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文档简介

水产品中河豚毒素的快速检测胶体金免疫层析法本文件规定了水产品中河豚毒素的胶体金免疫层析快速检测方法。本文件适用于河豚鱼、织纹螺、虾等水产品中的河豚毒素成分的快速筛查。2规范性引用文件GB5009.206—2016《食品安全国家标准水产品中河豚毒素的测定》GB/T6682实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1检测线testline即T线，用于判断是否检测到了特定抗原或抗体。3.2质控线controlline即C线，用于验证试剂的有效性。4原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中河豚毒素经提取后与胶体金标记的河豚毒检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控5试剂与材料5.1试剂5.1.1乙酸（CH3COOH）。5.1.2对甲苯磺酸（TsOH）。5.2试剂配制2混合均匀。）：），溶于800mL水中，最后加水定容至1000mL。5.3标准物质表1标准物质信息英文名称CAS登录号分子式相对分子质量河豚毒素Tetrodotoxin4368-28-9C11H17O8N35.4标准溶液配制5.4.2河豚毒素标准中间液（50μg/mL移取河豚毒素标准储备液（5.3.1）500µL置于等应在氢氧化钠溶液(1mol/L)中浸泡1h以上,以使毒素分解。5.5空白试样经参比方法（GB5009.206—2016）检测不含河豚毒素的水产品。5.6材料河豚毒素胶体金免疫层析试剂盒：一般包含胶体金试纸条、金标微孔及6仪器与设备6.1天平：感量为0.1mg和0.01g。6.7胶体金读数仪（可选）7分析步骤7.1试样制备剪刀将鱼体分解成肌肉、肝脏、皮肤和性腺(精巢或卵巢)等部分,各部分组织分别用水洗去并标明标记。7.2试样提取缓冲液（5.2.3），涡旋混合30s，作为待测液。7.3试样测定取100µL样品待测液加入金标微孔中，充分混匀后室温孵育3min，随后将微孔内的所有溶液吸出，加到试纸条的样品垫上，反应5min后观察结果。7.4质量控制7.4.1每批样品应同时进行空白试验和质控试验。7.4.1.1空白试验准确吸取液体或称取固体空白试样，按照7.1、7.2和7.3步骤7.4.1.2质控试验使河豚毒素标准物质浓度为10µg/kg，按照7.1、7.2和7.3步骤与试样同法操作。8性能指标8.1性能指标计算方法按照附录A执行。8.3灵敏度：≥99%。8.4假阴性率：≤1%。8.5假阳性率：≤3%。8.6特异性；≥97%。9结果判定通过对比C线和T线的颜色深浅进行结果判定，目视判定示意图见图1或2。结果判定也可根据产品说明书进行。图1试纸条目视判定示意图图2检测卡目视判定示意图的测定》中第三法液相色谱-荧光检测法进行确证。5方法规定的各项性能指标。快速检测方法性能指标

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