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文档简介
ICS65.020.20
B31
DB32/T××××
DB32
江苏省地方标准
DB32/T3652-2019
铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程
Technicalregulationofthecultivationfortenderstemsof
Dendrobiumofficinaleinsubmergedculture
2019-09-19发布2019-10-31实施
江苏省市场监督管理局发布
1
DB32/T3652—2019
铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程
1范围
本标准规定了铁皮石斛嫩茎液体培育的术语和定义、生产条件、种源培育、培育生产、规模化生
产、日常管理、采收、质量等划分和包装、运输及贮存。
本标准适用于铁皮石斛嫩茎液体培育。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期引用文件,仅所注日期版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有修改单)适用于本文件。
GB5749生活饮用水卫生标准
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
铁皮石斛嫩茎液体培育(ThecultivationfortenderstemsofDendrobiumofficinalein
submergedculture)
从铁皮石斛中分离植物愈伤组织,经诱导分化及驯化筛选,利用离体培养生物技术扩增培育的无
农药残留、重金属含量较低、高醇浸出物含量铁皮石斛幼嫩茎的培育技术。
4生产条件
室内环境为十万级以上洁净度的洁净间。保持室温25oC~28oC。均匀柔和人工光,增补4:1红蓝
光,光照强度为2000Lux,光暗周期8h:16h。空气相对湿度40%~70%。生产环境、生产用水和过滤水
应分别符合GB5749和GB/T6682的规定。
5种源培育与增殖
5.1培养基配制
采用MS培养基+0.5mg/LNAA+0.5mg/LKT+20g/L葡萄糖+10g/L琼脂固体培养基进行种源细胞固
体培养。采用MS培养基+0.5mg/LNAA+0.5mg/LKT+20g/L葡萄糖培养液进行种源细胞液体培养。
5.2种源细胞增殖
3
DB32/T3652—2019
将成熟铁皮石斛茎段插入固体培养基中培养,获得愈伤组织细胞。在相同固体培养基条件下增殖
种源细胞。
5.3种源细胞培育
按照鲜重20g/L~30g/L接种量,采用无菌操作,将种源细胞转接至2L~5L玻璃瓶中进行液体培养。
培养过程中向培养液中通入无菌空气,空气流速为0.75L/min~1L/min,培养周期为30d~45d。
6培育生产
6.1培养基配制
采用MS培养基+0.5mg/LNAA+1mg/LKT+20g/L葡萄糖+5%麦芽糖培养基进行培养。
6.2培育操作
按40g/L~50g/L接种量,将种源细胞转接至10L玻璃瓶中。在培养过程中,将无菌空气通入培养
瓶中,空气流速为0.75L/min~1L/min,培养周期为30d~45d。待嫩茎生长总体积至培养瓶总体积的2/3
时,采收或留做下一阶段种源。
7规模化生产
按40g/L~50g/L接种量,将采收的种源细胞转接至50L~100L生物反应器中培养生产,其它按本
标准第6章的规定执行。
8日常管理
一旦发现细菌或真菌的污染,立即将污染品移出培育生产间并进行湿热高温灭菌。
9采收
采收时剔除褐化植株,用过滤水缓慢冲洗嫩茎3min~5min,300rpm/min脱水离心3min,甩脱浮水
后可直接制备成铁皮石斛嫩茎鲜品,或65℃烘干制备为干品。
10质量等级划分
铁皮石斛嫩茎质量等级划分要求见表1。
表1铁皮石斛嫩茎质量等级划分要求
等级要求
特一级足干,形态规则,长度大于6mm,嫩茎分枝簇状均一排列,翠绿色。
特级足干,形态基本规则,长度在3~6mm,嫩茎偶见小嫩叶,黄绿或翠绿色。
4
DB32/T3652—2019
一级足干,形态相似,长度在1~3mm,嫩茎混有嫩叶,黄绿或翠绿色。
工业级足干,形态相似,长度小于1mm,嫩茎混有嫩叶,黄绿或翠绿色。
11包装、运输、储存
11.1包装
分级后分别密封包装,包装上应标注品名、规格、产地、生产批号、合格标志。
11.2运输
运输工具应清洁、卫生,无毒、无污染。运输时应防潮、防暴晒、防污染。
11.3贮存
贮存于阴凉、通风、清洁、干燥室内,不得与有毒、有害和有异味的物品同仓存放。
5
DB32/T3652—2019
前言
本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分:标准的结构与编写规则》给出的规则编写。
本标准由江苏省农业科学院提出并归口。
本标准起草单位:苏州天成新农生物科技有限公司,江苏省农业科学院。
本标准起草人:张杰、周燕群、关剑、余向阳、杜平、王昕怡、吴红升。
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DB32/T3652—2019
铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程
1范围
本标准规定了铁皮石斛嫩茎液体培育的术语和定义、生产条件、种源培育、培育生产、规模化生
产、日常管理、采收、质量等划分和包装、运输及贮存。
本标准适用于铁皮石斛嫩茎液体培育。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期引用文件,仅所注日期版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有修改单)适用于本文件。
GB5749生活饮用水卫生标准
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
铁皮石斛嫩茎液体培育(ThecultivationfortenderstemsofDendrobiumofficinalein
submergedculture)
从铁皮石斛中分离植物愈伤组织,经诱导分化及驯化筛选,利用离体培养生物技术扩增培育的无
农药残留、重金属含量较低、高醇浸出物含量铁皮石斛幼嫩茎的培育技术。
4生产条件
室内环境为十万级以上洁净度的洁净间。保持室温25oC~28oC。均匀柔和人工光,增补4:1红蓝
光,光照强度为2000Lux,光暗周期8h:16h。空气相对湿度40%~70%。生产环境、生产用水和过滤水
应分别符合GB5749和GB/T6682的规定。
5种源培育与增殖
5.1培养基配制
采用MS培养基+0.5mg/LNAA+0.5mg/LKT+20g/L葡萄糖+10g/L琼脂固体培养基进行种源细胞固
体培养。采用MS培养基+0.5mg/LNAA+0.5mg/LKT+20g/L葡萄糖培养液进行种源细胞液体培养。
5.2种源细胞增殖
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DB32/T3652—2019
将成熟铁皮石斛茎段插入固体培养基中培养,获得愈伤组织细胞。在相同固体培养基条件下增殖
种源细胞。
5.3种源细胞培育
按照鲜重20g/L~30g/L接种量,采用无菌操作,将种源细胞转接至2L~5L玻璃瓶中进行液体培养。
培养过程中向培养液中通入无菌空气,空气流速为0.75L/min~1L/min,培养周期为30d~45d。
6培育生产
6.1培养基配制
采用MS培养基+0.5mg/LNAA+1mg/LKT+20g/L葡萄糖+5%麦芽糖培养基进行培养。
6.2培育操作
按40g/L~50g/L接种量,将种源细胞转接至10L玻璃瓶中。在培养过程中,将无菌空气通入培养
瓶中,空气流速为0.75L/min~1L/min,培养周期为30d~45d。待嫩茎生长总体积至培养瓶总体积的2/3
时,采收或留做下一阶段种源。
7规模化生产
按40g/L~50g/L接种量,将采收的种源细胞转接至50L~100L生物反应器中培养生产,其它按本
标准第6章的规定执行。
8日常管理
一旦发现细菌或真菌的污染,立即将污染品移出培育生产间并进行湿热高温灭菌。
9采收
采收时剔除褐化植株,用过滤水缓慢冲洗嫩茎3min~5min,300rpm/min脱水离心3min,甩脱浮水
后可直接制备成铁皮石斛嫩茎鲜品,或65℃烘干制备为干品。
10质量等级划分
铁皮石斛嫩茎质量等级划分要求见表1。
表1铁皮石斛嫩茎质量等级划分要求
等级
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