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文档简介
鸟巴氏杆菌病诊断技术实训目标学会巴氏杆菌病的实验室诊断方法主要仪器设备与场地设备材料:巴氏杆菌病被检材料(肝、脾、心血等)、剪刀、组织镊、酒精灯、接种环、载玻片、无菌平皿、记号笔、显微镜、吸水纸、擦镜纸、香柏油、二甲苯、普通肉汤培养基、鲜血(血清)琼脂平板、75%酒精、3%来苏尔、染色液(美蓝、革兰氏、瑞氏)、实验动物(鸽、鸡或小白鼠)。场地:传染病实验室。鸟巴氏杆菌病的临床诊断(1)流行特点:以春初秋末、产卵期间、性成熟期最常见(2)临诊症状:病鸟精神萎顿,废食,闭目缩颈,呼吸急促,口鼻分泌物增加,有时呈泡沫状。冠髯变紫,后期常有剧烈腹泻,排出黄色、灰白色或绿色稀粪。(3)剖检变化:肝肿大、质脆,呈棕色或黄棕色,表面散布有许多灰白色、针尖大小的坏死点。肠道尤其是十二指肠呈卡他性和出血性肠炎鸟巴氏杆菌涂片染色镜检无菌采取病料制作涂片或触片数张,分别进行美兰和瑞氏染色,镜检。多杀性巴氏杆菌呈卵圆形(或球杆状),两极浓染,并可清晰地看出两极之间两侧的连线。血液涂片用瑞氏染色时,细菌被染成蓝色或淡青色,红细胞染成淡红色,红细胞内有紫色的核。鸟巴氏杆菌分离培养将病料分别接种于鲜血琼脂、血清琼脂、普通肉汤于37℃培养24hr。多杀性巴氏杆菌在鲜血琼脂上长出较平坦、半透明的露滴样菌落,不溶血,在血清琼脂中生长旺盛。在普通肉汤中呈均匀混浊,以后便有沉淀,振摇时沉淀物呈瓣状升起。鸟巴氏杆菌生化试验培养物做涂片检查(在由培养基上的培养物所做的涂片中,大部分多杀性巴氏扦菌不表现两极染色特性,而常呈珠杆状或双球状),观察其形态、染色特性、培养特性,同时做生理生化鉴定。本菌48hr内能分解葡萄糖、甘露糖和蔗糖,产酸不产气。靛基质、接触酶和氧化酶均为阴性,M•R试验和V•P试验均为阴性。石蕊牛乳无变化,不液化明胶。鸟巴氏杆菌动物接种试验无菌采取病料,剪碎、研磨、用灭菌生理盐水稀释成1:5~1:10乳剂,接种于鸽、鸡或小鼠的皮下、肌肉或腹腔,剂量为0.2~0.5ML。实验动物如于接种后18~24hr死亡,则采取心血及实质脏器做涂片检查,分离培养,然后再对病死动物尸体进行剖检并观察病理变化。接种局部可见肌肉及皮下组织发生水肿和发炎灶;胸腔和心包有浆液性纤维
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