.量正常前列腺液,一次量为数滴至2ml。前列腺炎症时则显著减少甚至无液可采。

一、一般性状检验返回一、一般性状检验2.颜色正常前列腺液,呈乳白色稀薄液体。

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