实验一光学显微镜的使用和动物细胞的形态结构

关于实验一光学显微镜的使用和动物细胞的形态结构光学显微镜和它拍摄的图片第2页,共25页，2024年2月25日，星期天

熟悉光学显微镜基本结构和用途；掌握显微镜维护的基本知识；初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法；掌握标本制备的方法第3页,共25页，2024年2月25日，星期天实验材料与用品材料：生物玻片标本用品：普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、擦镜纸、乙醚酒精、香柏油。第4页,共25页，2024年2月25日，星期天一、显微镜的使用1.显微镜的结构第5页,共25页，2024年2月25日，星期天第6页,共25页，2024年2月25日，星期天机械部分镜座镜柱镜臂镜筒物镜转换器标本推进器载物台标本推进器螺旋调焦螺旋第7页,共25页，2024年2月25日，星期天光学部分目镜：10×（放大倍数）物镜：红，4×黄，10×蓝，40×白，100×目镜物镜10/0.25:放大倍数/数值孔径（分辨率）160/0.17:物镜长度/允许盖玻片厚度第8页,共25页，2024年2月25日，星期天照明部分灯光：光源光圈（光阑）：控制光束大小

调节亮度光圈灯光聚光镜聚光镜：将平行光汇聚在物镜，

可得均匀亮度

升高与降低聚光镜如何调节观察视野的明暗度？第9页,共25页，2024年2月25日，星期天2.显微镜的使用方法低倍镜的使用：（1）取镜：右手握镜臂左手托镜座，（2）置镜：实验台正位偏左，距桌边5cm；（3）对光：打开光源，调整粗准焦螺旋，使载物台与物镜分开，转动物镜转换器将低倍镜对准通光孔，确认聚光镜上升、光圈打开，向目镜观察，看到明亮视野；第10页,共25页，2024年2月25日，星期天（3）装玻片标本：移开物镜，将玻片标本放于载物台，标本推进器固定，旋转标本推进器旋钮，调整标本目标对准聚光镜正上方；（4）调焦：低倍镜对准标本目标，侧面观察并调节粗准焦螺旋，至标本与物镜相距0.5cm处停止，再观察目镜并调整粗准焦螺旋转动载物台下降，直至物像清晰，可用细准焦螺旋调整。第11页,共25页，2024年2月25日，星期天高倍镜的使用：（1）先在低倍镜下找到目标物，移动至视野中央；（2）不动调焦螺旋，从侧面观察物镜，转动物镜转换器，切换到高倍镜下，使高倍镜对准通光孔；（3）从目镜下观察，调整视野亮度，转动细准焦螺旋直至出现清晰的物像；第12页,共25页，2024年2月25日，星期天第13页,共25页，2024年2月25日，星期天二、临时制片1.人口腔粘膜上皮细胞（涂片）

漱口→擦片（载玻片盖玻片各一张）→取材→

涂片（单方向一次性）→甲苯胺蓝染色（1min）

→盖片→镜检

注意事项：取材注意力度

单方向一次性涂片

盖片应避免气泡产生第14页,共25页，2024年2月25日，星期天口腔粘膜上皮细胞第15页,共25页，2024年2月25日，星期天人口腔上皮细胞扁平上皮细胞第16页,共25页，2024年2月25日，星期天生物绘图1.用铅笔（HB/2H）硬度稍高2.选择典型结构绘图，特征、比例等3.线、点绘图：线绘制轮廓，要平滑；点的疏密表示颜色深浅，点要圆，垂直点点。4.标注结构，文字标右侧5.图名称标在图的正下方，标注放大倍数6.无需边框第17页,共25页，2024年2月25日，星期天生物绘图注意事项1.表现形式只有点和线，不能涂阴影。2.对各个部位要加以说明。3.引线要平行，前端可以不对齐，后端一定要对齐。4.绘图用普通铅笔，不能用彩色铅笔。第18页,共25页，2024年2月25日，星期天2.蛙血细胞（推片）

擦片（载玻片两张）→牛蛙处死（双毁髓）→解剖→心脏采血→滴片→推片→晾干→镜检第19页,共25页，2024年2月25日，星期天重点：大小、位置、角度、速度第20页,共25页，2024年2月25日，星期天双毁髓法以左手握住蛙，背部向上，用食指压住其头部，使其略向下弯，将毁髓针自枕骨大孔插入，先左右横断脊髓，再向前伸入颅腔捣毁脑，然后再将毁髓针撤回至枕骨大孔，反向插入脊椎管破坏脊髓，检查蛙四肢肌肉完全松弛后处死成功。第21页,共25页，2024年2月25日，星期天细胞膜细胞质细胞核蛙红细胞示意图第22页,共25页，2024年2月25日，星期天3.脊髓前角运动神经细胞的制备和观察取脊柱剪去多余的肌肉和结缔组织掰开脊柱，剪下一小段脊髓

压片甲苯胺蓝染色5分钟

盖片吸去多余染液观察重点：压片量、力量均匀、不可滑动、云雾状第23页,共25页，2