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文档简介

《蛋鸡无抗生素养殖技术规程》

标准编制说明

湖南省兽药饲料监察所

湖南正大蛋业有限公司

湖南省饲料工业协会

二0二0年四月

目次

1概述.......................................................1

1.1制标的目的与意义.........................................1

L2国内外的研究概况.........................................2

L3研制的基本思路...........................................2

2工作简况...................................................2

2.1任务来源.................................................2

2.2主要工作过程............................................2

3材料与方法.................................................3

3.1试验动物与分组...........................................3

3.2饲养管理................................................3

3.3生产性能................................................4

3.4发病率和死亡率...........................................4

3.5蛋常规品质..............................................4

3.6蛋营养品质测定..........................................4

3.7盲肠微生物群指标检测.....................................6

3.8肠道和血清中抗氧化指标的测定.............................7

3.9组织形态学检测..........................................8

3.10肠道通透性指标检测.......................................8

4结果与分析................................................10

5实验小结..................................................27

6无抗养殖试点..............................................27

7鸡蛋抗生素残留检测........................................28

8总结......................................................28

附件(无抗养殖鸡蛋抗生素检测报告)

《蛋鸡无抗生素养殖技术规范》

标准编制说明

根据湖南省农业农村厅湘农办函(2019)23号文件,2019年湖南省兽药饲

料监察所、湖南正大蛋业有限公司承担地方标准《蛋鸡无抗养殖技术规范》的制

定工作。本标准制定过程中的全部试验工作现已完成,标准起草小组起草了征求

意见稿,现对征求意见稿的编制工作做如下说明:

1概述

1.1标准制定的目的和意义

现代集约化、高密度养殖中,鸡只普遍出现应激与炎症反应、免疫力下降、

对条件致病菌易感等问题。为了减少鸡病发生,养鸡户往往选择给蛋鸡喂食抗生

素。而有些抗生素可通过鸡的代谢进入鸡蛋内,造成鸡蛋的抗生素药物残留。鸡

蛋中抗生素残留主要有以下危害:1.直接危害人的生命安全:部分人群对青霉素、

头抱等抗生素过敏,严重时会发生过敏性休克,甚至危及生命。2.长期摄入微量

的抗生素,会改变机体肠道菌群的正常生态,从而影响免疫系统功能,降低机体

的免疫力。3.细菌耐药性问题:微量的抗生素与细菌长期共存,可使细菌对抗生

素产生耐药性,使疾病治疗变得困难。科学家已经发现耐药菌株很容易在动物与

动物,动物与人之间转移。细菌耐药性的产生,迫使人类不得不对抗生素进行不

断地更新换代。但人类对抗生素更新换代的速度远不及细菌耐药性产生的速度,

最后造成无药可医的困局。如‘'超级细菌”的出现,新闻中屡有报道。由此,农

业农村部已明确发文要求2020年养殖环节全面禁止添加抗生素。

目前,作为抗生素的潜在替代者,微生态制剂和中草药饲料添加剂因其无污

染无残留、无毒副作用,并且能够改善蛋鸡生产性能,防治蛋鸡疫病的作用特点

而在畜牧生产中受到广泛关注。建立蛋鸡无抗养殖技术规范,保证鸡蛋的零残留,

完善禽蛋产业绿色发展,大力推广无抗模式,已刻不容缓。

本标准的制定将为无抗蛋鸡养殖提供具体的技术指南,可指导养鸡户、养鸡

场在全面禁抗的要求下,把蛋鸡养好,为百姓餐桌提供无抗生素残留的优质鸡蛋。

本标准的制定对新法规出台后蛋鸡养殖、鸡蛋生产和食品安全有着重要的现实意

义。

1

1.2国内外的研究概况

蛋鸡饲养技术国家级标准只有2007年的《NY"1338-2007蛋鸡饲养HACCP

管理技术规范》。该标准规定了蛋鸡饲养建立、执行和维持HACCP体系的要求。

农业农村部养殖环节全面禁用抗生素的要求是2019年提出的,所以此标准中没

有无抗饲养的要求及实施内容。

2工作简况

2.1任务来源

本标准由湖南省畜牧水产事务中心推荐,由湖南省兽药饲料监察所和湖南正

大蛋业有限公司、湖南省饲料工业协会共同制定。

2.2主要工作过程

湖南省兽药饲料监察所拥有一批专业从事兽药、饲料和畜禽产品安全分析检

测和研究人员28人,其中正高职称3人,副高职称8人,中级技术人才4人,初级

职称5人,博士3人、硕士7人,整个队伍的年龄和知识结构合理,多年来多次

参加由中监所、国家饲料中心、畜产品中心等组织的畜产品中兽药残留比对试验,

在猪肉中磺胺和恩诺沙星/环丙沙星、猪肉中甲磺酸达氟沙星、猪尿和猪肝中克

伦特罗、猪尿中B受体激动剂、鸡肌组织中恶喳酸和氟甲口奎残留和乳品中三聚氟

胺等能力验证考核中均取得了优良成绩,形成了一支训练有素、工作协调、学风

良好、严谨敬业的科研团队,有雄厚的人力资源保证制标研究的顺利实施和完成。

项目单位曾多次承担国家、省药物残留检测项目和地方标准的而制定,并取得了

一定的成果;其中受体激动剂多残留检测技术研究与应用”获得湖南省科

技进步三等奖,具有开展残留检测研制技术基础。为本次地方标准的制定打下了

良好的基础。

为了保证项目较好地按时完成标准的制定,我所非常重视,成立标准编制

小组,组成技术攻关小组,查询相关技术资料和文献,咨询相关领域专家,进

行技术学习和培训I。单位的主管领导负责对本标准制定的组织协调和安排工作,

保证本课题人员投入、所需的试剂仪器投入和所需的资金投入,定期召开标准

编制小组会议,及时总结试验结果。

实验研究以蛋鸡作为试验对象,通过微生态制剂单独或微生态制剂和中草药

2

复方散剂复合使用,研究微生态制剂和中草药复方散剂对蛋鸡生产性能、蛋品质、

发病率和死亡率的影响以及微生态制剂和中草药复方散剂对蛋鸡肠道菌群,肠道

结构和功能的影响,为微生态制剂、中草药复方散剂在蛋鸡生产中的利用提供理

论依据。本课题组结合国内外蛋鸡无抗饲养的先进技术与经验,同时充分吸收正

大集团宝贵的无抗蛋鸡养殖实践经验,以此科学、有序的开展蛋鸡无抗养殖试验,

通过微生态制剂单独或微生态制剂和中草药复方散剂复合使用,研究微生态制剂

和中草药复方散剂对蛋鸡生产性能、蛋品质、发病率和死亡率的影响以及微生态

制剂和中草药复方散剂对蛋鸡肠道菌群,肠道结构和功能的影响,为微生态制剂、

中草药复方散剂在蛋鸡生产中的利用提供理论依据。将蛋鸡无抗饲养的各项关键

点具体化、标准化,从而制定无抗生素蛋鸡养殖技术规程。

3材料与方法

3.1试验动物与分组

选择180日龄,体重、健康状况一致的罗曼粉蛋鸡7920只,随机分置与两

栋不同鸡舍内(三层四列蛋鸡笼饲养),分为三组(每组分置2列蛋鸡笼),每组

12个重复(即每层含2个重复单元),每个重复220只蛋鸡。不同鸡舍内温度,

湿度和光照条件一致,蛋鸡自由采食和饮水,整个饲养周期为7周,前2周14

天为预试期,观察、调整产蛋率使各组和重复之间相近,然后开始正式试验。后

5周共35天为正试期,试验具体分组和日粮见(表1)。

表1.试验蛋鸡分组与日粮处理

试验分组日粮处理

对照组饲喂基础日粮

处理1组饲喂基础日粮+微生态制剂

处理2组饲喂基础日粮+微生态制剂+中草药复方散剂

注:微生态制剂添加量500mg/kg。

3.2饲养管理

观察记录每日温度、湿度,试验蛋鸡精神、食欲、活动、健康和粪便状况等。

做好鸡群发病和死亡情况的记录。每天记录不同重复蛋鸡采食量,观察记录不同

重复产蛋数、蛋重、耗料量、软破蛋数。

3

3.3生产性能

试验期间以重复为单位,记录和统计各组的采食量,产蛋率、蛋重、料蛋比、

软破蛋率、发病率和死亡率。日采食量:记录每重复每天饲料实际消耗量,计算

平均日采食量。产蛋率:每天相同时间(16:00)对每组各重复的产蛋数进行记

录,计算当天每重复的产蛋率和各组日产蛋率均值。日产蛋率=日产蛋数/蛋鸡数

量X100%。破软壳率:每天相同时间(16:00)对每组中各重复的破软壳蛋数目

进行记录,计算当天每重复的破软壳率。破软壳率=破软壳数/日产蛋数。料蛋比

(饲料转化率):根据日采食量和日平均蛋重计算其比值。

3.4发病率和死亡率

发病率(%尸发病只数/总只数xlOO%;死亡率(%)=死亡只数/总只数X100%。

3.5蛋常规品质

试验期第28d时,各组均随机收集蛋72枚(即1个重复6枚),检测蛋品

质。蛋重:分析天平准确测定每枚鸡蛋的重量,精确至0.0001g。蛋形指数:使

用蛋形指数测定仪测定每枚鸡蛋横径与纵径,计算其蛋形指数。蛋形指数=横径/

纵径xlOO%。蛋壳强度:将完整的鸡蛋置于蛋壳强度测定仪上,选择相应程序进

行测定。哈氏单位:使用蛋白高度测定仪测量蛋黄边缘与浓蛋白边缘之中点,测

量3个点的蛋白高度,求其平均值并计算哈氏单位。蛋黄颜色:将鸡蛋打碎,用

蛋黄分离器将蛋黄与蛋清分离,使用罗氏比色扇在荧光灯下比色。蛋壳厚度:使

用蛋壳厚度计测定蛋的锐端、钝端和中部3部分的蛋壳厚度,取其平均值作为蛋

壳厚度。蛋黄相对重:使用蛋黄分离器将蛋清和蛋黄完全分离,称量蛋黄重量,

计算蛋黄相对重。蛋黄相对重=蛋黄重/全蛋重X100%。蛋壳相对重:将鸡蛋打碎,

去除蛋黄和蛋清以及蛋壳内表层的壳膜,将全部蛋壳放置已知重量的开盖培养皿

中,于45。(2恒温干燥箱过夜,至恒重后称重,计算蛋壳相对重。蛋壳相对重=

蛋壳重/全蛋重X100%。

3.6蛋营养品质测定

4

蛋清、蛋白中水分:使用蛋黄分离器将蛋黄与蛋清分离,分别于已知重量的

开盖培养皿中称重,搅拌均匀后放入45土2。(2恒温干燥箱,48h后取出称重,

计算其含水量。

蛋清、蛋黄中粗蛋白:采用二价铜催化消煮-硼酸吸收法于凯氏定氮仪上测

定粗蛋白含量。准确称取前期制备的蛋黄粉或蛋清粉0.2g(精确至0.0001g),

无损失地移入消化管中,加入硫酸铜0.2g,硫酸钠3g,与试样混合均匀后加入

浓硫酸10mL,于消化炉中加热消化至澄清。待消化完毕的溶液冷却后,使用凯

氏定氮仪测定样品蛋白含量。

蛋黄粗脂肪:采用索氏抽提法测定蛋黄粗脂肪含量。准确称取试验前期制备

的蛋黄粉1g(精确至0.0001g),滤纸包好,铅笔标号。将包好的待测样置于

105±2。(2烘箱烘6h,取出置干燥器中冷却30min,称重,直至两次称重之差小

于0.001g为恒重。将恒重的滤纸包放入索氏提取器的提脂腔中,加入乙醛,装

好装置,在60-75℃水浴加热,使乙醛回流,控制乙醛回流次数(每小时约10

次),共回流约50-70次。浸提后,取出滤纸包放室温通风橱中使乙醛挥发,然

后置于105±2。(2烘箱中烘6h,取出置于干燥器中冷却30min,称重,再烘干1h

后,冷却称重,直至恒重。粗脂肪(%)=(W1-W2)/WxlOO,其中:W1(g)

=试样+滤纸重;W2(g)=浸提后试样+滤纸重;W(g)=试样重。

蛋黄胆固醇:准确称取试验前期制备的蛋黄粉1g(准确至0.0001g),无损

失的移入研钵中。用甲醇-氯仿混合液充分研磨至无明显颗粒为止,将其过滤至

10mL具塞刻度试管中,并使用甲醇-氯仿混合液补充稀释至10mL刻度处,混

匀,密封后,于4。(2过夜冷藏。取试管中上清液,用胆固醇试剂盒(胆固醇酯酶

-胆固醇氧化酶-过氧化物酶法)于紫外可见光光度计测定蛋黄胆固醇含量。样品

中胆固醇(mmol/L)=(样品管吸光度/标准管吸光度)x标准品浓度。

蛋黄中粗灰分:将用烟和盖一起放入高温炉,在(550+20)℃下灼烧30min

取出,在空气中冷却约1min,放在干燥器中冷却30min,称重。再重复灼烧,

冷却、称重,直至2次质量之差小于0.0005g为恒重。在已知质量的组烟中称取

2-5g试样(灰分质量应在0.05g以上),在电炉上低温炭化至无烟为止。炭化后

将用烟移入高温炉中,于(550±20)℃下灼烧3ho取出,在空气中冷却约Imin,

放入干燥器中冷却30min,称重。再同样灼烧lh,冷却、称重,直至2次质量

5

之差小于0.001go测定结果的计算:灰分=(灰化后珀期加灰分质量-恒重空塔

期重量)/(珀烟加试样质量-恒重空珀烟质量)。

蛋黄中钙含量测定称取试样2-5g于珀期中,准确至0.0002g,在电炉上低

温小心炭化至无烟为止。再将其放入高温炉于(550+20)°C下灼烧3h。在盛有

灰分的堵烟中加入盐酸溶液10ml和浓硫酸数滴,小心煮沸。将此溶液转入100ml

容量瓶中,并以热水洗涤珀烟及漏斗中滤纸,冷却至室温后,定容,摇匀,为试

样分解液。用移液管准确吸取样品液l-20ml于烧杯中,加水100ml,甲基红指

示剂2滴,滴加氨水溶液至溶液由红变橙黄色,再滴加盐酸溶液至溶液又呈红色

为止。小心煮沸,慢慢滴加草酸核溶液溶液10ml,且不断搅拌。若溶液由红变

橙色,应补加盐酸溶液至红色,煮沸数分钟后,放置过夜使沉淀陈化(或在水浴

上加热2h)。沉淀洗涤:用定量滤纸过滤上述沉淀溶液,用氨水溶液洗沉淀6-8

次,至无草酸根为止(用试管接取滤液2-3ml,加硫酸溶液数滴,加热至80℃,

加高锌酸钾1滴,溶液呈微红色,且30s不褪色)。将沉淀和滤纸转移入原烧杯

中,加硫酸溶液10mL加水50ml,加热至75-85C,立即用0.05mol/L高镒酸

钾滴定溶液滴定至微红色且30秒不褪色为止。测定结果计算:Ca=(试样滴定

消耗高铳酸钾体积-空白滴定消耗高铳酸钾体积)x高镐酸钾浓度xO.02/试样质量x

(灰化后溶解液定容体积/测定钙试样移取量)。

蛋黄中总磷的测定(铜黄比色法):称取试样2-5g于珀烟中,在电炉上炭化

至无烟为止,再放入高温炉于(550+20)C下灼烧3h(或测灰分后继续进行),

取出冷却,在珀期中加入10ml盐酸溶液和浓硝酸数滴,小心煮沸约10min。将

此溶液转入100ml容量瓶中,并用热水洗涤珀烟及漏斗中的滤纸,冷却至室温

后,定容,摇匀,为试样分解液。准确移取试样分解液170ml(含磷量50-750

ug)于100ml容量中,加入钮铝酸镂显色剂10mL用水稀释至刻度,摇匀,放

置lOmin。以0为参比,用全自动酶标仪,在400nm波长下测得试样分解液的

吸光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量。

3.7盲肠微生物群指标检测

取适量样品于离心管A向其中加入2mLpBS溶液涡旋、摇匀,置于离心机

内800rpm/min,离心4min。取离心后的上清液于新的离心管B中。用PBS溶

6

液洗涤离心后的沉淀,涡旋、摇匀,置于离心机内800rpm/min,离心4min。取

离心后的上清液于新的离心管B中。将离心管B置于离心机内800rpm/min,离

心4min。取离心管B中上清液于新的离心管C中。将离心管A中沉淀用PBS

溶液洗涤,涡旋,置于离心机内800rpm/min,离心4min,取上清液于离心管B

中,重复此步骤1次。将离心管B中的上清液置于离心机内800rpm/min,离心

4min。将离心后的上清液取出置于离心管C中,将离心管C置于离心机内7000

g(离心力,下同),离心10min。弃上清液,用PBS冲洗沉淀,继续7000rpm/min,

离心10min,此过程重复直至上清液清亮为止。向离心后的沉淀中加入2mL裂

解液2mL溶菌酶,涡旋,置于37℃摇床,3h。再向离心管中加入2mL的10%SDS

溶液,置于37℃摇床,30mine取出离心管后,向其中加入2mL饱和酚,涡旋,

离心7000rpm/min,lOmin,转离心后的上清液于新的离心管D中,弃沉淀。将

上清液转到新的离心管E中,弃沉淀。向离心管E中上清液加入等体积酚、氯

仿/异戊醇(24:1)混匀,离心11000g,15min,转上清液于新的离心管F中,

弃沉淀。将上清液转到新的离心管G中,弃沉淀。向G中上清液加入等体积氯

仿(异戊醇),混匀,离心11000g,15min。取离心后的上清液于新的离心管H

中,并加入等体积异丙醇,混匀,-20℃过夜沉淀。取出离心管H,12000g,离

心15min。弃上清,沉淀用75%乙醇洗涤,12000g,离心10min,重复此步骤

1次。将洗涤好的沉淀放入37℃烘箱中干燥,或者自然晾干。往干燥的沉淀中加

入50uL双蒸水,离心11000g,10min,取上清液于EP管中。所得上清采用

DNA纯化试剂盒进行纯化。纯化后的样品至于-20C保存。以细菌总数作为内参,

检测各组盲肠中乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌的表达量。

3.8肠道和血清中抗氧化指标的测定

取回肠和盲肠组织,用4℃生理盐水洗净,冰浴条件下匀浆,分别制成10%

的匀浆液,随后于4000r/min,4℃离心机中离心15min,去沉淀,取上清。根据

BCA试剂盒(碧云天)的使用方法,测定蛋白浓度,-80C冰箱保存备用。检测

血浆和肠道组织肝匀浆中的ROS水平,T-SOD、GSH-Px的活性和MDA的含量。

ROS采用Elisa法。T-SOD、GSH-Px和MDA采用南京建成生物工程研究所相关试

剂盒测定,具体操作步骤按照相关试剂盒说明书进行。

7

3.9组织形态学检测

组织横切样品投入预先配好的10%福尔马林固定液中使组织、细胞的蛋白

质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结

构。用低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置

于透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块中的酒精。将已透明的组织块置

于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋:先准

备好包埋框,倒入已溶化的石蜡,迅速夹取已浸透石蜡的组织块放入其中,冷却

凝固成块即成。将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片,一般为5nm左右

厚。切下的薄片往往皱折,要放到加热的水中(45-50°C)烫平再贴到载玻片上,

然后放在烤片机上烘干。切片用二甲苯脱蜡,经不同浓度的乙醇至水洗:二甲苯

(I)5-10min一二甲苯(II)5-10min-95%乙醇5min-80%乙醇5min-75%

乙醇5min-蒸储水洗Imin。苏木精染色5-10min一流水稍洗去苏木精液1

min-1%盐酸乙醇洗1-3s-稍水洗10-30s-1%氨水返蓝10-30s一流水冲洗

10-15min一伊红液染色1-3min一蒸储水稍洗1-2s一80%乙醇稍洗1-2s—95%

乙醇(I)3-5min-95%乙醇(II)3-5min一无水乙醇(I)5-10min一无水乙

醇(II)5-10min一二甲苯(I)3-5min—>二甲苯(II)3-5min一二甲苯(III)

3-5min-中性树胶封固。利用尼康E-CLIPSE80i型高级研究用正置生物数码摄

影显微镜在低倍镜下观测切片,每个样本三张切片,每张切片选取三个典型视野,

利用尼康NIS-Elements图像处理软件测定。

3.10肠道通透性指标检测

使用ELISA试剂盒测定血浆中内毒素和二胺氧化酶的水平,具体步骤按试

剂盒说明进行操作。

3.11统计方法

应用SAS9.1.3系统,采用One-wayANOVA程序进行中单因素方差分析,

结果表示为平均值土标准误。差异显著时以Duncan氏方法对各组间生产性能和

蛋品质平均数进行多重比较,鸡蛋破损率和蛋鸡死亡率用卡方检验进行显著性分

析,以P<0.01(差异极显著),P<0.05(差异显著)作为显著性判断标准。

8

4结果与分析

4.1试验期蛋鸡鸡舍温度

如表2所示,在整个试验期内,蛋鸡均处于高温的环境下。

表2.试验期鸡舍温度表

鸡舍温度(℃)上午中午晚上

第1周303028

第2周313329

第3周313329

第4周283127

第5周283125

注:上午(9:30);下午(3:30);晚上(7:30),第二周之前温度,因温度计问题缺失

4.2不同处理对蛋鸡采食量的影响

不同处理对蛋鸡采食量的影响,如表3-1所示,复合组和对照组相比,在第

1周、第3周和第4周具有提高蛋鸡采食量的趋势(pWO.l),并在第5周能极显

著提高蛋鸡采食量(p<0.01)o在试验期内,复合组和照组相比,能够显著提高

蛋鸡采食量(p<0.05),而酪酸菌组对蛋鸡采食量没有影响(p>0.05)o

表3-1.不同处理对蛋鸡采食量的影响

采食量(g)对照组酪酸菌组复合组SEM〃值

重复数121212

第1周102.6b102.9b104.7a0.300.06

第2周101.2101.4103.60.480.33

第3周99.lb100.5ab102.6a0.500.10

第4周101.9b102.4ab104.4a0.390.10

第5周104.5B104.1B106.5A0.260.01

试验期101.9b102.2ab104.3a0.360.05

注:0.1表示有趋势,0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

不同处理对蛋鸡采食量的影响,如表3-2所示。复合组与对照组相比,在第1

周、第3周和第4周具有提高蛋鸡采食量的趋势(pWO.l)。与对照组和中草药

9

组相比,复合组在第5周能极显著提高蛋鸡采食量(/?<0.01)o在试验期内,复

合组与对照组相比具有提高蛋鸡采食量的趋势(pWO.l)。

表3-2.不同处理对蛋鸡采食量的影响

采食量(g)对照组中药散剂组复合组SEMp值

重复数121212

第1周102.6b103.4ab104.7a0.3770.07

第2周101.2101.9103.60.5920.27

第3周99.lb100.6ab102.6a0.6310.09

第4周101.9102.4104.40.5000.12

第5周104.5B104.5B106.5A0.315<0.01

试验期101.9b102.6ab104.3a0.4530.08

注:p<0.1表示有趋势,p<0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

4.3不同处理对蛋鸡蛋重的影响

不同处理对蛋鸡蛋重的影响,如表4-1所示,与对照组相比,复合组和酪酸

菌组在第1周能显著增加蛋鸡蛋重(p<0.05)。同时复合组在第4周、第5周和

整个试验周期内,能显著提高蛋重(p<0.05)o而酪酸菌和对照组相比,在试验

期内对蛋鸡蛋重没有影响(p>0.05)。

表4-1.不同处理对蛋鸡蛋重的影响

蛋重(g)对照组酪酸菌组复合组SEMp值

重复数121212

第1周53.9(?55.05a55.26a0.200.01

第2周54.2454.4955.230.200.17

第3周54.2054.4055.230.210.19

第4周53.72b54.27ab55.37a0.230.03

第5周54.55b55.0lab56.04a0.210.02

试验期54.09b54.65ab55.43a0.200.03

注:p<0.1表示有趋势,〃<0。5表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

不同处理对蛋鸡蛋重的影响,如表4-2所示,复合组与对照组相比,在第1

10

周和第4周具有提高蛋蛋重的趋势(p^O.l)o在第5周,与对照组相比,复合

组和中药组能显著提高蛋重(p<0.05)o在试验周期内,同对照组相比,复合组

蛋鸡具有提高蛋鸡蛋重的趋势(pWO.l)。

表4-2.不同处理对蛋鸡蛋重的影响

蛋重(g)对照组中药散剂组复合组SEMp值

重复数121212

第1周53.90b54.22ab55.26a0.2300.07

第2周54.2454.5355.230.2280.27

第3周54.2054.3855.230.2450.27

第4周53.72b54.24ab55.37a0.2650.06

第5周54.55b54.75b56.04a0.2350.03

试验期54。旷54.42ab55.43a0.2270.07

注:p<0.1表示有趋势,p<0.05表示差异显著,0.01表示差异极显著

4.4不同处理对蛋鸡料蛋比的影响

不同处理对蛋鸡料蛋比的影响,如表5-1所示,与对照组和复合组相比,酪

酸菌组在第1周能极显著降低蛋鸡料蛋比(p<0.01)o在第2周,酪酸菌组与复

合组相比,具有降低料蛋比的趋势(^<0.1)<,在整个试验期内,与对照组和复合

组相比,酪酸菌组能显著降低蛋鸡料蛋比(p<0.05)。

表5-1.不同处理对蛋鸡料蛋比的影响

料蛋比对照组酪酸菌组复合组SEMp值

重复数121212

第1周1.90A1.88B1.91A0.010.01

第2周1.87ab1.85b1.88a0.010.05

第3周1.861.841.870.010.22

第4周1.891.891.900.010.36

第5周1.911.901.920.010.34

试验期1.89a1.87b1.90a0.0040.02

注:p<0A表示有趋势,p<0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

11

不同处理对蛋鸡料蛋比的影响,如表5-2所示,不同处理间蛋鸡料蛋比没有

差异(〃>0.05)。

表5-2.不同处理对蛋鸡料蛋比的影响

料蛋比对照组中药散剂组复合组SEMP值

重复数121212

第1周1.901.911.910.0050.80

第2周1.871.871.880.0070.76

第3周1.861.851.870.0050.47

第4周1.891.891.900.0050.36

第5周1.911.911.920.0060.75

试验期1.891.881.900.0040.45

注:0.1表示有趋势,0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

4.5不同处理对蛋鸡产蛋数的影响

不同处理对蛋鸡产蛋数的影响,如表6-1所示,不同处理对蛋鸡的产蛋数没

有影响(p>0.05)o

表6-1.不同处理对蛋鸡产蛋数的影响

产蛋数(个)对照组酪酸菌组复合组SEM〃值

重复数121212

第1周2182212170.560.22

第2周2182202170.540.33

第3周2172192160.580.30

第4周2152172150.580.73

第5周2162182150.600.34

试验期2172192160.520.21

注:p<0.1表示有趋势,0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

不同处理对蛋鸡产蛋数的影响,如表6-2所示,不同处理对蛋鸡的产蛋数没

有影响(p>0.05)o

表6-2.不同处理对蛋鸡产蛋数的影响

12

产蛋数(个)对照组中药散剂组复合组SEMp值

重复数121212

第1周2182182170.560.22

第2周2182182170.540.33

第3周2172172160.580.30

第4周2152162150.580.73

第5周2162152150.600.34

试验期2172172160.520.21

注:p<0.1表示有趋势,p<0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

4.6不同处理对蛋鸡产蛋率的影响

不同处理对蛋鸡产蛋率的影响,如表7-1所示,不同处理对蛋鸡的产蛋率没

有影响(p>0.05)。

表7-1.不同处理对蛋鸡产蛋率的影响

产蛋率(%)对照组酪酸菌组复合组SEMP值

重复数121212

第1周96.2797.0396.540.190.25

第2周96.9296.7396.910.190.91

第3周96.6196.6596.510.200.96

第4周96.0096.0096.670.240.43

第5周96.2596.3696.700.210.68

试验期96.4196.5596.670.170.83

注:〃<0.1表示有趋势,pv0.05表示差异显著,pv0.01表示差异极显著

不同处理对蛋鸡产蛋率的影响,如表7-2所示,不同处理对蛋鸡的产蛋率没

有影响(/?>0.05)o

表7-2.不同处理对蛋鸡产蛋率的影响

产蛋率(%)对照组中药散剂组复合组SEMP值

重复数121212

第1周96.2796.3496.540.2030.86

13

第2周96.9296.9896.910.1830.98

第3周96.6196.7896.510.2010.87

第4周96.0096.2196.670.2310.50

第5周96.2596.0396.700.2080.43

试验期96.4196.4796.670.1590.79

注:p<0.1表示有趋势,0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

4.7不同处理对蛋鸡鸡蛋破损率的影响

不同处理对蛋鸡产蛋率的影响,如表8-1所示,与对照组和复合组相比,酪

酸菌组在整个试验期内能显著降低蛋鸡鸡蛋破损率(p<0.05)。

表8-1.不同处理对蛋鸡鸡蛋破损率的影响

鸡蛋破损率(%)对照组酪酸菌组复合组

重复数121212

第1周0.250.140.24

第2周0.160.140.20

第3周0.150.140.22

第4周0.150.180.16

第5周0.200.130.10

试验期0.18a0.15b0.18a

不同处理对蛋鸡产蛋率的影响,如表8-2所示,与对照组和复合组相比,中

草药组在整个试验期内能显著降低蛋鸡鸡蛋破损率(/?<0.05)o中草药组单独添

加相较对照组和复合组能分别降低25.6%和24.7%的破壳蛋数。

表8-2.不同处理对蛋鸡鸡蛋破损率的影响

鸡蛋破损率(%)对照组中药散剂组复合组

重复数121212

第1周0.250.180.24

第2周0.160.110.20

第3周0.150.150.22

第4周0.150.140.16

14

第5周0.200.110.10

试验期0.18a0.14b0.18a

4.8不同处理对蛋鸡死亡率的影响

不同处理对蛋鸡产蛋率的影响,如表9-1所示,不同处理对蛋鸡的死亡率没

有影响(p>0.05)。

表9-1.不同处理对蛋鸡死亡率的影响

死亡率(%)对照组酪酸菌组复合组

重复数121212

第1周0.110.150.19

第2周0.300.110.22

第3周0.190.410.26

第4周0.150.260.30

第5周0.190.110.22

试验期0.190.210.24

注:0.1表示有趋势,0.05表示差异显著,p<0.01表示差异极显著

不同处理对蛋鸡产蛋率的影响,如表9-2所示,不同处理对蛋鸡的死亡率没

有影响(T?>0.05)O

表9-2.不同处理对蛋鸡死亡率的影响

死亡率(%)对照组酪酸菌组中药散剂组复合组

重复数12121212

第1周0.110.150.220.19

第2周0.300.110.220.22

第3周0.190.410.260.26

第4周0.150.260.220.30

第5周0.190.110.190.22

试验期0.190.210.220.24

4.9不同处理对蛋鸡鸡输卵管的组织形态的影响

15

各试验组蛋鸡输卵管各部的组织学检查结果表明,伞部、膨大部、峡部、子

宫部和阴道部的组织形态无明显差异(图1-5)。

图1各组输卵管伞组织学变化(HE,4x)

注:(A)对照组,粘膜深入散的脊,漏斗走向颈部时脊的高度增加,上皮为柱状杆状上皮。

肌层由分散的平滑肌束组成。漏斗表面覆盖有绒毛膜。高的初级粘膜褶伴有次级褶和三级褶;

(B)微生态制剂组;(C)复合组

图2各组输卵管膨大部组织学变化(HE,4x)

注:(A)对照组,由于在膨大部有很多管状腺,相对于漏斗部,其初级粘膜褶高而宽;(B)

微生态制剂组;(C)复合组

图3各组输卵管峡部组织学变化(HE,4x)

注:(A)对照组,与膨大部相比,峡部的初级褶窄,外形上有菱角;(B)微生态制剂组;

(C)复合组

16

图4各组输卵管子宫部组织学变化(HE,4x)

注:(A)对照组,子宫褶不如膨大部宽,腺组织少;(B)微生态制剂组;(C)复合组

图5各组输卵管阴道部组织学变化(HE,4x)

注:(A)对照组,阴道粘膜以长的、纤细的初级褶伴有很多小的次级褶为特征。肌层高度

发达;(B)微生态制剂组;(C)复合组

4.10不同处理对蛋鸡养殖经济效益影响

不同处理对蛋鸡养殖经济效益影响,如表10-1所示,同对照组相比,酪酸

菌组和复合组每只蛋鸡分别提高利润0.036元和0.074元。

表10-1.不同处理对蛋鸡养殖经济效益影响

项目对照组酪酸菌组复合组

蛋鸡数(只)268827062665

总耗饲料(吨)9.5879.6799.729

饲料成本(元)201322032720430

添加剂成本(元)0290292

蛋总量(kg)4929.765026.715028.61

鸡蛋总收益(元)335223418234195

破蛋数损失(元)625063

销售总收益(元)133281351513410

每只鸡利润(元)4.9584.9945.032

17

每只鸡利润提高率(元)0.000.0360.074

注:饲料价格2100元/吨,鸡蛋价格6.8元/kg,添加剂价格60元/kg(XXXX生物公司)

不同处理对蛋鸡养殖经济效益影响,如表10-2所示,同对照组相比,复合

组每只蛋鸡分别提高利润0.074元。单独添加中药散剂,每只蛋鸡利润下降0.058

元。

表102不同处理对蛋鸡养殖经济效益影响

项目对照组中药散剂组复合组

蛋鸡数(只)268826842665

总耗饲料(吨)9.5879.6389.729

饲料成本(元)201322024020430

添加剂成本(元)0289292

蛋总量(kg)4929.764959.845028.61

鸡蛋总收益(元)335223372734195

破蛋数损失(元)624663

销售总收益(元)133281315113410

每只鸡利润(元)4.9584.9005.032

每只鸡利润提高(元)0.00-0.0580.074

注:饲料价格2100元/吨,鸡蛋价格6.8元/kg,添加剂价格60元/kg(XXXX生物公司)

4.11不同处理对蛋鸡常规品质的影响

不同处理对蛋鸡采食量的影响,如表11-1所示,与对照组相比,酪酸菌组

和复合组能够极显著提高蛋黄颜色(p<0.01)o与对照组和复合组相比,酪酸菌

组能显著改善鸡蛋蛋形指数(p<0.05)o不同处理对蛋壳强度、蛋白高度、哈氏

单位和蛋黄比率等指标没有影响(p>0.05)。

表11-1.不同处理对蛋常规品质的影响

项目对照组酪酸菌组复合组SEMp值

蛋壳强度(kg)4.504.624.560.0690.78

蛋白高度(mm)5.965.986.080.1080.89

蛋黄颜色6.56b6.77a6.83a0.0400.02

18

哈氏单位75.8877.3477.540.7940.66

蛋黄比例(%)30.8829.9830.350.1910.17

蛋形指数1.309b1.322a1.309b0.0030.05

注:每组12个重复,每个重复6个鸡蛋作为检测平行,p<0.1表示有趋势,p<0.05表示差

异显著,p<0.01表示差异极显著

不同处理对蛋鸡采食量的影响,如表11-2所示,与对照组和中药组相比,复

合组能够极显著提高蛋黄颜色(p<0.01)o而不同处理对蛋壳强度、蛋白高度、

哈氏单位、蛋黄比率和蛋形指数等指标没有影响(p>0.05)o

表11-2.不同处理对蛋常规品质的影响

项目对照组中药散剂组复合组SEMp值

蛋壳强度(kg)4.504.464.560.0630.79

蛋白高度(mm)5.966.136.080.1080.81

蛋黄颜色6.56B6.49B6.83A0.042<0.01

哈氏单位75.8878.0477.540.8020.52

蛋黄比例(%)30.8829.9430.

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