项目3-4 有机磷农药残留的测定 (1)课件讲解

有机磷农药残留的测定有机磷农药：是用于防治植物病、虫、害的含有磷原子的一类农药的总称。这一类农药品种多，剧毒类：甲拌磷、对硫磷等；高毒类甲基对硫磷、甲胺磷等；中毒类：乐果、敌百虫等；低毒类：马拉硫磷等近年来，由于有机磷农药的过量和不当使用造成中毒事件屡屡发生，对人类的健康造成了严重的威胁。因此，检测有机磷农药在食品中的残留十分重要。海南“毒豇豆”事件2010年1月，武汉市农业局在抽检来自于海南省英洲镇和崖城镇的5种豇豆样品中发现水胺硫磷农药残留，继而在广州、上海、深圳等地都发现了毒豇豆。

仅武汉销毁毒豇豆3596.9公斤。

水胺硫磷，是一种高毒性农药，早在2002年，农业部已将它例如黑名单中，禁止在水果蔬菜、中草药植物上使用。它能经由食道、皮肤和呼吸道，引起人体中毒。毒韭菜事件2010年4月，青岛市某医院接诊一名患者，诊断：食品中毒——有机磷中毒！罪魁祸首：韭菜中甲拌磷严重超标，青岛市共发现8例患者。工商执法人员共检查农产品批发、零售市场、商场超市和农村集市1650个(次)，分别在华中、抚顺路、城阳三大蔬菜批发市场查出农残超标韭菜共1930公斤。河南南阳毒韭菜事件2011年3月，河南南阳4个家庭的10口人中毒住进医院。中毒原因系在流动菜贩购买残余农药（甲拌磷）超标的韭菜。经过调查这些菜贩，以前他们就没有种过韭菜。就在一边庄稼地中间种了一点，也没有种植的经验，自己私自使用一些违禁的农药，就造成了超标的现象。GB2763-2012《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》食品类别/名称最大残留限量（mg/kg）谷物小麦0.02高粱0.02玉米0.05油料及制品大豆0.05花生仁0.1花生油0.05棉籽0.05食品类别/名称最大残留限量（mg/kg）蔬菜鳞茎类蔬菜0.01芸苔属类蔬菜0.01叶菜类蔬菜0.01茄果类蔬菜0.01瓜类蔬菜0.01豆类蔬菜0.01茎类蔬菜0.01根茎类和薯芋类蔬菜0.01水生类蔬菜0.01芽菜类蔬菜0.01甲拌磷的最大残留量GB2763-2012《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》食品类别/名称最大残留限量（mg/kg）谷物糙米0.5油料棉籽0.1蔬菜鳞茎类蔬菜0.05芸苔属类蔬菜0.05叶菜类蔬菜0.05茄果类蔬菜0.05瓜类蔬菜0.05豆类蔬菜0.05茎类蔬菜0.05食品类别/名称最大残留限量（mg/kg）萝卜0.1根茎类和薯芋类蔬菜（萝卜除外）0.05水生类蔬菜0.05芽菜类蔬菜0.05其他多年生蔬菜0.05水果仁果类水果0.05柑橘类水果0.05核果类水果0.05浆果和其他小型水果0.05热带和亚热带水果0.05瓜果类水果0.05甲胺磷的最大残留量知识目标：

1.会说出有机磷农药测原理；

2.会说出气相色谱的组成部分及作用；技能目标：

1.会熟练使用漩涡振荡器、氮吹仪等对样品进行预处理

2.会正确使用气相色谱仪对样品进行测定和数据处理

3.能准确进行数据记录和处理

4.能根据正确评价食品中有机磷农药残留是否符合标准素质目标：

1.培养学生严谨、务实的学习精神；

2.培养学生开拓创新、团结协作的职业素质。

学习目标检测依据NY/T761-2008第1部分：蔬菜水果中有机磷农药残留的测定（方法二）适用范围：适用于蔬菜和水果中敌敌畏、甲拌磷、甲胺磷等54种有机磷类农药残留的检测测定原理：

试样中有机磷类农药用乙腈提取，提取液经过过滤、浓缩后，用丙酮定容，注入气相色谱仪，农药组分经毛细管柱分离，用火焰光度检测器（FPD）检测，以保留时间定性、外标法定量。具体工作任务分解任务3：提取液的浓缩与定容任务2：样品制备与提取任务4：气相色谱测定任务5：定性判断与定量任务1：主要仪器设备氮吹仪任务一：主要仪器设备气相色谱仪

多功能食品加工机漩涡振荡器任务二、样品制备与提取黄瓜去皮，切成小块，放入搅拌机中，打浆准确称取10.00±0.1g黄瓜匀浆于50mL离心管中旋涡振荡器上混匀2min

准确加入20.0mL乙腈

过滤，滤液收集到装有2g~3g氯化钠的50mL具塞量筒中

收集滤液20mL左右盖上塞子，剧烈震荡1min

室温下静置30min，使乙腈相和水相完全分层从具塞量筒中移取4.0mL乙腈提取液于10mL刻度试管中

将试管置于氮吹仪中用移液管移入2.0mL丙酮

温度设为75℃，缓缓通入氮气，蒸发近干

在旋涡混合器上混匀用0.2um滤膜过滤至样瓶中供气相色谱测定不能完全干，也不能有明显残留任务三、提取液浓缩与定容任务四、气相色谱测定仪器：气相色谱仪（带有火焰光度检测器FPD）色谱条件：①色谱柱：HP-1701

30m×0.325mm×0.25um

（或相当者）②气体及流量：载气：氮气（纯度≥99.999%），流速10mL/min燃气：氢气（纯度≥99.999%），流速75mL/min助燃气：空气，流速75mL/min③温度：进样口温度：220℃检测器温度：250℃柱温：150℃（保持2min）250℃（保持12min）8℃/min空心毛细管柱任务四、气相色谱测定色谱分析：由自动进样器或手动进样器分别吸取1.0μL标准混合液和净化后的样品溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。重复平行123样品质量m(g)提取溶剂总体积V1（mL）

吸取出用于检测的提取溶液的体积V2（mL）

样品溶液定容体积V3（mL）根据图谱判断加入的标准农药名称，打勾；并填写对应表格

A．甲拌磷

B.毒死蜱该农药保留时间（min）

样品溶液中该农药的峰面积A

标准溶液中的该农药质量浓度ρ(mg/L)标准溶液中该农药的峰面积As

计算公式样品被测农药的残留量w（mg/kg）

农药的残留量平均值w（mg/kg）w=

任务五、定性与定量计算计算公式：w=

式中：w——样品中被测农药的残留量，单位毫克每千克（mg/kg）ρ——标准溶液中农药的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）A——样品溶液中被测溶液的峰面积As——农药标准溶液中被测农药的峰面积V1——提取溶剂的总体积，单位为毫升（mL）V2——吸取出用于检测的提取溶液的体积，单位为毫升（mL）V3——样品溶液定容体积，单位为毫升（mL）m——试样的质量，单位为克（g）知识拓展1、气相色谱仪气相色谱法是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就，是一种新的分离、分析技术，它可分离和分析复杂的多组分混合物。在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。

安捷伦气相色谱仪（6890N）

安捷伦气相色谱仪（7890A）

2、气相色谱仪原理气相色谱仪是以气体作为流动相（载气）。利用试样中各组份在流动相（载气）和固定相之间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组分就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组分的吸附或溶解能力不同，因此各组分在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组份的色谱峰。2、气相色谱仪的组成气相色谱由气路系统、进样系统、分离系统、检测系统和记录系统五部分组成近样系统分离系统气路系统记录系统检测系统2、气相色谱仪的组成（1）气路系统：由高压气瓶、减压阀、气流调节阀和有关连接管道组成。作用是提供载气、推动组分在柱中运行的动力，常用载气：氮气、氦气、氢气或氩气，一般使用氮气或氢气。要求净化纯度达99.999%（2）进样系统：由样品盘、自动进样器、进样口组成，作用是将样品瞬间气化为蒸汽并引入色谱柱。要求：进样量（毛细管柱一般允许进样量为1～2uL)，进样时间小于1s。（3）分离系统：由柱箱、色谱柱组成色谱柱是气相色谱仪的核心部件，柱子一般是用不锈钢或玻璃管制成U型或螺旋形。它分为填充柱和空心毛细管柱。柱箱为色谱柱提供温度控制。在气相色谱测定中，温度是重要的指标，直接影响色谱柱的选择分离。色谱柱的温度控制方式有恒温和程序升温两种．空心毛细管柱（4）检测系统：检测器也是色谱仪的重要部件，是把色谱柱分离的各组分的浓度或质量转换成电信号的装置．检测器种类：a、火焰光度检测器(FPD)：又称硫、磷检测器，它是一种对含硫、磷有机化合物具有高选择性和高灵敏度的质量型检测器，检出限可达10-12g·S-1（对P）或10-11g·S-1（对S）；这种检测器可用于大气中痕量硫化物以及农副产品、水中的纳克级有机磷和有机硫农药残留量的测定．b、氢火焰检测器(FID)：典型的质量型检测器，对有机化合物具有很高