人民医院临床检验(急诊)标准操作程序SOP

标准操作程序

项目ACTDIFF2血细胞分析仪检测的标准操作程序

方法

编写人邵慧日期2005/1/1

审核人董林红日期2005/1/1

批准人陈健康日期2005/1/1

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDYEY-JYK-LJ-001

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验ACTDIFF2血细胞分析仪检WHDEYY-LJ-0012005-01-01

科临检（急诊）化验室测的标准操作程序共4页第1页

【目的】

用于ACTDIFF2血细胞分析仪的标准操作程序。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任-使用本SOP的工作人员提出并报经下述人员批准签字：专

业主管、质控主管、科主任。

【开机程序】

1开机前的检查

[1]试剂的检查：对每天要用的试剂进行检查，如量不够将试剂准备好备用，开封后的试剂

使作限期为：溶血素（STROMATOLYSER-WH）90天，稀释液（CELLPACK）60天。

[2]仪器的检查：检查管道、电线的连接。

[3]废液的检查：主机左侧面的防止逆流容器和废液容器中若有废液积存须予以排除。

[4]打开主机前的罩子检查打印纸。

2.开机

[1]打开仪器后面板的电源开关（平时不关闭），再打开PC机及打印机的电源。

[2]仪器自身进行一系列自我检查，显示器上出现相应的信息，等各项指标“PASS”后，选

用分析模式。

【标本测试】

1.将EDTA-NAz抗凝的末梢血或静脉血充分混匀一分钟或将试管颠倒10次后，插入吸样针,

按START吸样。等吸样针缩进仪器中，移去标本。仪器屏幕显示测试结果并传输到LIS系统。

2.操作人员以自己的工号和密码进入LIS系统，在主屏的“检验仪器”栏选择ACTDIFF2。

3确定标本号（与ACTDIFF2仪器屏幕显示的测试标本号一致），在“门诊住院号“栏输入

门诊发票号或住院号或用扫描枪扫描试管上条形码即获得病人相关信息。

4.在LIS系统审核、确认栏审核、确认，打印报告或经网络发送报告。

[3]之后进行运行检查，在部湿度，如果仪器此期间，所有内部管路进行充液，控制部分检

查电路及液路部分，之后仪器自动运行"SELF-TEST”（自检），过后马上按F10-0K来确认。

[4]SELF-TEST运行时，光度计及缓冲液本底计数进行复位，如果光通量不足将会显示错误

信息，这种情况下检查灯泡好坏及计数池是否清洁。如本底太高，仪器将给错误信号，以上

步骤完成后，提示进入主菜单。

仪器允许空白值的范围：

WBC0.3（X107UL）以下；

RBC0.02（X107UL）以下；

HGB0.1（Xg/dL）以下；

PLT10（X103/UL）以下.

【质控物监测】

在测量样本之前，先测定质控物，在主菜单上选择QUALITYCONTROL（质控）菜单，在选

择1-EXECUTIONOFCONTROL（执行质控），在这一步骤中可以选择质控的类型，质控血清

或已知值的血液标本，然后按SAMPLE进样。

1.将质控物从冰箱中取出，置室温后充分混匀进行测定。

2.将测定结果进行分析，质控物测定结果在允许误差范围内才能作病人样本测定（详见血细

胞分析仪室内质控标准操作程序SOP文件）

【样本测定】

1.标本采集：常采用肘部静脉，肘部静脉不明显时可采用手背静脉或内踝静脉，位于体表的

浅静脉均可作为采血部位。婴幼儿可采用颈外静脉。采血姿势建议为坐位。扎上止血带，时

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芜湖市第二人民医院检验ACTDIFF2血细胞分析仪检WHDEYY-LJ-0012005-01-01

科临检（门急诊）化验室测的标准操作程序共4页第2页

间最好不超过半分钟，用75%乙醇棉球消毒采血部位待干。用血常规真空负压管抽血（内有

EDTA-A抗凝剂），抽完后立即混匀，防止标本凝固。

2.样本编号、登记、置混匀器上充分混匀。

3.血液标本测定:在“Ready”状态下按下（Sample）健，吸样针升起，用吸

水纸擦洗吸样针阀。

4.将试管塞取下，将吸液管插入样本中，然后按下（Sample）健。仪器自动吸样，待进样完

毕吸取针会提起，此时移开标本，仪器将自动进行测量。

5.测定完毕，测定结果显示在屏幕上，此时进样针会放下，屏幕下方显示“Ready”，可进行

下一标本测定。

【结果审核】

1.审核打卬结果的样本号与申请单上的编号是否一致。

2.对特别异常的结果要向病人了解病情，并用显微镜法复检。

3.对显示的报告列表需注意并采取措施。

W16提示PLT异常，可能地线未接好，缓冲液脏，小血小板多，此时需检查地线连接或更

换缓冲液。

W17提高PLT/RBC异常，可能大血小板增多，小RBC异常，此时需检查PLT阈值。如有必

要需更换。

W18提示WBC异常，可能淋巳细胞与中性粒细胞界限不明显，此时需检查Tl、T2、T3阈值。

如有必要显微镜下检查。

M+提示MED异常，可疑嗜酸细胞单核细胞，有幼稚或病理细胞，此时需在显微镜下检查以

确认。

A2提示废液桶满，需立即倒空废液桶。

A4提示溶血剂不足，需立即加溶血剂。

A18提示缓冲液不足，需立即加缓冲液。

A19提示缓冲液桶无压力，可能桶盖未拧紧，需检查盖的密封情况。

A28提示清洁剂不足，需立即加清洁剂。

4.手工解析：当从测定结果的峰分析有干扰物引起假性增高或假性减低、或通过显微镜计数

法确认仪器测定受干扰物的影响时，可用手工解析重新测定。操作程序如下：

[1]在主菜单上按（3）健，此时显示出手工解析画面的屏幕菜单。

窗口中显示的项目为

L：表示标本读数

POS：读数的顺序号

ID：病人的ID号码

AGE：病人的年龄

SEX：病人的性别

F：格式的缩写，当登记需要格式时。输入后出现的N变为S。将光标移至第一个病人（必

须在此输入格式），然后按F2-INSDIFFDATA（插入手工分类）

F2+INSERTFORMULA（插入格式）用光标使插入的病人格式生效按F光标停在LIN%处，

按ENTER键，以下各分类与此相同。

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芜湖市第二人民医院检验ACTDIFF2血细胞分析仪检WHDEYY-LJ-0012005-01-01

科临检（急诊）化验室测的标准操作程序共4页第3页

[2]用（▲入（▼）、（＜）和（卜）健将光标移至需手工解析的项目处。输入完成后确定偏

离值（REJCT）为0时按F10-OK,讲光标移至下一病人处，操作同上

REJECT偏离值表示与100%的偏离值，各项淋巴细胞的百分数总和必须为100%

注意：只有偏离值为0时，输入才可被确认接受。

AC：这是一个可以输入非典型型或病理细胞读数百分比的项目o

[3]用（▲）健和（▼）将光标选择（继续、确定、取消）

继续：返回手工解析画面，可以继续进行手工解析。

确定：更新更换的内容，返回测量程序。

取消：不更新更换的内容，返回测量程序。

【试剂更换】

1.测定中试剂不足，仪器会自动停机屏幕上会显示出更换试剂的信息。

2.准备好新的试剂确认其在使作期内，打开新试剂容器的盖子。

3.稀释液更换时，将吸引软管垂直插入新的试剂。

4.溶血剂更换时•，打开空试剂容器的盖子，垂直将软管拔出，将软管垂直插入新的试剂中，

拧紧盖子。

5.试剂更换结束后按下（Slef-test）健，试剂自动被吸引然后进行空白校验，此时要确认

没有发生空白错误才能进行样本测定。

6.将更换试剂的内容写入试剂更换记录本。

【打印纸更换】

1.屏幕上会显示内载没有打印纸的信息）

2.打开打印机纸的仓门，抬起左侧的锁杆，装上新的打印纸，放下锁杆。

3.将纸卷放入仓内，关上仓门。

【关机程序】

1.在准备测量的状态下，按（Clean）和（Wash）健进行清洗。

2.清洗结束处于准备状态下，按前面板“OFF”键关机，待到冲洗完毕后关闭PC机。

3.关闭计算机电源。

4.关闭UPS电源。

注意：不要用仪器后面的主开关关闭仪器，否则仪器有可能因为未冲洗管路而造成微孔

管阻塞及读取室沉淀物的出现。

【仪器保养】

保养项目每天每周每六个月

清洗进样室

清洗计数及混匀室V

清洗微孔管V

更换过滤器

更换蠕动管

记录保养日期及项目。

标准操作程序

项目GENIUSS血细胞分析仪校准的标准操作程序

方法

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号CHDYYY-JYK-LJ-002

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验GENIUSS血细胞分析仪校准WHDEYY-LJ-0022005-01-01

科临检（急诊）化验室的标准操作程序共2页第1页

【目的】

保证血细胞分析仪测定结果的准确性。

【适用仪器范围】

血细胞分析仪。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签

字：专业主管、质控主管、科主任。

【校准方法】

（一）校准环境、仪器和试剂要求

室温：15-32℃。海拔高度＜2000米（工作条件）

湿度：＜80%。

试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品。

校准品：为仪器配套产品，并在使用效期内，同时无变质或污染

仪器：

（D校准前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30分钟。

（2）仪器的背景计数、重复性及携带污染率均符合要求，否则需请维修人员检修。

（二）操作步骤

1.从冰箱中取出校准物，放置室温15分钟，勿摇动。

2.在测定校准物前，先测定两份正常人新鲜血液。

3.将校准物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。

4.颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。

5.重复3和4步骤8次（计2分钟左右）。

6.瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。

7.用软纸拭净瓶口，轻轻打开瓶塞。

8.将两瓶校准物混合在一起，充分混匀后再分装于两个瓶内。

9.取一瓶校准物在仪器上连续测定11次。

10.由仪器自动校准。

（三）计算与核对标准

1.计算出各项结果的均值和精密度，均值应比II常检测报告多保留一位小数点。

2.检查精密度是否达到使用说明书上所示的精密度，如达到，继续下一步；否则，停止校

准，与维修人员联系。

3.计算出各项参数均值与定值之差的绝对值和相差的百分数，与校准标准（表1—1）进行比

较。

4.结果小于第一列数值，则不需校准；结果大于第二列数值，需请维修人员处理；结果在

第一列与第二列数值之间，需校准仪器。

5.如有自动校准功能，可按说明书进行。如没有此项功能，则用定值除以均值，再乘以原

校正系数即为新校正系数，输入仪器即完成校正。

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验GENIUSS血细胞分析仪校准WHDEYY-LJ-0022005-01-01

科临检（急诊）化验室的标准操作程序共2页第2页

表1—1校准标准表

参数百分数差别

一列二列

WBC<2%10%

RBC<1.5%10%

Hb<1.5%10%

Het<1.5%10%

MCV<1.2%10%

Pit<3%15%

MPV<5.0%20%

【校验校准结果】

1.按上述方法混匀第2管校准物后再在仪器上重复测定11次，按同样的方法计算，将结果

再次与校准标准核对，如合格，校准完毕，仪器方可使用。如不合格，应请厂方工程师维修、

校准。

2.仪器校准后补正值的计算公式：（仪器可自动计算）

新的补正值=当前补正值（％）X平均补正率（％）/100

当仪器出现下列情况显示所有校对错误，这时校对值的更换确认信息不能表示，需由维修工

程师作故障检修。

平均补正率＞105%

平均补正率〈95%

新的补正值＞120%

新的补正值＜80%

3.仪器故障检修后重复“操作步骤”和“计算和核对标准”重新校准和评价。

4.书写和保存评价报告，交科室存档。

标准操作程序

项目GENIUSS血细胞分析仪室内质控的标准操作程序

方法

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号CHDYYY-JYK-LJ-003

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验GENIUSS血细胞分析仪室内WHEYYY-LJ-0032005-01-01

科临检（门急诊）化验室质控的标准操作程序共4页第1页

【目的】

保证检验结果的准确性和可比性。

【该SOP变动程序】

本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、质控主管、科主任。

【室内质控的重要性】

是临床实验室全血质量管理重要组成部分，也是实验室认可的重要依据。

【室内质控的适用性】

1.连续监测和评价本室工作质量，评价结果的可信性。

2.排除质量环节中所有阶段导致不满意的原因。

3.反映检验操作中所有步骤的工作情况，包括从收集标本到结果的发出全过程。提高常规

测定工作的批间和批内标本检测结果的•致性。

【室内质控的方法】

Levey&Jennings图：对于同一标本连续测量20天。

【室内质控的准备程序】

开展室内质控前的准备工作

1.培训实验室工作人员，每个人都应对质控的重要性、基础知识、实验方法有较充分的了解。

并在实际工作中不断进行培训提高。

2.建立一套完整的标准操作规程。(S0P文件)

3.仪器须检定与校正其校正品应能溯源到参考方法或/参考物质，确立校正频度。

4.质控品的选择、应用与保存。

【质控图的限值设定与规则】

1.质控图控制限的计算和设定

[1]准备二个不同浓度的质控物。

[2]先将第1天和第2天测定的数据计算均数和标准差，并将数据设置在质控图中。

[3]再连续测定18天，将20天的数据计算均数和标准差，计算均数+SD和-SD的数值，计

算均数+2SD和-2SD的数值，计算均数+3SD和-3SD的数值，将数据重新设置在质控图中。

[4]在+2SD和-2SD的区间是偶然误差所带来的数值，是无意义的测量值，因此+2SD和-2SD

的范围作为质控的基本范围。

[5]在质控图屏面的所示数据：

FILENO.：显示质控图的文件号码；

Lot.NO.：质控文件中所设定的批号；

N：当前正在绘制的质控数据的个数.

质控项目：质控数据的管理图分成多个页面表示

质控图屏面(1/3):WBC、RBC、HGB

质控图屏面(2/3)：HCT、MCV、MCH

质控图屏面(3/3)：MCHC、PLT

LIMIT(UL)：质控界限值的上限，测量值超出此界限为质控异常。

LIMIT(LL)：质控界限值的下限，测量值超出此界限为质控异常。

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验GENIUSS血细胞分析仪室内WHDEYY-LJ-0032005-01-01

科临检(急诊)化验室质控的标准操作程序共4页第2页

目标值：质控的目标值。

DATD：卜线光标所示的图的质控数据。

MEAN：当前所在绘制中的质控数据的平均值。

下线光标：使用(<)健和(►),可以左右移动下线光标所示的图的质控数据和测

量日期将被表示在屏面上。

2.质控规则

1«：为警告规则，提示有一水平质控值超出X±2S,发出警告；

13S：失控规则，提示有一水平质控值超出X±3S,提示随机误差增大造成的失控；

22S：失控规则，是系统误差，有二种表现

①同一个水平的质控品连续2次控制值同方向超出X+2S或X-2S限值；

②在1批检测中，2个水平的质控值同方向超出X+2S或X-2S限值；

R1S：失控规则，在1批检测中，1个水平控制品的控制值超出X+2S限值，另1个水

平控制品超出X-2S限值，提示随机误差增大造成的失控；

41S：失控规则，有连续4次的控制值超出X+1S或X-1S限值，是系统误差，有二种表

现

①1个水平控制品连续4次控制值超出X+1S或XTS限值；

②2个水平控制品连续2次控制值同方向X+1S或X-1S限值；

10x：失控规则，有连续10次控制值在均数的一侧，是系统误差，有二种表现

①1个水平的控制品连续10次的控制值在均值的•侧；

②2个水平的控制品连续5次的控制值在均值的一侧；

3.室内质控的精密度要求

HBG,RBC：3-4%

PCV、MCV、MCH、MCHC：4-5%

WBC：8-10%

PLT：10-15%

【室内质控的操作程序】

1.质控样本的准备

［1］测试环境、仪器、试剂的要求

室温：15-32湿度：＜80%。海拔高度〈1200M

仪器空白值在允许范围内；

试剂：所用稀释剂、溶血剂和清洁剂都为仪器配套产品

［2］质控样品的准备：

1］从冰箱中取出质控物，放置至室温（约30分钟），勿摇动。

2］将质控物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。

3］颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。

4］重复②和③步骤8次（计2分钟左右）或置混匀器上混匀。

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芜湖市第二人民医院检验GENIUSS血细胞分析仪室内WHDEYY-LJ-0032005-01-01

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5］瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。

2.质控样本的测定

［1］按下稳压电源3秒出现绿灯后，按“0N”后立即启动电脑。

⑵此时仪器将从“Start-up”启动到“Check”检查，再进行自检。仪器画面上出现

（Self-test）o

［3］自检完成后，屏幕下方显示“PressESCtocontiue”，按“F10”或“ESC”键，屏幕显

示日期和时间，按“F10”确认后，进入主菜单。进入第6项进行质控分析。即可看到准

确，精密的质控报告。

［4］在质控分析中，选择“1”执行质控，屏幕会显示分三个窗口，各对应一个质控品的类型

［质控1］［质控2］［质控3］,分别表示质控低值、中值、高值，每个窗口显示以下内容：

均值：每个质控的均值，并被描绘成曲线。预期值：质控血样的预期值。

可通过TAB键选择相应的质控窗口，即选择质控品［1、2、3］出现加重白色界面。

［5］选择好后按下SAMPLE键即可开始测量,测试完毕后，每一项均值会依次出现在窗口中（平

均值的位置上）若仪器红灯示警，则所有参数都在范围外，应考虑进行校正。若不想校正,

则必须按下F10-0K查看质控图，如想校正，按以下方法进行：

［校正］:按下F2-CAL显示校正参数，使用左向箭头输入新得数值，按下ENTER键，依次按

此方法输入全部校正数值。按F10确认或按下ESC取消。

［6］质控测定在控后，才能测定病人标本。

3.失控的原因与处理

［1］检查质控图或失控的规则，确定误差的类型。

系统误差（或偏倚）的失控：每天的质控值有定向的漂移或倾向性，并且随时间在增

大，逐渐形成失控。

随机误差的失控：表现较突然，失控的质控值相对于均值的离散度比往常大。

［2］误差类型和失控原因的关系

造成系统误差的原因：使用不同批号的试剂、不同批号的校准品、校正品过期或保

存不妥造成校准值变化、校正值设定错误、试剂的质量或由于使用不当引起试剂变质、

吸样器或稀释器校准或调试错误、仪器的故障、检验人员的变动等。

造成随机误差的原因：试剂瓶或试剂管道中有气泡、电源电压不稳、检验人员操作

不熟练、重现性差等。

在检测中偶尔出现的不恒定因素。

［3］自动分析仪多项目检测系统常见的原因

如果失控仅1个项目，在确定误差性质后，按照不同误差可能具有的问题去寻找原因。

如果多个项目同时出现失控问题，应从出现问题的共性上考虑。

［4］与近期变化有关的原因

［5］确认解决问题，作好记录

找出原因，经纠正后须重测定质控品，以“在控”来确认问题解决与否，在失控时测

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第一人民医院检验GENIUSS血细胞分析仪室内WHDEYY-LJ-0032005-01-01

科临检（急诊）化验室质控的标准操作程序共4页第4页

定的病人样本也须重测，应将出现的质控事件和纠正过程形成文件。

4.作质控日记。

5.定期随机抽查病历，综合分析病人的诊断、疗效与检验桔果的相关性。

6.经常征求临床意见，了解检验结果与诊疗事件的相关性，使检验结果得到临床的认可。

7.参加部、省临检中心的室间质评活动，保证检验结果的准确性和可比性。

标准操作程序

项目血红蛋白（Hb）测定的标准操作程序

方法（氧化高铁血红蛋白比色法）

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批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDEYY-JYK-LJ-004

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第一人民医院检验血红蛋白（Hb）测定的标准WHDEYY-LJ-0042005-01-01

科临检（急诊）化验室操作程序共1页第1页

［该SOP变动程序］

本标准操作程序的变动，可由任•使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、科主任。

［原理］

血红蛋白被高铁氟化钾氧化成高铁血红蛋白,在与鼠离子结合生成稳定的氟化高铁血红蛋白

（HiCN）;HiCN在波长540nm有吸收峰，可用校准的分光光度计进行直接定量测定，或用

HiCN参考液进行比色法测定。

［试剂］

国内有成套试剂盒供应。

1.HiCN试剂

2.HiCN参考液

［仪器］

XF-1型血红蛋白比色仪

［操作］

1.取全血（或末梢血）20uL加入5ml的HiCH试剂中，充分混合，静置5分钟。

2.血红蛋白比色仪以蒸僧水调节器调零，按测试键，仪器自动测定和显示结果。

［参考值］

Hb女：lI0~150g/L

男：120~160g/L

新生儿：170~200g/L

［注意事项］

1.试剂盒存放于4℃冰箱避光，不可冻存（高铁氟化钾还原，试剂褪色失效）。

2.吸样时，采样管必须插入试管底部液体中，避免气泡吸入，否则影响测定结果。

3.仪器使用过程中，注意检查“零点”值飘移，若“零点”飘移绝对值大于2g/L,需调整

零点旋钮使仪器显示回到“000”值。

［临床意义］

Hb增多：可见于相对性增多，如严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤、慢性肾上腺皮

质功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进症危象、糖尿病酮症酸中毒等水分丢失所致血液浓缩;

绝对性增多如缺氧所致促红素作用的胎儿、高原地区居民、阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、

异常血红蛋白病，肾癌、肝细胞癌、子宫肌瘤、卵巢癌、原因不明的真性红细胞增多症。

Hb减少：生理性减少见于婴儿3个月至15岁前儿童的红细胞生成相对不足、妊娠中后期血

液稀释、老年人造血功能减低等生理性贫血：病理性减少见于红细胞生成减少（再障、白血

病等骨髓浸润、缺铁、铁粒幼细胞性贫血、巨幼细胞性贫血）、红细胞破坏过多及失血。

标准操作程序

项目白细胞计数（WBC）的标准操作程序

方法（手工计数法）

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDEYY-JYK-LJ-005

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验白细胞计数(WBC)的标准WHDEYY-LJ-0052005-01-01

科临检(急诊)化验室操作程序共1页第1页

［该SOP变动程序］

本标准操作程序的变动，可由任•使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、科主任。

［原理］

血液经稀酸稀释后，成熟红细胞全部被溶解，注入计数池后，在显微镜下计数白细胞。

［试剂］

WBC稀释液：

冰醋酸3ml蒸储水97ml

10g/L亚甲蓝溶液3滴

［操作］

1.取13X78小试管一支，加白细胞稀释液0.38ml

2.用微量吸管准确吸取全血20ul,擦去管尖外部余血，将吸管插入小试管中稀释液的底部,

轻轻将血挤出，并吸取上层清液，洗微量吸管2次，最后轻摇动试管混匀。

3.充池后，静置2~3分钟，待白细胞下沉。

4.用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数。

5.计算方法：WBC/L=4个大方格内白细胞总数/20*10八9。

［参考值］

WBC：成人(4~10)*10A9/L儿童(5~12)*10A9/L新生儿(15-20)*10A9/L

［注意事项］

1.末梢血因循环、挤压等因素影响检验结果，最好取静脉抗凝血做细胞计数；个别特殊需

采末梢血时注意不能挤压过甚，因此针刺深度必须适当。

2.大小方格内压线细胞，应按数上不数下，数左不数右的原则，进行计数。

3.稀释液、小试管、计数板均需清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。

4.一些贫血患者血液中有核细胞增多，影响白细胞计数，应校正除去。

白细胞校正数=校正前白细胞数*［100/（100+计数100个白细胞的同时计数到的有核红细

胞数）］

5.相邻的两个方格计数相差过大应重新充池。

6.计数时，两次重复计数误差不超过10%。

［临床意义］

1.生理性增加新生儿、运动、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光

或紫外线照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。

2.病理性增加类白血病、白血病急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增

多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手

术后、肿瘤转移、药物中毒、代射性酸中毒、过敏等。

3.减少伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布氏杆菌热、流感、麻疹、风疹、登革热、传

染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败血症、重症

细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。

4.造血系统障碍所致减少恶性贫血.、非白血性白血病、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈

谢（Gaucher）病、Felty综合症、Chediak-Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。

标准操作程序

项目白细胞分类计数（DC）的标准操作程序

方法（手工计数法）

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDEYY-JYK-LJ-006

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第一人民医院检验白细胞分类计数（DC）的标WHDEYY-LJ-0062005-01-01

科临检（急诊）化验室准操作程序共2页第1页

［该SOP变动程序］

本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、科主任。

［原理］

将血片制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用复合染料染色，检验者根据各类白细胞形态特征予

以分类计数，得出相对对比值报告。

［试剂］

1.瑞特染液：国内有试剂盒

快速染液I液：磷酸二氯钾6.64g

磷酸氢二钠2.56g

水溶性伊红4g

（或伊红2.5g）

蒸储水1000ml

石炭酸40ml

煮沸，待冷备用

II液：亚甲蓝4g

蒸储水1000ml

高镒酸钾2.4g

煮沸，待冷备用

［操作］

1.采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜呈舌状、头、体、尾清晰可辨。

2.推好的血膜在空气中晃动，以促使其快干。天气寒冷或潮湿时，应于37℃温箱中保温促

干，以免细胞变形缩小。

3.染色：在干燥血片上加0.8ml快速染液的A液3~5分钟后，在加快速染液的B液1.5ml,

30~60秒后，水洗待干。

4.选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进

行分类计数，求出各类细胞所占比例。

［参考值］

WBC分类：成人N0.50-0.70

E0.005-0.05

B0-0.01

L0.20-0.40

M0.03-0.08

［注意事项］

1.要避免重复计数，玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈曲线移动。

2.WBC大于20*103/L,应分类计数200个细胞。血细胞明显减少的血片，可检查多张血

片。

3.白细胞形态变化较大，应经常由高年资检验人员进行核实，以减少误差。

4.禁止在计数池内或涂片下用高倍镜作白细胞分类。

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验白细胞分类计数（DC）的标WHDEYY-LJ-0062005-01-01

科临检（急诊）化验室准操作程序共2页第2页

［临床意义］

1.各类白细胞数量改变见血常规临床意义。

2.中性粒细胞核左移（周围血中杆状核粒细胞增多，并出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细

胞）。最常见于各种感染（急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血性反应等），从核左移

及有关参数可见感染程度及机体反应性。核左移伴有白细胞总数增高者，称为再生性左

移、表示机体的反应性强、骨髓造血功能旺盛；核左移而白细胞总数不增高者，甚至减

少者，称为退行性左移，提示骨髓造血功能减低，粒细胞生成或成熟受阻。

3.中性粒细胞核右移（周围血中五叶核细胞增多大于0.05）见于骨髓造血功能减退或缺乏

造血物质。见于：营养性巨幼红细胞性贫血，疾病进行期突然出现核右移示预后不良，

炎症恢复期一过性核右移为正常现象，使用抗代谢药物也可出现核右移。

4.中性粒细胞毒性变化。在严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等

症时可出现细胞大小不均、毒性颗粒、空泡等。

5.异型淋巴细胞（空泡型、不规则型和幼稚型）。在各种病毒感染、传染性单核细胞增多

症（异淋）等常见，在疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见。

标准操作程序

项目红细胞计数（RBC）的标准操作程序

方法（手工计数法）

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号CHDYYY-JYK-LJ-007

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第一人民医院检验红细胞计数（RBC）的标准操WHDEYY-LJ-0072005-01-01

科临检（急诊）化验室作程序共1页第1页

［该SOP变动程序］

本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、科主任。

［原理］

用等渗稀释液（或生理盐水）将血液稀释并充入计数池后，于显微镜下计数。

［试剂］

生理盐水

［操作］

1.取小试管一支，加生理盐水2ml

2.用清洁干燥微量吸管取全血10ul

3.擦拭去管尖外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻吸上层清液洗吸管2~3次，立

即混匀

4.充池后待2~3分钟用高倍镜依次计数中央大方格内四角和正中5个中方格内的红细胞。

按数上不数下、数左不数右的原则进行目视计数

5.计算：RBC/L=5个中方格内RBC数/100*10八12

［参考值］

RBC女：3.5~5.0*10A12/L

男:4.0~5.5*10A12/L

［注意事项］

1.末梢血因循环、挤压等因素影响结果，要求取静脉抗凝血作细胞计数；个别特殊需采末

梢血时注意不能过分挤压，因此针刺深度必须适当.

2.稀释液、小试管、计数板等均应清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。

［临床意义］

多种原因可造成红细胞生成和破坏的平衡失调，引起贫血和红细胞增多症。

1.生理性减少见于妊娠后期、6个月至2岁的婴幼儿等。

2.相对性增多主要因血浆容量减少所致，见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧

伤、吸烟、高血压、肥胖等。

3.病理性减少造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多或失血所引起的各种贫血。

4.代偿性增多主要见于缺氧、新生儿、高原环境、一氧化碳中毒、严重肺气肿、肺源性心

脏病、先天性心脏病、心衰等。

5.绝对性增多克隆真性红细胞增多，非克隆性真性红细胞增多，与促红细胞生成素产生过

多有关，见于肾癌、肝细胞、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管

瘤、子宫肌瘤。

标准操作程序

项目血小板计数(PLT/BPC)的标准操作程序

方法(手工计数法)

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDEYY-JYK-LJ-008

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验血小板计数（PL17BPC）的标WHDEYY-LJ-0082005-01-01

科临检（急诊）化验室准操作程序共1页第1页

［该SOP变动程序］

本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、科主任。

［原理］

将血液用适当的稀释液作一定量的稀释后，混匀注入计数池，在显微镜下计数PLT,在计算

出每升血液中血小板数。

［试剂］

1.PLT稀释液（草酸筱法）

草酸钱1.0g

EDTA-Na20.012g

蒸储水加至100ml

2.EDTA-K2抗凝剂或抗凝管

［操作］

1.于清洁试管中加入稀释液0.38ml

2.准确吸取全血20ul,擦去管尖外附着血液，置于血小板稀释液内，立即充分混匀，待完

全溶血后再次混匀1分钟

3.取上述均匀的血小板悬液一滴，注入计数池内，静置10~15分钟使血小板下沉

4.用高倍镜计数中央大方格中五个中方格（四角及中央）内血小板

5.计算：PLT/L=五个中方格内PLT总数*10A9

［参考值］

PLT：（100-300）*10A9/L

［注意事项］

1.血小板稀释液，配成后立即过滤，防止微粒和细菌污染，试管及吸管必须清洁干燥。

2.末梢血因循环、挤压等因素影响检查结果，要求取静脉抗凝血做PLT计数；个别特殊需

采末梢血时注意针刺深度，使血液通畅，不能挤压。拭去第•滴血后，首先采血做血小

板测定，操作应迅速，防止血小板聚集和破坏。采取标本后应尽快计数，以免影响结果。

3.血液加入稀释液内要充分混匀，滴入计数池后一定要静置10~15分钟。室温高时注意保

持计数池周围的湿度，以免水分蒸发而影响计数结果。

4.计数时光线要适中，不可太强，应注意将有折光性的血小板和杂质、灰尘相区别，附在

血细胞旁的血小板不要漏数。

［临床意义］

血小板减少见于生成减少（再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病等）、破坏增多（原

发性血小板减少性紫瘢、脾功能亢进）、消耗过多（DIC等）、家族性血小板减少（巨大血小

板综合征）等。

血小板增多见于骨髓增生综合征（慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症等）、急性反应（急

性感染、急性失血、急性溶血等）及脾切除后。

标准操作程序

项目网织红细胞计数的标准操作程序

方法

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDEYY-JYK-LJ-009

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验网织红细胞计数的标准操作WHDEYY-LJ-0092005-01-01

科临检（急诊）化验室程序共1页第1页

［目的］

判断骨髓红细胞系统造血情况，疗效观察。

［该SOP变动程序］

本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字:

专业主管、科主任。

［原理］

网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝

或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。

［试剂］

1.10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液：煌焦油蓝1g、枸椽酸钠0.4g、氯化钠0.85g溶于双蒸储

水100ml中，过滤后备用。

2.10g/L煌焦油蓝ACD保养液（血库用）20ml,用Imol/LNaOH调至PH7.5左右，加入

研细的煌焦油蓝200mg,溶解后过滤备用。

［操作方法］

1.于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝ACD溶液。

2.加入末梢血2滴于上述试管中，混匀。

3.静置15~20分钟后，取1滴制成薄片。

4.油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数，以百分率或绝对值报告。

［参考值］

成人：0.5%~1.5%新生儿：2%~6%

［临床意义］

1.反映骨髓的造血功能：溶贫网织高达0.20,再障网织低于0.005,网织红细胞低于

5*10A9/L为诊断再生障碍性贫血的标准之一。

2.作为贫血治疗的疗效观察指标。

3.作为观察病情的指标。

［质量控制］

1.用煌焦油蓝乙醇染液时，应待乙醇完全挥发干后方能加入血液，否则可使血液凝固。染

色时间一定要充足。

2.染色时温度控制在37度。

3.染液与血液的比例以1：1为宜，严重贫血时，可适量增加血液的比例，制片时血膜不

宜太薄或太厚，否则会造成网织红细胞分布不均。

标准操作程序

项目血型鉴定（正向定性，反向定性）的标准操作程序

方法

编写人日期

审核人日期

批准人日期

文件分发部门和/或个人

本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次

文件编号WHDEYY-JYK-LJ-010

文件版本号第1版

医务科保管者

院长办公室保管者

院档案室保管者

检验科主任

实验室名称项目编号制定日期

芜湖市第二人民医院检验血型鉴定（正向定性，反向定WHDEYY-LJ-0102005-01-01

科临检（急诊）化验室性）的标准操作程序共1页第1页

［目的］:鉴定人ABO血型

［原理］:根据IgM类抗原特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能够出现凝集反应的

原理，用已知IgM类特异性标准血清与被检红细胞在盐水介质中反应或用已知标准红细胞

与待检血清在盐水介质中反应（室温）。若出现凝集现象，表明被检红细胞上有与血型抗体

相对应的抗原或表明被检血清中有对应的血型特异性抗体，从而判断和鉴定被检者的血型。

（正向定型）用已知标准A、B、O型红细胞与被检血清反应，若被检血清与已知型别的标

准红细胞出现凝集，则证明被检血清中存在着与该红细胞抗原相对应的抗体。反之，若被检

血清与已知型别的标准红细胞不出现凝集，证明被检血清