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文档简介
T/CIRAXXXXX—2021
ICS67.020
CCSX04
团体标准
T/CIRAXXXXX—2023
白纹伊蚊规模化辐照雄性不育技术要求
Technicalrequirementsforlarge-scaleirradiation-basedsterilityinductionofAedes
albopictusmalemosquitoes
(征求意见稿)
2023年8月2日
XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施
中国同位素与辐射行业协会发布
T/CIRAXXXXX—2023
白纹伊蚊规模化辐照雄性不育技术要求
1范围
本文件规定了应用辐照技术(X射线)对白纹伊蚊(Aedesalbopictus)雄蚊进行规模化绝育的技术
要求。
本文件适用于在昆虫不育技术框架下,对工厂化饲养的白纹伊蚊雄蚊进行规模化辐照诱导雄性不
育。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T15446辐射加工剂量学术语
GB/T16841能量为300keV~25MeV电子束辐射加工装置剂量学导则
ISPMNo.18将辐照技术作为植物检疫措施准则(Guidelinesfortheuseofirradiationasa
phytosanitarymeasure)
T/CIRAXXXXX-2023白纹伊蚊雄蚊规模化生产技术要求
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
雄蚊malemosquito
1-3日龄的白纹伊蚊雄性成蚊。
3.2
雄蚊包装mosquitopackage
将雄蚊置于冷库中,在低温条件下使其进入昏睡状态,收集称重后分装到器皿中,盖紧盖子,用于
后续辐照。
3.3
辐照源irradiationsource
加速器产生的能量为5MeV或5MeV以下的X射线。
3.4
辐照距离irradiationdistance
II
T/CIRAXXXXX—2023
辐照光源到辐照物品之间的距离。
3.5
中心剂量率centraldoserate
光源穿透0.1mm或0.2mm铜滤波片或无滤波片后到达辐照杯中心的剂量率。
3.6
辐照温度exposuretemperature
辐照期间,腔室内设置的温度。
3.7
水平旋转horizontalrotation
辐照杯位于旋转台上,辐照期间,旋转台会以每分钟一定的速度进行旋转。
3.8
上下倒置canisterswapping
达到设定辐照剂量一半时,将上下的两个辐照杯进行位置调换。
3.9
目标辐照剂量targetdose
在目标吸收的辐照剂量,一般由目标中心测得的剂量率乘以辐照时间。
3.10
剂量均一性doseuniformityratio(DUR)
单位时间内在规定的辐照区域内最大吸收剂量和最小吸收剂量的比值(DUR)。
3.11
绝育雄蚊sterilemales
接收目标辐照剂量的白纹伊蚊雄蚊,一般其绝育强度(inducesterility,IS)大于或等于99%。
3.12
绝育强度inducesterility(IS)
绝育雄蚊与正常雌蚊交配后,阻止雌蚊产下蚊卵成功孵化变成幼虫的效果。
3.13
竞争交配力指数malematingcompetitivenessindex
绝育雄蚊与正常雄蚊竞争交配正常雌蚊的能力。
3.14
III
T/CIRAXXXXX—2023
存活率survival
经辐照、冷藏、运输等处理后,绝育雄蚊恢复飞行的占比。
4仪器与材料
4.1器皿
塑料,透明材质,规格为直径100mm,高度18mm,用于装载雄蚊。
4.2辐照杯
塑料,透明材质,规格为直径104mm,高度59mm,用于装载辐照物品(如装有雄蚊器皿)的装
置。
4.3辐照装置
X射线辐照仪,由X射线管、高压发生器、电源系统、室内水机组和制冷外机组成。
4.4滤波片
0.1mm或0.2mm的铜滤波片。
4.5胶片
一种免冲洗胶片,吸收射线后颜色会发生变化,且变化程度与吸收剂量相关。辐照前,将剪裁为15
mm×15mm的胶片与被辐照物品雄蚊放置一起。
5操作条件
5.1冷库条件
温度10±2℃,相对湿度70%±10%。
5.2辐照间条件
温度20±2℃,相对湿度45%±5%。
5.3辐照腔体条件
温度10±2℃,相对湿度65%±15%。
6辐照流程
6.1雄蚊包装
将雄蚊置于冷库中,待雄蚊昏睡后,称重并分装到器皿中,每皿约放4000-5000只雄蚊,并放入一
张未辐照胶片,盖上盖子后,将皿转移至辐照杯中,每个辐照杯可装3个皿,每次辐照可同时容纳2
个辐照杯,共计可装24000-30000只雄蚊。雄蚊的包装流程参见附录A图A.1。
6.2辐照条件设定
辐照条件设定见表1。
IV
T/CIRAXXXXX—2023
表1.白纹伊蚊规模化辐照条件
条件参数备注
辐照温度10±2℃通过制冷系统,将腔体的温度设定在10±2℃,保证在辐照
期间,雄蚊处于昏睡状态
X射线管160KV,37.5mA射线管功率为6.0KW
铜滤波片0.1或0.2mm铜滤波片挂在射线进入辐照腔体的进口处
辐照距离36cm光源达到辐照物品中心的水平距离
旋转台2转/分钟辐照期间通过水平旋转可以降低剂量均一度
上下置换-在达到目的剂量一半时,停止辐照,将辐照杯进行上下倒置
后,再进行剩余剂量的辐照
剂量均一性(DUR)1.14两个辐照杯叠放区域的最高吸收剂量与最低吸收剂量比值
目标剂量60Gy可诱导雄蚊产生超过99%的绝育强度
最小吸收剂量~56Gy根据DUR=1.14推测得出
最大吸收剂量~64Gy根据DUR=1.14推测得出
6.3辐照处理
开启辐照仪,使辐照腔的温度维持在10±2℃。将4.1装有雄蚊的辐照杯放到旋转台上,根据一半
目标剂量设置辐照时间。辐照结束后,将辐照杯进行上下倒置,然后再进行另一半目标剂量辐照,雄蚊
的辐照流程参见附录A图A.2。总辐照剂量设定为60Gy,辐照剂量与雄蚊绝育强度参见附录B。
6.4辐照标识
辐照后,将装有绝育雄蚊的培养皿从辐照杯中取出,然后取出胶片,如观察到胶片颜色发生变化,
证明雄蚊接受过辐照,贴上“辐照过”标签,标签上设有辐照批次、辐照日期、辐照剂量等关键信息,然
后放置在冷库中,等待后续运输到野外进行释放。
7辐照不育关键技术指标
——辐照剂量:56Gy-64Gy,雄蚊规模化辐照诱导绝育的剂量范围为56Gy-64Gy。
——绝育强度:99%-100%,本文件规定经辐照后的雄蚊(绝育雄蚊)与正常雌蚊交配后,阻止雌
蚊产下蚊卵成功孵化变成幼虫的效果大于或等于99%,即平均绝育强度≥99%。
8其它指标
除上述规定绝育雄蚊的关键技术指标,结合已有文献报导和主编、参编单位中试研究结果,对绝育
雄蚊的其它指标建议如下:
——平均竞争交配力指数:0.7-2.0,绝育雄蚊与正常雄蚊竞争交配正常雌蚊的能力大于或等于0.7。
V
T/CIRAXXXXX—2023
——平均存活率:90%-100%,经辐照、冷藏、运输等处理后,绝育雄蚊的平均存活率大于或等于
90%。
9其它影响因素
可能影响绝育雄蚊技术指标的主要因素包括:
——规则制度,辐照处理应严格按照GB/T16841相关要求进行,从事生物辐照的人员需要严格遵守
相关辐照管理制度,参见附录C。
——辐照剂量率,过低或过高的剂量率均会影响绝育强度,为达到本文件的绝育强度,建议选择的
辐照剂量率在3.0-15Gy/min之间。
——处理容积,增加辐照杯的半径可以增加雄蚊装载量,但同时可能会影响辐照剂量均一性DUR,
建议剂量均一性数值处于1.0-1.3之间。
——其它因素,蚊虫饲养条件、饲养环境、人工操作过程、运输过程等因素改变,可能会影响绝育
雄蚊的竞争交配力指数以及存活率,需要对各个技术环节进行严格把控,保证绝育雄蚊质量满足技术指
标。
10附加声明
本文件所规定的白纹伊蚊雄性成蚊辐照工艺和技术指标是依据主编和参编单位在中试条件下取得
的实验研究结果。
在昆虫不育技术框架下,对工厂化饲养的埃及伊蚊(Aedesaegypti)、致倦库蚊(Culex
quinquefasciatus)和斯氏按蚊(Anophelesstephensi)等雄性成蚊进行辐照绝育,辐照工艺和技术指标可
参照本文件。
VI
T/CIRAXXXXX—2023
附录A
(资料性)
白纹伊蚊雄蚊包装和辐照流程
图A.1辐照前白纹伊蚊雄蚊包装流程图
图A.2白纹伊蚊雄蚊辐照流程图
7
T/CIRAXXXXX—2023
附录B
(资料性)
辐照剂量与雄蚊绝育强度关系
根据世界卫生组织和国际原子能机构制定《昆虫不育技术作为防治媒介伊蚊传播疾病的
测试指导框架》规定,经辐照的伊蚊雄蚊的绝育强度大于或等于99%。为确定应用辐照技术
对白纹伊蚊雄蚊进行规模化绝育的辐照剂量,选择工厂化饲养的白纹伊蚊雄蚊进行不同剂量
辐照,来确定剂量与绝育强度的关系。
选择1-3日龄的白纹伊蚊雄蚊,按照4.1进行包装,然后进行辐照,辐照剂量选择35Gy,
40Gy,45Gy,50Gy,55Gy和60Gy。辐照后,将雄蚊置于笼子中。待蚊虫苏醒后,随机
挑选辐照雄蚊100只,放入100只未经交配的正常雌蚊。6-7日后,给笼子中的雌蚊吸血产卵。
待蚊卵发育成熟后,进行孵化,并记录卵孵化率为Hs。同时设定对照组正常雄蚊(未经辐
照,0Gy)与正常雌蚊交配,记录卵孵化率为Hn。
雄蚊绝育强度计算公式为:IS%=100%-(Hs/Hn)*100%
根据表B.1实验结果,随着辐照剂量增加,雄蚊的绝育强度逐渐增强,当为55Gy或60Gy
时,绝育强度超过99%。为保证绝育效果的稳定性,选择60Gy作为目标剂量。
为验证辐照剂量与雄蚊绝育强度的重复性,选择60Gy作为辐照剂量,连续开展30批次
辐照,结果显示雄蚊的平均绝育强度超过99%,如表B.2所示。
表B.1辐照剂量与雄蚊绝育强度关系试验结果
交配组合剂量试验批次卵孵化率卵孵化率绝育强度
(%,Hs)
(Gy)(%,Hn)(%,IS)
正常雄蚊×正常雌蚊0189.04-0
辐照雄蚊×正常雌蚊351-8.9189.99
辐照雄蚊×正常雌蚊401-4.4794.98
辐照雄蚊×正常雌蚊451-2.4697.24
8
T/CIRAXXXXX—2023
辐照雄蚊×正常雌蚊501-1.5798.24
辐照雄蚊×正常雌蚊551-0.5799.36
辐照雄蚊×正常雌蚊601-0.3999.56
表B.2辐照剂量与雄蚊绝育强度重复性试验结果
交配组合剂量试验批次卵孵化率卵孵化率绝育强度
(Gy)(%,Hn)(%,Hs)(%,IS)
正常雄蚊×正常雌蚊03091.74-0
辐照雄蚊×正常雌蚊6030-0.6699.27
9
T/CIRAXXXXX—2023
附录C
(资料性)
辐照管理制度
[1]未经允许不得擅自进入辐照间。
[2]技术人员操作辐照仪前需经过关于辐照生物安全知识培训。
[3]进入辐照间必须佩带个人剂量监测仪。
[4]辐照应严格按照标准操作进行。
[5]辐射结束后,按照操作关闭装置电源。
[6]每次辐射结束后必须进行登记。
[7]仪器使用中途发生故障,须先切断电源,上报后,专业人员进行维护修理。
[8]辐照间室内外均需配置相应的防护装置和安全警示牌。
[9]技术人员须每三到六个月进行常规身体检查。
10
T/CIRAXXXXX—2023
参考文献
[1]世界卫生组织和国际原子能机构.昆虫不育技术作为防治媒介伊蚊传播疾病的测试指导
框架.日内瓦:世界卫生组织和国际原子能机构;2020.许可:CCBY-NCSA3.0IGO.
WHO&IAEA.Guidanceframeworkfortestingthesterileinsecttechniqueasavector
controltoolagainstAedes-bornediseases.Geneva:WorldHealthOrganizationandthe
InternationalAtomicEnergyAgency;2020.Licence:CCBY-NCSA3.0IGO.
[2]联合国粮食及农业组织/国际原子能机构粮食和农业核技术联合中心.HananoYamada,
AndrewParker,HamidouMaiga,RafaelArgilesandJérémyBouyer(编者).昆虫不育技术
项目中蚊蛹辐照操作指南.联合国粮食及农业组织/国际原子能机构粮食和农业核技术
联合中心.维也纳,奥地利,2020,42页.第一版本.
FAO/IAEA.HananoYamada,AndrewParker,HamidouMaiga,RafaelArgilesandJérémy
Bouyer(eds.).GuidelinesforIrradiationofMosquitoPupaeinSterileInsectTechnique
Programmes.FoodandAgricultureOrganizationoftheUnitedNations/InternationalAtomic
EnergyAgency.Vienna,Austria.2020.42pp.Version1.0.
[3]张东京,奚志勇,李永军,王晓华,YamadaH,邱洁茹,梁永康,张美春,吴瑜,郑小英.
应对实施昆虫不相容和昆虫不育技术控制蚊虫:优化释放前白纹伊蚊雄蚊操作处理的
冷藏条件.PLoSNeglTropDis,2020,14(9):e0008561.
ZhangD,XiZ,LiY,WangX,YamadaH,QiuJ,LiangY,ZhangM,WuY,ZhengX.
Towardimplementationofcombinedincompatibleandsterileinsecttechniquesformosquito
control:optimizedchillingconditionsforhandlingAedesalbopictusmaleadultspriorto
release.PLoSNeglTropDis,2020,14(9):e0008561.
11
T/CIRAXXXXX—2023
前言
本文件按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中国同位素与辐射行业协会提出并归口。
本文件起草单位:中山大学、中大核昆生物技术(东莞)有限公司。
本文件主要起草人:。
I
T/CIRAXXXXX—2023
白纹伊蚊规模化辐照雄性不育技术要求
1范围
本文件规定了应用辐照技术(X射线)对白纹伊蚊(Aedesalbopictus)雄蚊进行规模化绝育的技术
要求。
本文件适用于在昆虫不育技术框架下,对工厂化饲养的白纹伊蚊雄蚊进行规模化辐照诱导雄性不
育。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
GB/T15446辐射加工剂量学术语
GB/T16841能量为300keV~25MeV电子束辐射加工装置剂量学导则
ISPMNo.18将辐照技术作为植物检疫措施准则(Guidelinesfortheuseofirradiationasa
phytosanitarymeasure)
T/CIRAXXXXX-2023白纹伊蚊雄蚊规模化生产技术要求
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
雄蚊malemosquito
1-3日龄的白纹伊蚊雄性成蚊。
3.2
雄蚊包装mosquitopackage
将雄蚊置于冷库中,在低温条件下使其进入昏睡状态,收集称重后分装到器皿中,盖紧盖子,用于
后续辐照。
3.3
辐照源irradiationsource
加速器产生的能量为5MeV或5MeV以下的X射线。
3.4
辐照距离irradiationdistance
II
T/CIRAXXXXX—2023
辐照光源到辐照物品之间的距离。
3.5
中心剂量率centraldoserate
光源穿透0.1mm或0.2mm铜滤波片或无滤波片后到达辐照杯中心的剂量率。
3.6
辐照温度exposuretemperature
辐照期间,腔室内设置的温度。
3.7
水平旋转horizontalrotation
辐照杯位于旋转台上,辐照期间,旋转台会以每分钟一定的速度进行旋转。
3.8
上下倒置canisterswapping
达到设定辐照剂量一半时,将上下的两个辐照杯进行位置调换。
3.9
目标辐照剂量targetdose
在目标吸收的辐照剂量,一般由目标中心测得的剂量率乘以辐照时间。
3.10
剂量均一性doseuniformityratio(DUR)
单位时间内在规定的辐照区域内最大吸收剂量和最小吸收剂量的比值(DUR)。
3.11
绝育雄蚊sterilemales
接收目标辐照剂量的白纹伊蚊雄蚊,一般其绝育强度(inducesterility,IS)大于或等于99%。
3.12
绝育强度inducesterility(IS)
绝育雄蚊与正常雌蚊交配后,阻止雌蚊产下蚊卵成功孵化变成幼虫的效果。
3.13
竞争交配力指数malematingcompetitivenessindex
绝育雄蚊与正常雄蚊竞争交配正常雌蚊的能力。
3.14
III
T/CIRAXXXXX—2023
存活率survival
经辐照、冷藏、运输等处理后,绝育雄蚊恢复飞行的占比。
4仪器与材料
4.1器皿
塑料,透明材质,规格为直径100mm,高度18mm,用于装载雄蚊。
4.2辐照杯
塑料,透明材质,规格为直径104mm,高度59mm,用于装载辐照物品(如装有雄蚊器皿)的装
置。
4.3辐照装置
X射线辐照仪,由X射线管、高压发生器、电源系统、室内水机组和制冷外机组成。
4.4滤波片
0.1mm或0.2mm的铜滤波片。
4.5胶片
一种免冲洗胶片,吸收射线后颜色会发生变化,且变化程度与吸收剂量相关。辐照前,将剪裁为15
mm×15mm的胶片与被辐照物品雄蚊放置一起。
5操作条件
5.1冷库条件
温度10±2℃,相对湿度70%±10%。
5.2辐照间条件
温度20±2℃,相对湿度45%±5%。
5.3辐照腔体条件
温度10±2℃,相对湿度65%±15%。
6辐照流程
6.1雄蚊包装
将雄蚊置于冷库中,待雄蚊昏睡后,称重并分装到器皿中,每皿约放4000-5000只雄蚊,并放入一
张未辐照胶片,盖上盖子后,将皿转移至辐照杯中,每个辐照杯可装3个皿,每次辐照可同时容纳2
个辐照杯,共计可装24000-30000只雄蚊。雄蚊的包装流程参见附录A图A.1。
6.2辐照条件设定
辐照条件设定见表1。
IV
T/CIRAXXXXX—2023
表1.白纹伊蚊规模化辐照条件
条件参数备注
辐照温度10±2℃通过制冷系统,将腔体的温度设定在10±2℃,保证在辐照
期间,雄蚊处于昏睡状态
X射线管160KV,37.5mA射线管功率为6.0KW
铜滤波片0.1或0.2mm铜滤波片挂在射线进入辐照腔体的进口处
辐照距离36cm光源达到辐照物品中心的水平距离
旋转台2转/分钟辐照期间通过水平旋转可以降低剂量均一度
上下置换-在达到目的剂量一半时,停止辐照,将辐照杯进行上下倒置
后,再进行剩余剂量的辐照
剂量均一性(DUR)1.14
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