羊肚菌的筛选鉴定及菌种改良

关于羊肚菌的筛选鉴定及菌种改良什么是羊肚菌？Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.Clickheretoaddyourtext.羊肚菌(Morchella)，又名草笠竹，为羊肚菌属真菌统称,是一种珍贵的食用菌和药用菌。羊肚菌于1818年被发现。主要包括黑色羊肚菌和黄色羊肚菌两类。国内外一直视其为高档宴席上的佳肴,同时羊肚菌子实体还可入药,具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、提神之功能。第2页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的形态、种类与分布羊肚菌的形态羊肚菌菌盖呈不规则圆形或长圆形,菌盖长8.2～10.5cm，直径2.0~2.8cm;菌盖与菌柄离生，菌盖中空，菌柄柱状，菌柄稍膨大，中空，白色，菌柄长度3.7~4.0cm，直径1.0~1.3cm。子囊棒状，无色，每个子囊内有8个子囊孢子，纵向或重叠排列，大小为162~200μm×16.2~20.0μm;侧丝棒状，顶端膨大，大小为80.01

~112.5μm×7.5~10.0μm;子囊孢子椭圆形，无色，大小为10~16μm×7.5~12.5μm第3页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的形态、种类与分布羊肚菌的种类与分布第4页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的筛选1标本采集2标本材料的预处理3富集培养5高产菌株的筛选4纯种分离第5页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的筛选标本采集

在雨后取新长出的羊肚菌盛入清洁的牛皮纸袋或

塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、

环境条件等，以备查考。标本预处理将羊肚菌菌冠粉碎第6页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的筛选富集培养将雨后羊肚菌旁的表土至于富集培养基中富集培养富集培养基土豆200g葡萄糖2.0%蛋白胨0.2%KH2PO40.15%

MgSO40.05%琼脂1.5%纯种分离采用划线分离法、稀释分离法等纯化方法获取单菌落。第7页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的筛选高产菌株的筛选这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件，通过三角瓶的容量进行小型发酵试验，获得适合于工业生产用菌种。还要对菌种进行发酵性能测定。第8页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的鉴定羊肚菌菌种的鉴定方法主要有两种,一种是依据生理生化特征,或者对菌种进行栽培试验,等待生长出子实体后,对子实体的形态特征来进行鉴定,从而得出菌种的分类,这是经典的分类和鉴定方法。另一种是近些年来随着生物学技术的发展而出现的分子鉴定方法,这种方法可以对各个发育时期的个体、各个组织器官甚至细胞作检测,而不是单纯的根据食用菌的外表形态特征来进行分类鉴定,因而可以直接对菌种做出鉴定第9页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的鉴定经典鉴定方法肚菌菌丝分为基内菌丝和表面菌丝。表面菌丝有明显主干，生长初期为白色或淡黄色，有光泽，辐射生长，随后菌丝出现两类分枝，一类形成次级主干，形态与一级主干类似；一类分枝较短，并有部分菌丝伸入培养基内形成基内菌丝。后期，菌丝颜色逐渐加深，呈浅褐色或褐色。光学显微镜下，幼龄菌丝细而长，有隔，呈竹节状，分枝少。成熟菌丝粗，棕色，壁厚呈黑棕色，节间距较短，分枝较多，顶端膨大呈棒状，大多分枝呈锐角，少数呈直角。基内菌丝无主干，分枝多，间隔短，菌丝粗大。第10页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的鉴定分子标记鉴定方法基因组DNA提取方法以鲜子实体为材料，利用Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒提取DNA。ITS序列分析采用真菌通用引物ITS4和ITS5。测序将ITS-PCＲ产物进行纯化，纯化后的PCＲ扩增产物和引物直接测序.第11页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的菌种改良菌种活化

斜面种子培养基斜面采用PDA培养基,在无菌室中

斜面接种，25℃培养。PDA培养基土豆200g葡萄糖20g

琼脂15～20g

水1000mLpH值自然第12页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的菌种改良固体培养基的筛选培养基:①半合成培养基:PDA综合培养基

②天然培养基采用玉米粉琼脂培养基;黄

豆粉琼脂培养基;山芋粉琼脂培养基。各培养基115℃灭菌20分钟。接种后,恒温25,观察菌丝生长速度,采用菌丝长满试管的天数;菌核生长采用定性方法。第13页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的菌种改良种瓶制备将斜面菌种切成黄豆粒大小的小块接种2~3块到液体种子培养基中,300ml三角瓶装液量120ml,置于旋转式摇床上,转速150rpm,25℃培养3~4天。羊肚菌液体种子培养基

土豆10%

蔗糖3%

蛋白陈0.1%

酵母膏0.5%

KH2PO40.05%

MgSO40.05%第14页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的益处1.增强免疫作用：含有羊肚菌多糖，可促进淋巴细胞增值2.预防心脑血管疾病：含有多糖，降低胆固醇浓度，稳定血压，预防动脉粥样硬化。3.预防胃肠道疾病：含有抗生素和脂肪酸类物质，保护肠胃、消化助食。4.抗疲劳作用第15页,共17页，2024年2月25日，星期天羊肚菌的益处5.抗癌作用：羊肚菌多糖，并且羊肚菌含丰富的硒是人体红细胞谷胱甘肽过氧化酶的组成成分，可运输大量氧分子来抑制恶性肿瘤，使癌细胞失活；另方面能加强维生素E的抗氧化作用。6.羊肚菌含抑制肿瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增强机体免疫力、