恶性淋巴瘤免疫组化讲课

关于恶性淋巴瘤免疫组化讲课一、常用抗体第2页,共117页，2024年2月25日，星期天（一）白细胞

1.CD45，CD45RB（LCA）出现于白细胞表面的四、五种高分子量糖蛋白家族（180，190，205，220kD）DAKO产抗体由二种单抗组成：2B11(180，190，205，220kD)--CD45抗体PD7/26(190，205，220kD)--CD45RB抗体第3页,共117页，2024年2月25日，星期天正常组织：标记淋巴细胞。细胞膜表面阳性最强，胞浆内弱阳性也可见。巨噬细胞和组织细胞不同程度表达。多核白细胞弱阳性浆细胞阴性非造血细胞阴性第4页,共117页，2024年2月25日，星期天肿瘤：大部分淋巴瘤（B和T）阳性浆细胞及大细胞淋巴瘤常阴性毛细胞阳性粒细胞性或红细胞源性肿瘤细胞阴性非造血组织肿瘤，如癌，恶性黑色素瘤，尤文氏肉瘤阴性可用于脱钙骨髓活检组织，鉴别骨肿瘤第5页,共117页，2024年2月25日，星期天2.CD11A/18（LFA-1α和β）表达于大部分淋巴瘤和白血病很多中等和高度恶性B细胞淋巴瘤LFA-1的α和/或β链可缺失。第6页,共117页，2024年2月25日，星期天3.TdT属核酶，参与T细胞受体产生和抗体分化过程。正常组织：见于小群成人骨髓淋巴细胞和大部分皮质胸腺细胞。偶见于反应性淋巴结和脾髓质胸腺细胞和正常外周血细胞不表达第7页,共117页，2024年2月25日，星期天肿瘤：表达于非成熟淋巴细胞来源肿瘤。高TdT活性见于:淋巴母细胞性淋巴瘤慢性粒细胞性白血病淋巴母细胞危象大部分急性淋巴母细胞性白血病第8页,共117页，2024年2月25日，星期天4.CD30120kD跨膜糖蛋白CD30基因位于第1号染色体短臂36区，早先称为Ki-1，又名Ber-H2冰冻切片：霍奇金细胞（单核）和R-S细胞（多核）结节型淋巴细胞为主型：弱阳性或阴性其它HL：强阳性第9页,共117页，2024年2月25日，星期天大部分间变性大细胞淋巴瘤和所有的淋巴样丘疹强阳性一些外周多形T细胞淋巴瘤（HTLV-1+/-），包括血管免疫母细胞型，Lennert型和极少数B免疫母细胞淋巴瘤阳性。其他淋巴瘤阴性。正常淋巴组织中，小群位于B细胞滤泡和生发中心边缘的大细胞阳性第10页,共117页，2024年2月25日，星期天正常淋巴细胞经菜豆凝集素，HTLV-I/II或EB病毒刺激后，可与CD30抗体反应。淋巴组织外，胰腺腺泡细胞（+），胰腺癌偶（+）。胚胎型癌（+）。其他类型或其他部位的癌，恶性黑色素瘤，横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤，尤文氏肉瘤（－）石蜡切片：与冰冻切片不同，浆细胞（+）余同冰冻切片第11页,共117页，2024年2月25日，星期天（二）B细胞1.免疫球蛋白（Ig）（1）κ

免疫球蛋白κ轻链（2）λ

免疫球蛋白λ轻链第12页,共117页，2024年2月25日，星期天2.全B抗原

（1）CD20（L26）33kD非糖基化蛋白外周血和淋巴组织中大多数B细胞阳性在淋巴组织，生发中心母细胞和B免疫母细胞强阳性。其他造血细胞阴性。第13页,共117页，2024年2月25日，星期天非淋巴组织阴性。大多数B细胞淋巴瘤阳性极少数T细胞淋巴瘤阳性结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞可阳性。第14页,共117页，2024年2月25日，星期天（2）CD1995kD多肽B细胞阳性。表达于B细胞成熟早期，可能早于前B细胞期，持续见于整个B细胞成熟期，直至终末浆细胞期前不久消失。其他造血细胞和非造血细胞阴性。只能用于冰冻切片。第15页,共117页，2024年2月25日，星期天（3）CD22B细胞分化早期表达于胞浆，后与Ig几乎同时到达细胞表面B细胞淋巴瘤和白血病阳性大多数浆细胞肿瘤阴性第16页,共117页，2024年2月25日，星期天（4）CDW75（LN-1）表达于SIg＋B细胞正常细胞：淋巴结和脾白髓的生发中心B细胞强（+）套区B细胞，巨噬细胞，脾红髓红细胞阳性更弱滤泡外B细胞散在阳性浆细胞阴性外周血B淋巴细胞阳性第17页,共117页，2024年2月25日，星期天阳性上皮细胞：腺上皮（子宫内膜、前列腺、胃），乳腺导管上皮，肾远曲小管，胰腺导管，结肠表面上皮，支气管呼吸道纤毛柱状上皮肝细胞，甲状腺滤泡，平滑肌和唾腺腺泡细胞弱阳性。肿瘤细胞：B细胞性白血病（+）：B细胞慢性淋巴细胞性白血病，毛细胞白血病第18页,共117页，2024年2月25日，星期天B细胞淋巴瘤：滤泡中心细胞淋巴瘤，特别是大裂和大无裂强（+）免疫母细胞型也（+）T细胞淋巴瘤（－）上皮性肿瘤：乳腺、卵巢和结肠腺癌（+）喉鳞癌和睾丸生殖细胞癌局灶（+）膀胱移行细胞癌和胃腺癌弱（+）间叶性肿瘤：粘液脂肪肉瘤（+）未分化肉瘤（+）第19页,共117页，2024年2月25日，星期天（5）CD79α(mb-1)与CD79β(B29)共同组成B细胞抗原受体出现于B细胞成熟早期，从前B细胞期到浆细胞期，为细胞间成分。用于识别B细胞种系。前B细胞性急性白血病，B细胞株，B细胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤阳性。粒细胞或T细胞株以及T细胞瘤阴性。第20页,共117页，2024年2月25日，星期天（6）BLA3636kD糖蛋白正常细胞：见于早期和活化B细胞，但静止和周围B细胞阴性。大多数小无裂和大无裂细胞及免疫母细胞膜强阳性。少数小裂细胞阳性，巨噬细胞阴性。第21页,共117页，2024年2月25日，星期天30%套区淋巴细胞膜弱阳性。滤泡间区散在中等到大淋巴细胞和免疫母细胞膜强阳性。T细胞、粒细胞和巨噬细胞阴性，但正常肝的枯否氏细胞不同程度阳性。肿瘤细胞：霍奇金淋巴瘤的R-S细胞和霍奇金细胞阳性。一些反应性和恶性B淋巴细胞阳性。第22页,共117页，2024年2月25日，星期天3.B细胞亚型抗原

（1）CD10（CALLA，急性淋巴母细胞性白血病共同抗原）100kD糖蛋白主要用于儿童白血病和B细胞淋巴瘤：表达于淋巴母细胞性，Burkitt和滤泡型淋巴瘤及慢性粒细胞型白血病第23页,共117页，2024年2月25日，星期天也见于肾小球上皮细胞、近端肾小管刷状缘、乳腺肌上皮细胞、胆小管、中性粒细胞、小群骨髓细胞、胚胎小肠上皮和正常纤维母细胞。第24页,共117页，2024年2月25日，星期天（2）CD21C3d受体，145kD糖蛋白也具有Epstein-Barr病毒受体的功能冰冻切片：B细胞中等（＋）滤泡树突状细胞（FDC）强（＋）石蜡切片：B细胞弱（＋）~（－）FDC强（＋）第25页,共117页，2024年2月25日，星期天正常和增生淋巴结及扁桃体：生发中心可见FDC＋网状结构，致密，清晰。滤泡套区FDC＋网状结构疏松，不清晰。非霍奇金淋巴瘤：滤泡型淋巴瘤（cb/cc淋巴瘤）：FDC＋网状结构呈结节型，致密，清晰。一些弥漫型淋巴瘤（中心细胞性淋巴瘤）：FDC＋网状结构大小不一，疏松，不清晰。前B细胞淋巴瘤（淋巴母细胞性淋巴瘤），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞白血病FDC－。第26页,共117页，2024年2月25日，星期天T细胞淋巴瘤FDC＋限于外周T细胞淋巴瘤的血管免疫母细胞性淋巴结病（AILD）型和一些多形T细胞淋巴瘤。与B细胞淋巴瘤不同，T细胞淋巴瘤和AILD的FDC网仅含少量B细胞。T淋巴母细胞性淋巴瘤、T-CLL和蕈样霉菌病FDC－。霍奇金淋巴瘤：仅结节型淋巴细胞为主型FDC＋。FDC＋网状结构致密，清晰，几乎占据整个增大的滤泡。第27页,共117页，2024年2月25日，星期天（3）CD23正常细胞：套区B细胞（＋）滤泡树突状细胞亚型（＋）肿瘤：小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病（＋）套细胞淋巴瘤（－）第28页,共117页，2024年2月25日，星期天（4）CD35C3b受体，单链糖蛋白，220kD正常组织：冰冻切片：人B细胞滤泡中大部分强阳性细胞为滤泡树突状细胞（FDC），套细胞阳性较弱。肾小球上皮细胞C3b受体强阳性巨噬细胞和组织细胞不同程度阳性第29页,共117页，2024年2月25日，星期天石蜡切片（蛋白酶消化后）：FDC强阳性，滤泡中心和套区的FDC网状结构明显，前者致密，清晰；后者疏松，不清晰。肿瘤细胞：滤泡型淋巴瘤（cb/cc）：FDC＋网状结构呈结节状，致密，清晰弥漫型淋巴瘤（多数为cc）：FDC＋网状结构疏松，不清晰第30页,共117页，2024年2月25日，星期天前B细胞淋巴瘤（淋母），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞性白血病FDC－非霍奇金淋巴瘤，FDC主要限于血管免疫母细胞性淋巴结病型T细胞淋巴瘤第31页,共117页，2024年2月25日，星期天（5）CD3845kD糖蛋白正常细胞：浆细胞、单核细胞、早期淋巴样细胞、和活化的T细胞（＋）。肿瘤：浆细胞肿瘤（＋）有些B和T细胞淋巴瘤（＋），特别前驱细胞来源者。第32页,共117页，2024年2月25日，星期天（6）VS38c（浆细胞单抗）64kD胞浆内抗原。表达于正常和肿瘤性浆细胞。上皮细胞（尤其鳞状上皮）弱阳性第33页,共117页，2024年2月25日，星期天（三）T细胞1.全T抗原第34页,共117页，2024年2月25日，星期天（1）CD2正常细胞：T细胞（＋）NK细胞（＋）肿瘤：大多数 T细胞淋巴瘤和白血病（＋）少数粒细胞白血病（＋）第35页,共117页，2024年2月25日，星期天（2）CD316-28kD,5条多肽链组成抗体与T细胞表达的CD3抗原的胞浆内部分反应。最早见于早期胸腺细胞在皮质胸腺细胞明显存在于胞浆至髓质胸腺细胞出现于T细胞表面为高度特异T细胞标记，除T细胞外，仅表达于小脑蒲肯野细胞。第36页,共117页，2024年2月25日，星期天正常组织：表达于胸腺皮质、髓质和周围淋巴组织的T细胞。肿瘤：表达于大多数T细胞肿瘤，但高度恶性T细胞淋巴瘤，如大细胞间变性淋巴瘤偶见（－）。部分恶性组织细胞增生症阳性有些霍奇金淋巴瘤阳性第37页,共117页，2024年2月25日，星期天（3）CD5表达于多数T细胞淋巴瘤和白血病。也可表达于一些肿瘤性B细胞，如B-CLL，B-小淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。粒细胞和单核细胞阴性。第38页,共117页，2024年2月25日，星期天（4）CD7正常细胞：大部分T细胞（＋）NK细胞（＋）肿瘤：很多T细胞淋巴瘤和白血病（＋）一些粒细胞白血病（＋）淋巴母细胞性肿瘤最佳T细胞标记之一胸腺后T细胞恶性肿瘤，尤其在MF中常缺失第39页,共117页，2024年2月25日，星期天（5）CD43（Leu22）T细胞和髓系细胞表达的膜/浆抗原正常和肿瘤性T细胞阳性正常扁桃体和淋巴结的滤泡间区T细胞强阳性少数B细胞白血病和淋巴瘤也可表达通常为小细胞性，如中心细胞性淋巴瘤第40页,共117页，2024年2月25日，星期天（6）OPD4200kD，表达于辅助/诱导T细胞强阳性：淋巴结T区淋巴细胞（膜）扁桃体*分布同CD4阳性细胞结节病和结核的类上皮细胞弱阳性抑制/细胞毒T细胞极少阳性第41页,共117页，2024年2月25日，星期天阴性：非造血细胞B细胞单核细胞粒细胞肿瘤：见于50%T细胞淋巴瘤—辅助/诱导表型的外周T细胞淋巴瘤少数B细胞淋巴瘤阳性第42页,共117页，2024年2月25日，星期天（7）CD45RO（UCHL-1）180kD，出现于T细胞分化早期。正常细胞：大多数胸腺细胞（＋）成熟活化T细胞（＋）少量静止T细胞（CD4/CD8亚型）（＋）粒单核细胞系，如粒细胞和单核细胞（＋）多数正常B细胞和NK细胞（－）第43页,共117页，2024年2月25日，星期天肿瘤细胞：T细胞淋巴瘤（＋）极少B细胞淋巴瘤：部分中心母细胞性和免疫母细胞性淋巴瘤胞浆弱（＋）组织细胞性淋巴瘤弱（＋）鉴别naiveT细胞和记忆T细胞CD45RO：记忆T细胞CD45RA：naiveT细胞第44页,共117页，2024年2月25日，星期天2.T细胞亚型抗原

（1）CD1A正常细胞：皮质胸腺细胞（＋）郎罕氏细胞（＋）肿瘤：很多胸腺T淋巴瘤和白血病（＋）郎罕氏细胞组织细胞增生症（＋）第45页,共117页，2024年2月25日，星期天（2）CD455kD，出现于大部分T辅助/诱导细胞。胸腺皮质：胸腺细胞复合表达CD4，CD8，T6胸腺髓质：胸腺细胞丢失T6，分别表达CD4，CD8。也见于单核/巨噬细胞第46页,共117页，2024年2月25日，星期天表达T4抗原的肿瘤：多数皮肤T细胞淋巴瘤，包括蕈样霉菌病HTLV-I相关成人T细胞白血病/淋巴瘤部分T细胞急性淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤*在淋巴母细胞性淋巴瘤中，T8抗原也可存在于肿瘤细胞。第47页,共117页，2024年2月25日，星期天（3）CD833kD，表达于人抑制/细胞毒T细胞周围淋巴组织中CD8＋T细胞（滤泡间区域）仅占T细胞15-20%骨髓和胃肠道上皮80%T细胞是CD8＋大部分皮质胸腺细胞和约30%髓质胸腺细胞CD8＋第48页,共117页，2024年2月25日，星期天（四）NK细胞

1.CD56（NCAM-1）神经细胞粘附分子（NCAM）表达于：大部分神经外胚层源性细胞株，组织和肿瘤（视神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形胶质细胞瘤和神经母细胞瘤）中胚层源性肿瘤：横纹肌肉瘤NK细胞第49页,共117页，2024年2月25日，星期天2.CD57110kD表达于7-35%正常外周血淋巴细胞：NK细胞CD8＋外周血抑制/细胞毒T细胞也表达于部分神经组织粒细胞、血小板、红细胞和胸腺细胞阴性。第50页,共117页，2024年2月25日，星期天3.CD16（Leu-11）正常细胞：NK细胞粒细胞表达于许多NK细胞增生性疾病第51页,共117页，2024年2月25日，星期天（五）粒细胞和单核吞噬细胞

1.CD11c（Leu-M5）正常细胞：表达于粒单核细胞第52页,共117页，2024年2月25日，星期天肿瘤：毛细胞白血病（＋）单核细胞样B细胞淋巴瘤（＋）少数B-SLL/CLL（＋）少数T细胞淋巴瘤（＋）一些粒细胞白血病，特别是M4和M5（＋）郎罕氏细胞组织细胞增生症（＋）第53页,共117页，2024年2月25日，星期天2.CD15（Leu-M1）寡糖外周血：中性粒细胞阳性单核细胞弱阳性淋巴细胞和血小板阴性树突网状细胞阳性单核/巨噬细胞阴性第54页,共117页，2024年2月25日，星期天霍奇金淋巴瘤R-S细胞强表达（除外淋巴细胞为主型，仅小部分阳性）大部分非霍奇金淋巴瘤阴性。第55页,共117页，2024年2月25日，星期天3.α1-AT，α1-ACT，

lysozyme单核细胞/巨噬细胞（+）粒细胞（+）第56页,共117页，2024年2月25日，星期天4.CD68跨膜糖蛋白，110kD多种巨噬细胞阳性：包括枯否氏细胞，脾红髓、胃肠道固有层、肺腺泡和骨髓的巨噬细胞。抗原呈递细胞，如郎罕氏细胞（－）或弱（＋）。浆细胞样T细胞阳性（见于反应性淋巴结，被认为是单核/巨噬细胞源性）第57页,共117页，2024年2月25日，星期天慢性和急性粒细胞性白血病：胞浆阳性。少数真性组织细胞性肿瘤阳性。正常和肿瘤性肥大细胞阳性。恶性黑色素瘤：不同数量细胞阳性。淋巴细胞源性肿瘤阴性，但一些B细胞淋巴瘤（小淋巴细胞性淋巴瘤和毛细胞白血病）胞浆弱阳性。第58页,共117页，2024年2月25日，星期天5.S-100蛋白正常细胞：郎罕氏细胞（+）交指（IDRC）和有些滤泡树突状细胞（+）造血组织疾病：郎罕氏细胞组织细胞增生症（+）IDRC肿瘤（+）少数T细胞淋巴瘤（+）第59页,共117页，2024年2月25日，星期天6.MAC387α（12kD）和β（14kD）亚单位组成胞浆抗原，表达于：粒细胞血单核细胞各组织的组织细胞：如浸润性或反应性组织细胞，腺泡巨噬细胞，肿瘤浸润巨噬细胞，窦组织细胞，上皮样巨细胞和组织细胞增生症X和皮病性淋巴结病的组织细胞。第60页,共117页，2024年2月25日，星期天生发中心巨噬细胞（－）很多皮肤和扁桃体活检的鳞状上皮（＋），但其他上皮（－），包括各类腺上皮。第61页,共117页，2024年2月25日，星期天7.MPO用于鉴别淋巴细胞性和粒细胞性白血病第62页,共117页，2024年2月25日，星期天（六）其他

1.EMA浆细胞阳性造血组织肿瘤：表达于霍奇金淋巴瘤（主要为NLPHL）浆细胞肿瘤很多间变性大细胞淋巴瘤一些其他B和T大细胞淋巴瘤第63页,共117页，2024年2月25日，星期天2.BNH9人红细胞相关抗原H（1，2，4型）和Y（2型）正常组织：上皮组织：腺上皮和鳞状上皮，包括外、中、内胚层来源。非上皮组织：红细胞、红母细胞、巨核细胞和内皮细胞第64页,共117页，2024年2月25日，星期天肿瘤细胞：50%间变性大细胞淋巴瘤,且多数EMA(+)<5%霍奇金淋巴瘤(除外淋巴细胞为主型，21%)6%其他类型非霍奇金淋巴瘤（B、T，低度和高度恶性）50%癌软组织肿瘤：血管肉瘤（包括卡波西肉瘤）和滑膜肉瘤第65页,共117页，2024年2月25日，星期天3.LMP60kD膜蛋白，由EBV的BNLF1基因编码。强阳性：EBV（+）的淋巴母细胞样细胞株传染性单核细胞增多症中EBV感染的B免疫母细胞不典型淋巴细胞增生免疫缺陷患者发生的多形性B细胞感染第66页,共117页，2024年2月25日，星期天其他阳性病变25-50%EBV相关的鼻咽未分化癌90%EBV相关的霍奇金淋巴瘤20-30%CD30＋间变性大细胞淋巴瘤急性传染性单核细胞增多症多种类型外周T细胞淋巴瘤阴性：EBV（+）的Burkitt淋巴瘤弱阳性平滑肌，包括血管第67页,共117页，2024年2月25日，星期天4.CD99（p30/32mic2）MIC2基因产物。该基因位于染色体X和Y的短臂上。正常细胞：一些淋巴细胞（骨髓、淋巴结和脾）皮质胸腺细胞卵巢颗粒细胞大多数Langerhan胰岛细胞CNS室管膜细胞第68页,共117页，2024年2月25日，星期天睾丸Sertoli细胞部分血管内皮细胞肿瘤细胞：淋巴母细胞性淋巴瘤和粒细胞肉瘤（+）ES/PNET瘤细胞表面强表达，用于和其他小圆细胞肿瘤鉴别。CNS胶质母细胞瘤和室管膜瘤阳性。胰岛细胞肿瘤阳性。第69页,共117页，2024年2月25日，星期天5.ALK-1间变性大细胞淋巴瘤可见若干种染色体易位，几乎都累及定位于2号染色体的一种酪氨酸激酶—ALK（ALCLkinase）。t(2；5)(p23；q35)易位最常见，涉及的partnergene为NPM（nucleophosmingene）。该易位产生融合基因NPM-ALK。正常ALK蛋白，表达限于中枢神经系统（散在神经元，胶质细胞和内皮细胞）；正常淋巴细胞不表达。第70页,共117页，2024年2月25日，星期天单抗ALK-1可识别正常ALK蛋白(200kD）和易位产生的不同融合蛋白，如NPM-ALK蛋白（80kD）。由此用于诊断ALCL。各种易位导致ALK阳性分布不同易位PartnerGene发生率ALK阳性分布t(2;5)Nucleophosmin75%胞浆/核t(1;2)Tropomyosin310-20%胞浆t(2;3)TRKfusedgene(TRG)2-5%胞浆Inv2ATIC(purHgene)2-5%胞浆t(2;22)Clathrinheavychain2-5%胞浆/颗粒第71页,共117页，2024年2月25日，星期天目前RT-PCR法所用引物为NPM-ALK特异，故不能检测其它易位。因而免疫组化方法检测ALK诊断ALCL更具优势。ALCL好发于儿童和青年。年长的ALCL病例t（2；5）和ALK常常阴性。ALK阳性的ALCL，预后佳。第72页,共117页，2024年2月25日，星期天存在问题：有报道，t（2；5）NPM/ALK可能无ALCL特异性，阳性可见于周围T细胞淋巴瘤和T免疫母细胞性淋巴瘤（RT-PCR法）15-20%T/nullALCL见ALK阴性。有人认为这些病例更宜归类为“周围T细胞淋巴瘤，非特殊性，间变变异型（anaplasticvariant）”第73页,共117页，2024年2月25日，星期天6.TIA-1（T细胞胞内抗原-1）17kD，一种胞浆颗粒相关蛋白，表达于有溶细胞潜能的细胞（CTL和NK细胞），又称GMP-17。和perforin、granzymeB同属细胞毒颗粒蛋白。与FAS（CD95）调节的凋亡有关造血细胞：90%CD16＋，50-80%CD8＋，<10%CD4＋正常外周血淋巴细胞（+）第74页,共117页，2024年2月25日，星期天几乎所有单核细胞和粒细胞（+）CD4＋活化T细胞株（＋）活化NK细胞株（＋）ConA活化的胸腺细胞（＋）B淋巴细胞和B细胞株（－）肿瘤：表达于细胞毒相关T细胞肿瘤和NK细胞肿瘤皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤（＋）肠病型肠道T细胞淋巴瘤（＋）第75页,共117页，2024年2月25日，星期天肝脾γδT细胞淋巴瘤（＋）很多γδ周围T细胞肿瘤和NK细胞肿瘤都表达细胞毒颗粒蛋白TIA-1、perforin、和granzymeB，但肝脾γδT细胞淋巴瘤仅有TIA-1（＋）。间变性大细胞淋巴瘤（＋）有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别鼻及鼻型NK/T细胞淋巴瘤也有表达第76页,共117页，2024年2月25日，星期天7.Perforin（穿孔素）66kD或70kD，产生于溶细胞性淋巴细胞，并储存于这些细胞的胞浆颗粒中。在靶细胞膜上形成跨膜孔道，导致膜完整性丧失，细胞裂解。其释放过程和裂解功能依赖Ca2＋。参与细胞毒T细胞诱导凋亡机制。人和鼠perforin基因定位于10号染色体。第77页,共117页，2024年2月25日，星期天表达具杀伤细胞特异性。大多数NK细胞株，CD8＋CTL株（＋）人CD3－，CD56＋的NK细胞，CD3＋的大颗粒淋巴细胞和γδT细胞（＋）肿瘤皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤（＋）肝脾γδT细胞淋巴瘤（－）表明瘤细胞功能上属非成熟性γδT细胞，不能诱导凋亡和坏死，不能释放细胞毒蛋白。间变性大细胞淋巴瘤（＋）有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别鼻及鼻型NK/T细胞淋巴瘤可有表达第78页,共117页，2024年2月25日，星期天8.HLA-DR人组织相容性复合物ClassII基因至少有四个区域：HLA-DP，-DO，-DR一条α链，一条β链主要标记B细胞，指状突网状细胞，郎罕氏细胞和巨噬细胞。少数上皮细胞，活化T细胞和纤维母细胞样细胞（可能相当于树状突细胞）也有反应。第79页,共117页，2024年2月25日，星期天胸腺：整个皮质的上皮细胞网（＋）B和T非霍奇金淋巴瘤（＋）周围血：B细胞和大部分单核细胞（＋）正常T细胞（－）活化T细胞（＋）第80页,共117页，2024年2月25日，星期天9.bcl-2正常细胞：表达于非生发中心B细胞大多数T细胞浆细胞肿瘤：过度表达于大多数滤泡性淋巴瘤和一些弥漫性大B细胞淋巴瘤也表达于很多其他淋巴瘤和白血病第81页,共117页，2024年2月25日，星期天10.Ki-67表达于细胞周期G0期外的细胞与淋巴瘤分级有关第82页,共117页，2024年2月25日，星期天11.CyclinD1分D1、D2和D3亚型，有组织特异性，相互间同源性达53.1-63.5%编码基因定位氨基酸数CyclinD1CCND111q13295CyclinD2CCND212q13290CyclinD3CCND36p21292第83页,共117页，2024年2月25日，星期天绝大多数套细胞淋巴瘤发生t（11；14）（q13；q32）易位，导致CCND1（bcl-1或PRAD1）基因过度表达，从而使cyclinD1蛋白表达过度。故套细胞淋巴瘤cyclinD1（＋），并可同阴性的滤泡性淋巴瘤和小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病鉴别。第84页,共117页，2024年2月25日，星期天12.CD25T细胞生长因子受体或IL-2，单多肽链，分子量55kD，有时也称为Tac抗原。该受体在活化的T细胞，HTLV-1＋和HTLV-2＋T细胞株强表达，活化B细胞弱表达。周围淋巴组织T区和生发中心亮区淋巴细胞不同程度阳性。第85页,共117页，2024年2月25日，星期天生发中心巨噬细胞弱阳性，窦区巨噬细胞强阳性。胸腺：仅在髓质见散在阳性细胞，皮质阴性。正常周围血CD25＋细胞<5%。第86页,共117页，2024年2月25日，星期天13.CD34正常细胞：Progenitorcell内皮细胞肿瘤：一些粒细胞白血病一些淋巴母细胞性白血病第87页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--RED标记公司产品名稀释度CD8Dako(m)M7103CloneC8/144B1:100CD15VentanaCat#250-2604预稀释CD19BD3475404G71:25CD20Dako(m)M0755CloneL261:400CD30Dako(m)M0751BerH21:50CD42bNovocastra(m)GP1bnn2/1741:100LambdaVentana(R)250-2515(50)δ-Lambda(Poly)预稀释S-100Dako(R)Z3111:2000第88页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--DAB(1)标记公司产品名稀释度CD1aImmunotechCat#IM1590预稀释CD3Dako(R)A04521:100CD4Ventana(m)Cat#250-2712预稀释CD5CellMarque(m)CNC016Clone4C71:50CD8Dako(m)M7103CloneC8/144B1:100CD10CellMarque(m)CMC041Clone2701:25CD15Ventana(m)Cat#250-25041:25CD19BD(m)Cat#347540Clone4G71:25第89页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--DAB(2)标记公司产品名稀释度CD20Dako(m)M0755

Clone1.261:400CD23Ventana(m)Cat#250-2717预稀释CD25Neomarkers(m)Cat#MS-203-P1:200CD30Dako(m)M0751BerH21:50CD31Dako(m)M0823CloneJC/70A1:40CD34Immunotech(m)786QBEND101:50CD42bNovocastra(m)GP1bnn2/1741:100第90页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--DAB(3)标记公司产品名稀释度CD43Dako(m)M0786

DF-T11:40CD45Dako(m)M7012B11&PD7/261:100CD45RAVentana(m)250-2510Clone148预稀释CD45ROVentana(m)250-2563CloneA6预稀释CD56CoulterNKH11:20CD57Bec/Dick(m)347390Leu71:10CD68Dako(m)M36011:200第91页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--DAB(4)标记公司产品名稀释度CD79αDako(m)M70511:20CD99Dako(m)M3601CloneMIC21:50CD117Dako(R)A4502CloneMIC21:400ALK蛋白Dako(m)M71951:20抗-胰酶Vital(m)12025CloneG19961:20bcl-2Dako(m)M887Clone1241:10bcl-6Dako(m)M7221ClonePG-B6p1:10CathepsinDCiba-Corning(m)Cath-D1:20第92页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--DAB(5)标记公司产品名稀释度Cyclin-D1Dako(m)M71551:40DBA-44Immunotech(m)Cat#1069CloneDBA-44预稀释颗粒酶ChemiconMAB30701:40血型糖蛋白-ADako(m)M08191:200HLA-DRDako(m)M775CR3/431:50IgASignet(R)410-13预稀释IgGSignet(R)411-13预稀释IgMSignet(R)414-13预稀释第93页,共117页，2024年2月25日，星期天Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用--DAB(6)标记公司产品名稀释度KappaVentana(R)250-2514(50)δ-kappa(Poly)预稀释LambdaVentana(R)250-2515(50)δ-kappa(Poly)预稀释MacrophageDako(m)M8141:200MIB-1Immunotech(m)..0515CloneMIB-11:50MPODako(R)A-3981:500MPODako(m)M7481:100p-53BioGenex(m)D071:200TdtDako(R)A35241:10第94页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(1)抗体制备特异性CD1a石蜡皮质胸腺细胞CD1a冰冻，涂片，Cytopreps皮质胸腺细胞CD2冰冻，涂片，CytoprepsT细胞CD3（UCHT1）冰冻，涂片，CytoprepsT细胞CD3石蜡T细胞CD4（OPD4）石蜡T细胞，辅助/诱导CD4冰冻，涂片，CytoprepsT细胞，辅助/诱导第95页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(2)抗体制备特异性CD5（4C7）石蜡T&B亚型CD5冰冻，涂片，CytoprepsT细胞CD7冰冻，涂片，CytoprepsT、NK细胞CD8（C8/144B）石蜡T细胞，抑制/细胞毒CD8冰冻，涂片，CytoprepsT细胞CD10（calla）冰冻，涂片，Cytopreps淋巴母细胞CD11c冰冻，涂片，Cytopreps巨噬细胞、毛细胞第96页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(3)抗体制备特异性CD13冰冻，涂片，Cytopreps髓样细胞CD14冰冻，涂片，Cytopreps单核细胞CD15（LeuM-1）石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps中性粒细胞，粒细胞相关CD19冰冻，涂片，CytoprepsB细胞CD20（B-Ly1）冰冻，涂片，CytoprepsB细胞CD22石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsB细胞第97页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(4)抗体制备特异性CD23冰冻，涂片，CytoprepsB细胞CD25冰冻，涂片，Cytopreps白介素-2受体CD30（Ki-1）石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps活化T&B细胞CD31石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps内皮细胞CD33冰冻，涂片，Cytopreps单核细胞，髓样细胞CD34（Qbend10）石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps髓样和淋巴细胞progenitor第98页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(5)抗体制备特异性CD35（DRCI）冰冻，涂片，Cytopreps树突网状细胞CD38冰冻，涂片，CytoprepsT细胞CD42b石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps血小板糖蛋白CD43石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsT细胞CD45（LCA）石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps白细胞共同抗原CD45R0（UCHL-1）石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsT，B细胞亚型第99页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(6)抗体制备特异性CD45RA（4KB5）石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsB、M、T细胞亚型CD45RA（MT2）石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsB，T细胞亚型CD56（123c3）石蜡，冰冻小细胞肺癌/NCAMCD56（NKH-1）石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsNK细胞CD57石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsNK细胞CD61冰冻，涂片，Cytopreps血小板糖蛋白IIIa第100页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(7)抗体制备特异性CD71冰冻，涂片，Cytopreps转铁蛋白受体CD74石蜡，冰冻B细胞CD79α石蜡，冰冻，涂片，CytoprepsB细胞CD99石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps尤因肉瘤/细胞膜CD103冰冻上皮内淋巴细胞亚型抗-胰酶石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps肥大细胞ALK-1石蜡ALCL第101页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(8)抗体制备特异性BerEP4石蜡胞浆血型糖蛋白A石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps红细胞内的血型糖蛋白AHLA-DR（CR3/43）石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps人组织相容性基因Kappa石蜡，IF细胞膜-胞浆KBA-62石蜡，冰冻细胞膜/恶黑Lambda石蜡，IF细胞膜-胞浆MDRM（JSB-1）石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps膜糖蛋白第102页,共117页，2024年2月25日，星期天AntibodiesUsedInTheJCMLLab(9)抗体制备特异性MPO

多抗单抗石蜡涂片，Cytopreps血中性粒细胞和单核细胞，骨髓粒细胞前体TdT石蜡