二级甲等医院微生物检验作业指导书

微生物学

作业指导书

文件编号：301-24

第5版

编制：

审核：

批准：

生效日期：20年月日

县人民医院检验科

目录

序号主题内容文件编号页号

1目象32

2修订页34

39120全自动血培养仪操作维护规程3015

43111二氧化碳培养箱操作维护规程30216

59162III隔水式恒温培养箱操作维护规程30319

6-10002生物安全柜作业指导书30420

750型立式压力蒸汽灭菌器操作规程30522

896nl细菌测定系统标准操作规程30631

996nl细菌测定系统随机体外诊断试剂操作规程30734

1010自动加样仪操作规程30838

11标本采集30944

12革兰氏染色操作规程31048

13抗酸染色操作规程31149

14药敏试验操作规程31251

15血液及骨髓微生物学检验操作规程31360

16尿液细菌培养操作规程31462

17粪便微生物学检验操作程序31563

18穿刺液的微生物学检验操作规程31665

19脓液及伤口分泌物的微生物学检验操作规程31766

20导管细菌培养操作规程31867

21呼吸道微生物检验操作规程31968

22脑脊液微生物检验操作规程32071

23生殖系统微生物检验操作规程32172

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24细菌鉴定流程图32274

25支原体实验室检测（微生物检验法）32381

26衣原体实验室检测（快速胶体金法）32483

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修订页

序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期

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9120全自动血培养仪

操作维护规程

1.目的

指导工作人员按照标准化的操作步骤来使用仪器，确保每日结果的准确可信。

2.基本结构

9120全自动血培养仪由主机和联机电脑两部分组成。主机有控制面板及显示器；内有A、B、C3

个孵育架，每个孵育架共40个瓶位，每个瓶位均有红、绿二色指示灯指示瓶位状况，瓶位底部有检测

荧光信号变化的检测器。主机门内贴有条码面板。

3.原理

配套使用的培养瓶内有微生物生长的各种营养物质，而微生物在生长过程中的代谢产物之一C02会

激活瓶内底部荧光感应物质而发出荧光，荧光信号变化与2变化成正比。该荧光信号的变化经一组运

算公式的运算，得出荧光信号变化的各种参数，从而判断培养瓶内是否有微生物生长。BDB9120

设定瓶位探测器检测与计算时间间隔为每一次，并可根据运算结果提供生长曲线。

4.仪器操作步骤

4.1开机

打开仪器电源开关，仪器进行系统自检。该机为24小时连续开机，仅在必要时(如第一次使用或停

电后)才需重新开机。

4.2工具菜单(F5)

4.2.1功能描述

功能键功能功能内容

F3Configuration系统设置

F5Backup数据备份

F7Restore备(分回输

F9Activities手工方式

4.2.2系统设置(F3)由工程师或产品专员设定。

4.2.3手工方式(F9)当条码扫描仪损坏时可以利用手工方式操作。

*按F9进入手工操作界面，界面指示与条码面板相同。

*选择所需功能，并确认。

4.2.4数据备份(F5)与备份回输(F7)

4.2.4.1数据备份(F5)建议用户每天做数据备份，每天一张软盘，可循环使用。

*按F5,进入数据备份界面。

*插入软盘，按F10,计算机提示完成拷贝的百分率。

4.2.4.2备份数据回输(F7)

*按F7进入备份回输界面。

*插入备份软盘，按F10开始回输。

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*计算机提示回输结束。

4.3样本培养与检测

4.3.1信息输入及培养瓶装入已抽入血液的培养瓶准备完毕后：

4.3.1.1撕下培养瓶上的双条码之一，贴于送检报告，以备查询

4.3.1.2按F3键，在出现的界面上按顺序输入标本信息。

4.3.1.3用外部扫描器，扫描培养瓶的条形码，输入培养瓶的序列号（）

4.3.1.4计算机自动指定培养瓶可放置的位置。

4.3.1.5按F10存盘。

4.3.1.6打开主机门

4.3.1.7用条码扫描仪扫条码面板

4.3.1.8扫描瓶上条码，孵育架上瓶位指示灯亮

4.3.1.9将培养瓶放入指定瓶位。听到“嘀、嘀、嘀”三声指示操作结束，关门。

4.3.2取出阴性瓶（）主机对普通细菌培养的默认培养周期为5天，5天内如检测不

到细菌生长，将作为阴性瓶处理，软件界面””与瓶位编号指示阴性瓶出现。

4.3.2.1打开主机门。

4.3.2.2用条码扫描仪扫描条码面板。

4.3.2.3阴性瓶所在位置瓶位指示灯亮。

4.3.2.4逐个取出阴性瓶。如仪器设定为“逐个取出阴性瓶”的用户，在阴性瓶取出后需逐个扫描瓶上

条码；如仪器设定为“成批取出阴性瓶”的用户，无需再扫描瓶上条码。

4.3.2.5听到“嘀、嘀、嘀”三声指示操作结束，关门。

4.3.3取出阳性瓶（）主机检测到阳性瓶后，软件界面“”、瓶位编号以及主机外部“”均会给出阳

性指示，并伴有报警声。

4.3.3.1按F2消除报警声。

4.3.3.2打开主机门。

4.3.3.3扫描条码面板

4.3.3.4阳性瓶所在位置瓶位指示灯亮

4.3.3.5逐个取出阳性瓶，并同时扫描瓶上条码。听到“嘀、嘀、嘀”三声指示操作结束，关门。对于

阳性瓶，如在仪器设置中设置了重新放回功能“”，则仪器保留该瓶位以及相关数据三小时，

等待重新阳性瓶重新放入，重新放入时操作同培养瓶上机操作。

4.4报警及错误处理

4.4.1错误种类

错误类型可能的产生原因

培养瓶未插入指定位置/未培养瓶

Anonymous匿名心

上搬寸扫描瓶上网

取出培养腼时未扫条码或培养瓶

VialMissing培养瓶丢失

Error错插入其他位置而造成的空位

Station

BadStation瓶位损坏瓶位检测器损坏

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4.4.2匿名瓶（）当培养瓶未插入指定瓶位或培养瓶上机时未扫描瓶上条码，仪器无法找到相关培养

瓶资料，因而报错，错误类型为匿名瓶与孤儿瓶，软件界面和瓶位编码。均显示有出现。

4.4.2.1打开主机门。

4.4.2.2扫描条码面板。

4.4.2.3孵育架上匿名瓶瓶位指示灯亮。

4.4.2.4从指定位置取出匿名瓶，扫描瓶上条码，仪器指示应放入位置，孵育架上指定位置指示灯（红/

绿）亮。

4.4.2.5将培养瓶放入指定位置。

4.4.2.6听到“嘀、嘀、嘀"三声，关门。

4.4.3错误瓶位与错误瓶（）当"”的瓶位中培养瓶丢失或检测器发生故障时.，系统报告，软件界

面“”，瓶位编号，以及主机外部指示灯“”

均会有出错指示，并伴有报警声。

4.4.3.1按F2消除报警声。

4.4.3.2打开主机门。

4.4.3.3扫描条码面板。

4.4.3.4孵育架上错误瓶位指示灯亮。

4.4.3.5确定培养瓶是否在指定瓶位并完全插好。

4.4.3.5.1培养瓶未完全插好，或未在指定瓶位但可以立刻找回：将培养瓶放回指定瓶位并确保插好，

扫描条码面板。听到的的的三声指示操作结束，关门。

4.4.3.5.2培养瓶未在指定瓶位，且不能找回，扫描条码面板。在计算机上对该瓶位执行人工瓶位状态

阴性设定。

4.4.3.5.3培养瓶已在指定位置，并完全插好，判断可能是培养孔本身问题，则扫描条码面板封闭该瓶

位。

注意：当系统同时存在匿名瓶和错误瓶时，请务必先解决匿名瓶。

4.5培养瓶状态的人工设定（）如果由于解决错误的需要，正在培养过程中的培养瓶状态可以进行人

工设定。

4.5.1按F3键。

4.5.2在下输入需人工设定状态的培养瓶位置。

4.5.3将光标移动到“”，当前显示状态为。

4.5.4按F9在计算机对话框提示下输入“N”（阴性）或“P”（阳性）。

4.5.5按F10确认修改。

4.5.6再按F10存盘。

4.5.7如果设定为阴性瓶，则执行取出阴性瓶程序（）。

4.5.8如果设定为阳性瓶，则执行取出阳性瓶程序（）。

注意：如果人工设定为阳性瓶，同时仪器设有重新放回功能（），则该瓶位将被保留三小时，并在保存数

据中。

4.6其他软件功能

4.6.1培养瓶状态与资料查询（F3）正在仪器中（）的培养瓶可以直接查询培养瓶状态与相关文字资

料。

4.6.1.1按F3

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4.6.1.2将光标移到“”

4.6.1.3扫描送检报告上贴有的培养瓶条码，

4.6.1.4或在下扫入（输入）实验室条码

4.6.1.5屏幕显示所有文字状态与资料

4.6.2生长曲线查询（F4）正在仪器中（）或已经结束培养的培养瓶可以直接查询生长曲线。

4.6.2.1按F4o

4.6.2.2在下输入欲查询的培养瓶位置.

4.6.2.3在下输入该培养瓶放入主机的日期。日期输入格式为：日/月/年（312002）,如果该培养

瓶还在主机内，则无需输入该日期。本系统可查询14天以内的生长曲线。

4.6.2.4按F4生长曲线形成。

4.6.2.5按F10查看曲线。

4.6.2.6或按屏幕打印，打印曲线。

4.6.3报告格式（F7）

4.6.3.1按F7打印报告可进入报告模式。

4.6.3.2格式化报告菜单。

4.6.3.2.1选择打印时，将光标移至所需打印的报告格式前，按“Y”，再按F10开始打印。

4.6.3.2.2在操作时，先将光标移至前面，按Y,回车，前面小写y显示为大写Y后，光标会自动移至

其后面，要求你输入起始日期和结止日期，如结止日期为今日，则直接回车默认为今日，使

用上下“一t-I”键可在Y、起始日期与结止日期之间进行选择。

报告格式打印

UnloadPositive打印自上次自动报告后所有取出的阳性瓶相关文字资料

UnloadNegative打印自上次自动报告后所有取出的阴性瓶相关文字资料

HourlyVial打印设定时间段内的所有培养瓶:相关文字资料

VialInventory打印目前主机内所有瓶位状态（包括可利用版位）

CurrentPositive打印当前在主机内的阳性培养瓶状态

CurrentNegative打印当前在主机内的阴，

QualityControl打印所有瓶位质捆现报告期团或Enor的瓶位

打卬设定时间范用内，够关『培养状况的概蜘恳包描⑴FinalNegativeand

CultureSummary

Positive(2)MediaSummaiyf31WoikloadRepon-TotalEntriesS^tem

CultureHistory打印凝时间范用内，取出的所郁性阴性硫息（须大）

24-HourInventory打印自（一日）昨日自动打印时间诞当前时间内放入主机的麟献息

48-HourInventory打印自二日前自掰TE卿可起当前时间内外主机的培养蝴息

72-HourInventory打印自三日前自期印时间赃当蒯间内放入主机的僦端息

可以有:种选他（1）更新H动打印取出阳性瓶报告（2）唐新自动打印取出阴性碰

ReprintAutomatic

告（3）重新自动打印质控报告

OrphanLoadList打印系统中存在的祖厮】匿名版信息

4.6.3.3用户自定义报告（F3）

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4.6.3.3.1按F3开始自定义报告，不包括质量控制、培养数量和自动重打印功能。

4.6.3.3.2选中所需功能块，按确认，或按删除。

4.6.3.3.3按F10保存。

4.7日常维护

4.7.1维护菜单（F9）维护菜单提供瓶位封闭与解封功能

4.7.1.1瓶位封闭（F5）：用于将损坏的瓶位封闭，系统将不会在新瓶登录时使用该瓶位。

4.7.1.2瓶位解封（F3）：在将瓶位修复后解开封闭的瓶位，此瓶位恢复使用。

4.7.2日常维护

4.7.2.1检查所有指示灯与报警信号状态。

4.7.2.1.1打开主机门。

4.7.2.1.2按下列顺序扫描条码面板。

条码内容

IliummateRedludicator肺嬲的色机淅曲亮

IlluminateGreenIndicator孵育架所俵跑脸前亮

IlluminateFrontPanel

向神泗惭声;

Indicator

AudibleAlarmTest报警声响三次

4.7.2.1.3如有损坏瓶位。

*扫描条码面板。

*获得新的瓶位。

*封闭该瓶位，并塞上塞子，以防再用。

*任何移至新瓶位的培养瓶均应立即进行传代培养。

4.7.3每隔一星期用清水清洗仪器后部的空气过滤器（）o

4.7.4每隔一个月检查仪器内温度计读数与显示屏显示的温度是否一致（误差＜±0.50C）,须保证仪器

门关闭时间＞2小时。

4.7.5每三个月检查仪器内探测器是否洁净，如需要清洁，可使用干棉签清洁。

4.7.6请保持房间的温度（18—25°C）,保持实验室干燥和洁净，少开窗户，随手关门。

4.7.7如遇停电，请将仪器电源开关关闭，等来电后，再重新开启仪器。

4.7.8如遇无法排除的故障报警，将仪器电源关闭，三分钟后重新开启仪器即可.

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5.解决匿名瓶

当存在无资料的培养瓶时，出现黄色数字，即为匿名瓶。按以下程序解决。

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6.解决错误瓶

当培养瓶丢失时，出现红色数字，即为错误瓶。按以下程序解决。

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7.手工转阴性

有时，我们需要人为地将某个培养瓶设定为阴性。操作步骤如下:

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8.培养瓶种类

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英文名利p文名称采血量培养基体适用标本货号

■

BACTEC1

Standard10来源于未使用过

标准厌氧

Aerobic/F3-10inl25ml抗生素患者的标442191

■瓶

IIIIlli本

440099100000

BACTEC1

来源于未使用过

Standard标准厌氧

3-10inl25ml抗生素患者的标442191

Anaerobic/F瓶

本

llllllllll■

AzinAOoinnnnn_

BACTECTM

Plus+来源广已使用过

C/F树管辄

AEROBI3-10ml25ml抗生素患者的标442192

III本

440099920000

BACTECTV

PLUS-来源于已使用过

ANAEROBrc/r树瞥氧3-10inl40ml抗生素患者的标442193

iliummiIlli本

440099930000

BACTECTM

树脂儿童童或其他采血

l-3ml40ml442194

困难的标本

llllllllll11瓶

440099940000

含溶血素3-lOinl40ml需溶血的厌442265

BACTEC™厌氧/真菌菌、真菌培养

LYTIC/10瓶

Anaerobic/

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IIIIIIUIII1

440099950000

■含溶血素

BACTEC™来源于无菌体液

分枝杆的

MVco/FLYTIC3-10ml40ml的分枝杆菌、真442288

i-jil真菌培养

IIIIlliIII瓶菌标本

BACTEC™含溶血素

来源于无菌体液

Mvcosis-ICF分枝杆菌/

3-10ml40ml的分枝杆菌、真442288

111真菌培养

MMmu瓶菌标本

440099970000

8.1树脂对标本内的抗生素有吸附作用，建议对来源于使用过抗生素患者的标本均应采用树脂瓶

8.2标本注入培养瓶后请尽快上机，如因故延迟，则应保证在规定时间之内上机：

各类树脂瓶/儿童瓶/含溶血素厌氧瓶：35℃W20小时，

25℃这48小时，

各类标准瓶：3512小时，

25℃近48小时，

8.3对于每一次采样，建议至少同时做一个需氧瓶与一个厌氧瓶，并在不同时间、不同部位做三次采样,

以提高阳性检出率。

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3111二氧化碳培养箱

操作维护规程

1.目的

指导工作人员按照标准化的操作步骤来使用仪器，确保每日结果的准确可信。

2.用途：

用于各种细菌的2/。2培养。

3.原理:

通过2/传感器、热导()传感器，自动调节培养箱的参数，提供精确的细胞培养条件。

4.技术参数：

1.设定值和校正值能稳定保存容积：184L

2.2传感器：或

3.2范围：0—20%

4.02传感器：燃料池

5.。2范围：1—20%

6.相对湿度：环境湿度一9537℃

7.温度：高于室温5-55℃

5.参数设置

5.1温度设置

按到“”位置，按“-一”选择温度设置参数"”，用“t3”设定所需的温度值，并按

确定。按回到位置，或按“一一”选择其他参数。

5.2过温设置

按到“”位置，按“一一”选择过温设置参数””，用"t设定所需的过温报警值，

并按确定。按回到"”位置，或按一”选择其他参数。

5.32浓度设置

按到“”位置，按”选择2浓度设置参数“2"，用“tI”设定所需的2浓度值，

并按确定。按回到"”位置，或按“----”选择其他参数。

6.参数校准

进行温度或2浓度校准时，必须保证机器内部的温度，湿度和2浓度完全稳定。刚安装的机器或长时

间停止使用的机器，在温度和2浓度到达设定值后，必须再稳定12小时以上。正在使用的机器，在温

度和2浓度到达设定值后，必须再稳定2小时以上。

6.1温度校准

按到位置，按“一一”选择温度校准参数""，用“tI”将测量的箱体内的实际温度

值输入，并按确定。按回到"”位置，或按“----”选择其他参数。

6.22浓度校准

按“”到“”位置，按“-一”选择2浓度校准参数”2，用“tI”将测量的实际2浓度值输

入，并按确认。按回到"”位置，或按“一一”选择其他参数。

注：12浓度值校准时，客户必须使用准确的2测量仪，若无2浓度测量仪，请以空气为标准对机器

进行较零。请按以下步骤较零：a.按““至卜'”位置，按“一一”选择2浓度设置参数“2

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用“t将此数值设置为0.0虬P.打开仪器的玻璃内门2-3分钟，放出仪器内部残留的2气体,

关上玻璃内门，让机器按以上方式稳定。c.仪器完全稳定后，查看2浓度值是否为0.0%,若不是，

请按照2浓度校准步骤将2浓度校准为0.0%.

2.2浓度的校准必须在温度稳定的基础上进行。若温度值不准，请先校准温度，再校准2浓度。

6.32传感器校准

注：此方法只在上一种方法无效时才可使用。

*先将2浓度设定值调为0%,打开门，将箱体内的2放干净，关上门，让系统稳定工作12小时以上。

*仪器完全稳定后，查看2浓度值是否为0.0%,若不是，请按照2浓度校准步骤将2浓度校准为0.0%。

*将2浓度设定值调为5%,等系统稳定2小时后，使用2测试仪测定箱体内2的实际浓度（必须保证实

际浓度＞3%）。

*测好后，按到“”位置，同时按“一一”两个按钮，直到系统显示“”，此时按“一”直到显

示“2"，用“tI”将测量的实际2浓度值输入，并按“”确认。

*最后按回到位置，这样就完成了2传感器斜率的校准。

*浓度到达设定值后，测量箱体内的实际浓度，若和显示值不一致或相差太多，请重复。直到2浓度显示

值和箱体内的实际浓度一致为止。

7.操作流程：

7.1将含52混合气体的钢瓶与2减压表相连接；

7.2通过减压表连接到2进气阀上，并打开阀门；

7.3打开气瓶阀门，检查进气管是否通畅或漏气；

7.4取出孵箱内盛水的储水皿，加入适量的饱和食盐水；

7.5接通电源，在环境下设置各种参数；

7.6检查孵箱显示板上各项参数是否付合细胞培养的条件要求；

7.7在使用过程中，出现报警并灯闪烁，应先检查显示板上各项参数的变化情况，

7.8作适当的调整操作，并关闭报警器；

7.9发现2气体用完后，即时通知管理人员更换气体；

8.仪器使用注意事项

8.12减压表的低压值不要超过0.1.由于此压力值过高而造成的仪器损坏，我们不能提供免费服务。

8.2机器使用一段时间后会出现“”报警。此报警信息是提醒您更换高效过滤器，此过滤器成圆盘状,

位于仪器内上部。此过滤器的使用寿命与z气体的质量，实验室的环境，试验要求的精度等因素有

关，因此过滤器更换的时间，您可根据自身的情况而定。无论过滤器更换与否，请按下列步骤消

除此报警信息：

按“”到“”位置，按一”直到仪器显示参数“”（此时此数值应为0）,按“”确认。

按回到"”位置，或按“----”选择其他参数。

8.3室内温度应保持在30℃以下。室内温度过高会造成仪器散热不好，进而会使仪器的温度上下浮动，

无法稳定。

8.4不要用腐蚀性较强的消毒液对仪器进行消毒。腐蚀性较强的消毒液可能会造成仪器内部生锈。

8.5设备若长时间不用，应将湿度盘里的水倒掉，并打开门将箱体内的湿度降下来。否则会导致循环风

机受潮损坏。

8.62浓度斜率的校准必须由专职人员操作。

8.7仪器应良好接地。

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6相关记录

《温箱温度记录表》

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9162in隔水式恒温培养箱

操作维护规程

1仪器原理和适用范围

11采用电热器加热、精制双金属片热控温度原理。具有钢板外壳和内箱，中填玻璃棉隔热等设计特点。

12适用于中小实验室作干燥、恒温培养等工作。

13仪器工作条件——电源220V；50；5A；400W功率；接地良好、桌面稳定；

14环境条件一一防震、通风。

2技术参数

21温度调节范围室温加3℃〜60℃：

22温度波动范围±1℃、温度均匀性±1℃；

23最大容量为420X420X5003；

3操作步骤

31接通电源，调节温度至工作所需温度，观察温度计是否达到，多次微调后定位

32搁置工作物后关上箱盖，直到需取用时拿出；

33长时间不用时，应拔出电源插头，确保安全。

4注意事项

41为确保培养目的实现，外插温度计应为合格品，并随时观察温度是否正确；

42为确保仪器内钢制金属内壳与搁板不受腐蚀，酸碱试剂不得置于箱内；

43箱壳必须有效接地，若有电感，应立即切断电源，检查排除故障：

5仪器维护

51日常维护——保持机外清洁，每月用消毒液清洗机内，经常注意温度变动；

52定期、期间核查按《仪器设备管理程序》进行，定期每年一次、期间1〜2次，主要了解温度恒定、

钢制内壳和搁板锈蚀状况等。

6相关记录

《温箱温度记录表》

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10002生物安全柜

操作维护规程

i.目的

规范生物安全柜的操作与维护工作，确保仪器正常运作，以保障工作人员的安全。

2.适用人员

临床免疫实验室检验人员。

3.该变动程序

本标准操作程序的改动，可由任一使用本的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业组长、科

主任。

4.内容

4.1操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免双臂频繁穿过气幕破坏气流；并且在移入前

用70%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。

4.2打开风机5〜10分钟，待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内，

至少静止1分钟，使柜内气流稳定后再进行操作。

4.3安全柜内不放与本次实验无关的物品。柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开，

操作过程中物品取用方便，且三区之间无交叉。物品应尽量靠后放置，但不得挡住气道口，以免干

扰气流正常流动。

4.4操作时应按照从清洁区到污染区进行，以避免交叉污染。为防可能溅出的液滴，可在台面上铺一用

消毒剂浸泡过的毛巾或纱布，但不能覆盖住安全柜格栅。

4.5柜内操作期间，严禁使用酒精灯等明火，以避免产生的热量产生气流，干扰柜内气流稳定；且明火

可能损坏滤器。

4.6工作时尽量减少背后人员走动以及快速开关房门，以防止安全柜内气流不稳定。

4.7在实验操作时，不可打开玻璃视窗，应保证操作者脸部在工作窗口之上。在柜内操作时动作应轻柔、

舒缓，防止影响柜内气流。

4.8安全柜应定期进行检测与保养，以保证其正常工作。工作中一旦发现安全柜工作异常，应立即停止

工作，采取相应处理措施，并通知相关人员。

4.9工作完全后，关闭玻璃窗，保持风机继续运转10〜15分钟，同时打开紫外灯，照射30分钟。

4.10安全柜应定期进行清洁消毒，柜内台面污染物可在工作完成且紫外灯消毒后用2%的84消毒液擦拭。

柜体外表面则应每天用1%的84消毒液擦拭。

4.11柜内使用的物品应在消毒后再取出，以防止将病原微生物带出而污染环境。

5.保养与维护

5.1安全柜应定期进行清洁消毒，柜内台面污染物可在工作完成且紫外灯消毒后用2%的84消毒液擦拭。

柜体外表面则可以每天用1%的84消毒液擦拭。

5.2安全柜的内表面应在每次使用前与使用后进行去污处理。要用消毒剂擦拭工作台表面及内壁面，使

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用的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物。一天工作结束时，应进行最后表面去污处理，即

对工作台、各个侧面、背面及玻璃的里面进行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精，这种对目

标生物有效的消毒剂。如使用漂白粉液这种有腐蚀性的消毒剂，则要用灭菌水进行二次擦拭。建议

工作柜在清洁、消毒时处在工作状态。如果其未处在工作状态，则应运行5分钟，以便在安全柜关

闭前将其中的气体清除掉。

6相关记录

《生物安全柜使用登记表》

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50型立式压力蒸汽

灭菌器操作规程

i.目的

规范50型立式压力蒸汽灭菌器的操作与维护，确保仪器正常运行，以保障工作人员的安全。

2.适用人员

临床微生物室检验人员。

3.工作环境

环境要求通风、宽敞、地面平整，不准与有腐蚀性物品摆放在同一空间。

4.原理

基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水

的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。温度越高，需时越短，热穿透能力越强。一般认定1150c

-121.3℃,对培养基的成分不产生破坏。

5.操作步骤

5.1开盖

提示：开盖前必须确认压力表指针归零，锅内无压力。

按（图1）向左转动手轮数圈，直至转动到顶，使锅盖充分提起，拉起左立柱上的保险销（图2）,

向右推开横梁（图3）移开锅盖。

图1图2图3

5.2通电

接通与本器标牌一致的电源，将控制面板上的电源开关按至处，此时欠压蜂鸣器响（图4）显示本

机锅内无压力（当锅内压力升至约0.03时蜂鸣器自动关闭），控制面板上的低水位灯亮，（图5）,

蒸发锅内属断水状态，显示电源已正常输入本机。

,0N开

•POWER

■电爆

OfF关

上4•♦安

SHAHQHM3HCMNVIOICAlWtHWUMHO

图4图5

5.3加水

开启锅盖后，将纯水或生活用水直接注入蒸发锅内约8升（图6）,同时观察控制面板（图7）上的

水位灯，当加水至低水位灯灭，应继续加水至高水位灯亮时停止加水（每次使用前均需补足上述水

位）。当加水过多发现内胆中有存水时，应开启下排汽阀放去内胆中的多余水量（图8）。

图6图7图8

5.4堆放

将包扎的灭菌物品（体积一般不要超过200X200X100为宜），各包之间留有间隙，依次堆放在灭

菌筐内（图9）,这样有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果。堆放灭菌包时应注意安全阀放汽孔位置

（图10）必须留出空隙，保障其畅通放汽，否则因安全阀汽孔堵塞未能泄压，易造成锅体爆裂事故。

5.5密封

按（图11）把横梁推向左立柱内，横梁必须全部推入立柱槽内（图12）,手动保险销自动下落锁住

横梁。并将手轮向右旋转，使锅盖向下压紧锅体（图13）,加力使之充分密合，致使密封开关处于

接通状态。当联锁灯亮时（图14）,显示容器密封到位。

图11图12

图14

5.6设定温度与时间

操作前请观看控制面板（图15）各部位名称

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1.高温指示灯2.工作加热灯

3.低温指示灯4.阅读工作状态数显窗（红色）

5.温度、时间设定数显窗（绿色）

6.确认键7.增加键

8.移位键9.减少键

10.低水位灯11.缺水灯

12.高水位灯13.电源开关

图15

通电后控制面板（图15）上的数显窗灯亮，上层红色数显是阅读温度、工作显示，下层绿色数显是

设定温度时间的设定数显示，温度有效可调范围50℃〜126℃,当超出范围，将由安全阀控制灭菌

室内的泄压及恒温。时间可调范围0〜99小时（实际有效时间将根据蒸发锅内水位高低而定），时

间运行采用倒计时形式，当灭菌桶内达到所设定的温度，计时器才开始倒计时。

图16图17

②按动增加镀图18）可将温度上调或按动减少键O（图18）可将温度下调。所需

温度调整后续按动二次确认键（图19）进行新设定数据的确认。确认后设定温度

图18图19

5.6.2设定时间操作步骤、

①温度设定完成后，只需再按动一次确认键（图20）,将温度显示切换成时间显示状态。

当观察到绿色设定窗（图21）在闪烁，此时为时间设定显示状态，数显窗前二位为小时，后二

位为分钟。

图20图21

②按动增加键图22）可将时间上调或按动减少键（图22）可将时间下调。

③所需保温时间调整后，须继续按动二次确认键（图23）进行新设定时间的确认。确认后

图22图23

提示：

当设定失败或操作错误，需重新调整数据，只须按动确认键（图24）,选择温度或时间。

当绿色设定窗数据在闪烁，即可重新设定。

移位短（图25）功能只能在设定数显状态对闪烁的数据进行移位，便于快速调整数据。

图24图25

5.7灭菌

①当所需温度、时间设定完毕，本器即进入自动灭菌循环程序，控制面板上的加热灯亮（图26）,

显示灭菌室内正在正常加热升温升压。当锅内压力温度达到约0.03时欠压蜂鸣器停止蜂鸣（图27）,

压力灯亮（图28）。随着不断的升温，当灭菌室内达到所设定温度时，加热灯灭，显示正在保温状

态，同时自动控制系统开始进行灭菌倒计时，并在控制面板上的设定窗内（图29）正在显示出所需

灭菌的时间。

.0H开

POWER

B电薄

OFF关

日|c

S.B-8,8\Lain

督雅温控液13示仪

图26图27

图28H图29

对不同的灭菌物品可参照“灭菌物参考表”的数据进行选择，此表供参考，最终以卫生部《消毒技

术规范》为准。

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各种物品灭菌参照表表一

灭菌物保温时间（分）蒸汽相对温度（℃）相对蒸汽压力（）

橡胶类15〜⑵0.1-0.105

敷料类30-45121〜1260.105-0.142

器皿类15121-1260.105-0.142

器械类10121—1260.105-0.142

溶液类20-40121-1260.105-0.142

对灭菌室上、中、下三点温度一致性要求高的灭菌物品，可在灭菌时将排汽排水总阀向左旋转（图

30）开启少许，让少量的蒸汽不断排出，便可达到灭菌室温度均衡的要求。

④在使用本器时，如果选择常规的灭菌方法而不采用电器自动控制灭菌程序，可在控制面板上的

温度设定为130℃,此时，灭菌锅内的压力温度便由安全阀控制泄压及恒温，并得开始进行人工计

算灭菌所需时间。安全阀出厂设定压力为0.165±0.014o观察图（图31）中箭头所示位置，任何

操作者不得擅自更改安全阀设定参数。在使用中应经常检查安全阀起跳灵活性及可靠性（图32）,

根据《压力容器安全监察规程》的规定，安全阀一般每年至少应校验一次。当压力超出出厂最高设

定数0.165±0.014后应立即停止使用，更换合格的安全阀，否则安全阀不工作，无法泄压导致锅

内压力超标，会造成压力容器暴裂事故。

图31