果蝇性状、生活史观察及饲养

实验十二、果蝇的性状、生活史观察及饲养（3学时）一、实验目的1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。二、实验材料、用具及试剂果蝇：野生型，白眼黑身，白眼小翅，红眼残翅，黑檀体。双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、新毛笔、乙醚、酒精三、实验内容1.果蝇的生活史果蝇（Drosophilamelanogaster2n=8）

中文名：黑腹果蝇果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属，与家蝇是不同的种。

果蝇的优点：

1、生活史短，20-25℃条件下完成一个世代需12-15天。

2、繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。

3、饲养方便。

4、突变率高。

5、形态容易辨认。

果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25℃。10℃15℃20℃25℃卵

幼虫8天5天幼虫

成虫57天18天6.3天4.2天从表中可以看出，25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活15天。生活史：完全变态：最适温度：20-25℃生活史周期：12-15day(20-25℃)10day(26℃)57day(10℃)羽化后：8-12h交配两天后产卵成虫存活：15day(25℃)卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，被绒毛膜，在背面的前端伸出一对触丝（filament），它能使卵附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。三龄幼虫4.5mm，在培养基上作沟穿孔。幼虫：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部，上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾液腺，透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧，精巢较大，外观上是一明显的黑点，而卵巢则较小，可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上爬行时，留下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良好。蛹：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，表明即将羽化了。

成虫：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，变为短粗圆形，双翅展开，体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈灰褐色。果蝇的寄生虫——螨虫2.形态构造头部：有一对复眼，三个单眼和一对触角。胸部：有三对足，一对翅和一对平衡棒。腹部：背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。3.成虫雌雄的鉴别雌果蝇雄果蝇体形较大体形较小腹部椭圆形，末端稍尖腹部末端钝圆腹部背面有明显的五条黑色条纹腹部背面有三条黑色花纹，前两条细，后一条宽且延续至腹面腹部腹面有明显的6个腹片(刚毛围成一圈)四个腹片无性梳第一对跗节基部的一节有性梳外生殖器外观比较简单外生殖器外观较复杂，刚羽化的幼蝇用低倍镜可明显观察到生殖弧、肛口板及阴茎4.果蝇常见的几种突变类型突变形状名称基

因

符

号形

状

特

征所在染色体白眼w复眼白色X檀黑体e体呈乌木色，黑亮IIIR黑体b体呈深色IIL残翅vg翅退化，部分残留不能飞IIR小翅m翅较短X5.果蝇的性别决定1）染色体组成果蝇为二倍体2n=8,核内有丝分裂：不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。体联会：一些特殊的体细胞中（如果蝇唾腺细胞）的染色体经多次复制却不分开，依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。染色体组：来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。连锁群：来自配子中的每条染色体及其携带的基因。2）果蝇的性别决定果蝇的性别决定为XY型，Y染色体在性别决定上不起作用，只与育性有关。含有Y染色体，可产生正常的配子，不含Y染色体，则配子不育。性别决定与性比值（性指数）有关。X/A=1则为雌性；X/A=0.5则为雄性。X/A＞1，为超雌；X/A＜0.5，则为超雄；0.5＜X/A＜1则为中间性。雌雄基因平衡理论：果蝇X染色体上有很多雌性基因，常染色体上有很多雄性基因，Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因，因此性别决定于基因的平衡。3）果蝇的连锁群X染色体上有141个基因；第2染色体上有228个基因；第3染色体上有156个基因；第4染色体上有12个基因。4)同源染色体：来源相同、结构相似、控制的性状相同，在减数分裂中配对的一对染色体。四、实验步骤1.果蝇的饲养1）培养基的配制果蝇以酵母菌为食，常采用发酵的培养基繁殖酵母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本实验采用玉米培养基，其配方如下：果蝇培养基成份（100ml）水80ml玉米粉8.25g糖6.2g琼脂0.62g丙酸0.5ml酵母少许配制方法玉米粉配制时先将水分成两份：一份用于溶解琼脂和糖，另一份煮玉米粉，待两份分别溶解煮好后再合到一起煮沸，关掉火后再加入丙酸，这时的培养基很粘稠，要充分搅拌后再分装培养瓶。待培养基冷却后，在培养基的表面洒上一层酵母粉，插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥场所。注：分装前将饲养瓶、棉塞、吸水纸及其它用具和器皿高压蒸气灭菌（15磅，15min）。分装时若瓶口较小，用大漏斗将饲料倒入，勿使饲料粘附瓶壁。若无干酵母粉，可于饲料分装后滴几滴酵母液于饲料表面。待饲料冷却后，用酒精棉球或吸水纸将瓶壁上的水汽擦净，塞上棉塞。

培养瓶的灭菌准备灭菌的培养瓶准备灭菌的棉塞准备灭菌的滤纸包好的棉塞灭菌锅121℃20min配制好的培养基2）果蝇继代培养

将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。转移时要注意转移的手法，不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出。一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶，使其飞入带有新培养基的培养瓶准备转移果蝇的亲本及培养基果蝇的转移幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。2果蝇性状的观察1）果蝇的麻醉处理

在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下：（1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。（2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。（3）滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，迅速将两瓶塞住，约30s，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。注意不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45º角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。（4）将麻醉后的果蝇放在白瓷板或白纸板上，用毛笔刷移动检查，根据需要用肉眼、放大镜或解剖镜观察。不再用的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死，防止品系间混杂。转移到麻醉瓶中观察结果麻醉时转移果蝇手法果蝇的麻醉

滴加乙醚的方法果蝇的麻醉剂死亡果蝇的标志死亡果蝇的标志2）果蝇♀♂识别

♀♂个体大小腹纹53腹部末端尖圆性梳无有果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别果蝇♀♂识别3）突变性状的观察果蝇性状观察3、眼睛的颜色2、翅的大小1、身体的颜色残翅野生型小翅黑檀体白眼红眼残翅白眼小翅白眼小翅白眼小翅黑身白眼白眼wX染色体白眼w，小翅m,X染色体白眼w、小翅m、焦刚毛sn(刚毛卷曲如烧焦状)（全在X染色体）刚毛形态刚毛形态黑檀体Ebony(e)黑体(b)观察后的结果填入下表类型特征

黑身白眼小翅白眼残翅红眼黑檀体野生型体色黑色(b)正常(+)正常(+)黑色(e)正常(+)眼色白色(w)白色(w)红色(+)红色(+)红色(+)翅形正常(+)小翅(m)小翅(vg)正常(+)正常(+)刚毛形态正常(+)正常(+)正常(+)正常(+)正常(+)性状、染色体和基因型红眼（+）白眼（w）第一连锁群长翅（+）残翅（vg）第二连锁群灰身（+）黑檀体（e）第二连锁群第三连锁群长翅（+）小翅（m）第一连锁群直刚毛（+）卷刚毛（s