消毒与灭菌效果监测方法简介

关于消毒与灭菌效果监测方法简介

在消毒与灭菌效果监测方法中，研究最多、应用较普遍的为压力蒸汽、电离辐射与环氧乙烷三大灭菌技术灭菌效果的监测方法。对紫外线与其它化学消毒剂消毒效果的监测方法也有研究与应用。除电离辐射外，其它方法消毒与灭菌效果的监测，在医院中较常见。第2页,共35页，2024年2月25日，星期天方法可归纳为4类：

1.仪表监测

2.化学监测

3.生物监测

4.程序监测第3页,共35页，2024年2月25日，星期天1仪表监测

通过仪表测定有关参数，间接了解是否可达到消毒或灭菌的要求。第4页,共35页，2024年2月25日，星期天1.1常用仪表温度计(留点温度计)压力计(负压压力计)湿度计压力、温度、时间自动记录仪紫外线强度计电离辐射强度计电离辐射剂量仪乙醇水溶液比重计水中臭氧检测仪第5页,共35页，2024年2月25日，星期天1.2注意事项

(1)用前应校正或定期校正

(2)布放于有代表性部位第6页,共35页，2024年2月25日，星期天2化学监测

根据化学物质的物理化学变化，测知杀菌因子的剂量，间接判断是否达到消毒或灭菌的效果。

第7页,共35页，2024年2月25日，星期天2.1监测对象

压力蒸汽灭菌

干热灭菌

紫外线强度

电离辐射剂量

化学消毒剂第8页,共35页，2024年2月25日，星期天2.2指示材料

2.2.1压力蒸汽灭菌常用指示材料

化学指示胶带(签)

化学指示卡(管)

综合性化学指示剂

(移动式化学指示剂)

化学指示试纸

BD试验指示图第9页,共35页，2024年2月25日，星期天2.2.2干热灭菌常用指示材料

化学指示剂

移动式化学指示剂第10页,共35页，2024年2月25日，星期天2.2.3化学消毒剂常用指示材料

环氧乙烷指示卡

蒸汽-甲醛气体灭菌化学指示剂

空气臭氧浓度检测仪(管)

消毒剂浓度试纸

戊二醛浓度监测卡(管)第11页,共35页，2024年2月25日，星期天2.2.4其它指示材料

紫外线强度指示卡

电离辐射指示剂第12页,共35页，2024年2月25日，星期天2.3监测方法

2.3.1压力蒸汽灭菌监测

硫磺管、苯甲酸管不能用

BD试验每天一次，用30cm×25cm

×25~28cm布巾包

每包外用胶带、内放卡第13页,共35页，2024年2月25日，星期天美国医疗器械改进协会规定：

①每包外用胶带、内放卡

②每天第一次用预真空压力蒸

汽灭菌器时，BD试验第14页,共35页，2024年2月25日，星期天2.3.2干热或消毒剂气体灭菌监测

将化学指示剂放于包中央

布放于最难达到灭菌的部位

(或消毒器内各层中央与四角)

第15页,共35页，2024年2月25日，星期天2.3.3紫外线强度监测

开灯照5min后无异常

置卡于灯中央下方垂直1m处

照射1min

避免日光直射到卡第16页,共35页，2024年2月25日，星期天2.3.4消毒液浓度监测

试纸浸湿后0.5~1.0min比色

第17页,共35页，2024年2月25日，星期天3生物监测

在监测灭菌效果时，用菌的存活与否直接证明是否达到要求。在监测消毒效果时，用测定对菌的杀灭率判断是否达到要求。第18页,共35页，2024年2月25日，星期天3.1基本要求

灭菌用菌片(5×105~5×106cfu/片）

消毒用菌片或菌悬液(菌药混合液

中含菌量5×105~5×106cfu/ml)

第19页,共35页，2024年2月25日，星期天

不同灭菌方法的效果监测，应采用不同的菌种，

并对其抗力有一定要求。

灭菌生物D值存活时间杀灭时间

方法指示剂(min)(min)(min)

压力蒸汽嗜热脂肪杆菌(121℃±0.5℃饱

灭菌(ATCC7953)芽胞和蒸汽条件下)

1.3~1.9≥3.9≤19.0

干热灭菌枯草杆菌黑色变种(160℃±5℃

(ATCC9372)芽胞条件下)

1.3~1.9≥3.9≤19.0

环氧乙烷枯草杆菌黑色变种(EO600mg/L±30mg/L,54℃

灭菌(ATCC9372)芽胞±2℃,RH60%±10%条件下)

2.5~5.8≥7.5≤58.0

第20页,共35页，2024年2月25日，星期天3.2监测方法

3.2.1压力蒸汽灭菌监测

单片菌片装于牛皮纸袋中

放入标准测试包(30cm×30cm×25cm)

中央或最难透汽处(2片/包)，同时

放化学指示卡

置于灭菌器近排气口处(上方)

灭菌后，接种于溴甲酚紫蛋白胨培养

液中，56℃培养7d(24h初步看)

设阴性、阳性对照

第21页,共35页，2024年2月25日，星期天

美国医疗器械改进协会规定生物指示剂应在下列情况下使用:

(1)新灭菌器装置后检查

(2)灭菌器大修后验收

(3)常规监测每周(最好每天)1次

(4)灭菌人体移植器材(待培养结果阴性后，

器材才可使用)

(5)周期性质量检测

第22页,共35页，2024年2月25日，星期天美国所用标准测试包分两种：

吸水手术巾包

混装包第23页,共35页，2024年2月25日，星期天吸水手术巾包：

含16条吸水手术巾，外包以双层布

23cm×23cm×15cm(1.5kg)

生物指示剂放于8与9条手术巾间中央

同时放化学指示卡于其侧

第24页,共35页，2024年2月25日，星期天

混装包：含棉布手术衣3件以上，吸水手术巾12条，30个纱布方，5个纱布卷，一条手术大单，外以布包两层。

30cm×30cm×50cm(4.5~5.5kg)

生物指示剂放于包中央

同时将化学指示卡放于其上方或下方隔一手术巾处第25页,共35页，2024年2月25日，星期天3.2.2干热或消毒剂气体灭菌监测

干热菌片装入无菌试管(1片/管)

布于消毒器内各层对角线内、外角(2管/点)

消毒剂菌片装入布(纸)袋

布于器内各层最难达到灭菌处(或中央与

四角)的物品中间

灭菌后，接种于营养肉汤中(消毒剂需含中和剂)，

37℃培养7d(3d初步看)

设阴性、阳性对照

第26页,共35页，2024年2月25日，星期天3.2.3物品(手)表面消毒效果监测

物品、手表面可染试验菌或用其含自然菌

(1)物理因子或消毒剂气体：

菌片放入无菌平皿中(2片/皿)，小型染菌物品

直接布放

消毒器每层布放2份(内、外)~5份(中央、四角)

(2)消毒液：

平皿或适当容器盛消毒液

菌片或小型染菌物品(手)浸泡消毒液中

对大型染菌物品表面喷消毒液

消毒后，对菌片或涂抹采样作活菌计数

设阳性(不消毒)、阴性对照第27页,共35页，2024年2月25日，星期天采样、活菌计数：

菌片投入含10ml采样液试管中

物品、手在采样部位用棉拭往返涂擦2次，

将棉拭头放入含10ml采样液试管中

振打试管以洗脱菌

取洗脱液培养48h

计数菌落数

计算杀灭率第28页,共35页，2024年2月25日，星期天3.2.4空气(自然菌)消毒效果监测

消毒前、后分别用平板沉降15min采样

37℃培养48h

平板直径9cm，距地面1.5m

布于中央、四角(≤30m2布中央与对角线二角)

有条件者可用FA-1型多级撞击式采样器第29页,共35页，2024年2月25日，星期天3.2.5监测消毒液微生物污染

取消毒液1.0ml

加入含9.0ml相应中和剂试管中

混匀

取0.2ml涂抹平板或0.5ml倾注琼脂混匀

20℃培养7d：霉菌

37℃培养72h：细菌总数

细菌总数(cfu/ml)=平板菌落数×20(或×50)第30页,共35页，2024年2月25日，星期天3.3注意事项

(1)检测化学消毒剂效果要用中和剂

消毒加于采样液中

灭菌加于培养基中

(2)复方中和剂应注意成分间拮抗

(3)中和剂应经试验证明合适第31页,共35页，2024年2月25日，星期天

附表XXX中和剂试验结果

组别平均菌数(cfu/ml)

消毒剂+菌液(片)0

4.50.5

[消毒剂+菌液(片)]+中和剂20

0.54.5

中和剂