两种方法诊断慢性子宫内膜炎的比较

两种方法诊断慢性子宫内膜炎的比较目的比较两种病理学诊断方法诊断慢诊断性子宫内膜炎的差异。方法获取的标本分别采用HE染色法与免疫组织化学染色联合检测CD38、CD138方法诊断慢性子宫内膜炎，比较两组诊断阳性率。结果与HE染色组诊断阳性率(3.57%)相比，免疫组织化学染色联合检测CD38、CD138组诊断阳性率(26.19%)更高，差异有统计学意义(x2=36,P<0.05)。结论与传统方法比较，采用免疫组织化学联合检测CD38、CD138方法对诊断慢性子宫内膜炎更具灵敏性和特异性。[Abstract]ObjectiveTocomparetwopathologicalmethodsofdiagnosingchronicendometritis.MethodsObtainedsamplesadoptedCD38andCD138combinedwithHEstainingmethodorwithimmunohistochemistryrespectivelytodiagnosechronicendometritis.ResultsPositiveratediagnosedbyCD38andCD138HEcombinedwithimmunohistochemistrywas26.19%whichwashigherthanthatdiagnosedbyHEstainingmethod(3.57%).Thedifferencehadstatisticalsignificance(x2=36,P<0.05).ConclusionImmunohistochemistrycombinedwithCD38andCD138todiagnosechronicendometritisismoreofsensitivityandspecificity.[Keywords]Chronicendometritis；CD38；CD138；Immunohistochemistry子宫内膜炎是妇科常见病，发病率逐年上升。子宫内膜炎具有临床表现无特异性、诊断较困难、病情易反复、为导致不孕和流产的重要原因等特点。因其诊断较困难，漏诊和误诊在临床工作中时有发生，严重时将导致不可估计的后果。因此找到切实有效的诊断方法是妇产科医生的迫切愿望。该病诊断的必备条件是在大量梭形的子宫内膜间质细胞中辨认出可能含有的浆细胞[1],但此法对浆细胞的分辨仍较困难。国外有研究表明，CD38、CD138特异的表达在浆细胞胞膜或胞质内。为此本研究通过比较HE染色法与免疫组织化学染色联合检测CD38、CD138方法诊断子宫内膜炎的差异性，以期找到更有效的诊断方法。资料与方法一般资料200例患者为2013年1月〜2013年9月间因子宫异常出血、月经失调、不孕症、反复流产、阴道异常排液等情况在山西长治医学院附属和平医院妇科门诊就诊的患者，考虑可能患有慢性子宫内膜炎而需行诊断性刮宫术明确诊断。研究方案经长治医学院附属和平医院伦理委员会批准。患者已完善必要的辅助检查，并签署知情同意书，清醒状态下在门诊行诊断性刮宫术。组织病理学标本满意标准为：术者判定组织获取量可做出组织病理学诊断。200例患者中168例取材满意。168例患者年龄24〜76岁，平均（43.3±4.2）岁，患者年龄及症状等差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。实验分组将168名患者的子宫内膜组织均分别制成三份标本并分为两组，一组为采用HE染色法组，另一组为采用免疫组织化学染色组分别两份标本检测CD38、CD138。诊断标准（1）临床表现下腹坠胀，子宫不规则出血，白带多，检查子宫稍大有触痛，约20%无症状。（2）辅助检查诊断性刮宫：先刮宫颈管，再进宫腔刮取组织送病理检查。内膜中有大量浆细胞及淋巴细胞，即可明确诊断。实验方法CD38、CD138采用免疫组化两步法检测步骤洗载玻片备用、石蜡切片、脱蜡、抗原修复、加一抗、加二抗、加SABC试剂、加显色剂（DAB显色试剂）、苏木精复染、脱水、封片、显微镜下观察。HE染色法步骤将切片脱蜡、依次于苏木素染液、稀盐酸酒精、氨水、伊红染液、75%酒精、90%乙醇、无水酒精、二甲苯中浸入并清洗，再使用中性树胶封片，镜下观察。统计学方法资料采用SPSS17.0统计软件分析，采用配对四格表资料的x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果实验结果判定标准CD38、CD138表达阳性镜下显示浆细胞的细胞膜出现黄色或棕黄色颗粒视为CD38表达阳性。CD138以细胞膜/胞质出现棕黄色为阳性。图1〜2分别显示CD38、CD138阳性表达。两者均阳性方可诊断慢性子宫内膜炎。HE染色在镜下以子宫内膜间质细胞中见到典型的浆细胞视为慢性子宫内膜炎确诊。见图3。168名患者的子宫内膜细胞取材器组所获标本分两份。免疫组织化学染色法联合检测CD38、CD138组诊断阳性率(26.19%)与HE染色组诊断阳性率(3.57%)比较，差异有统计学意义(x2=36,P<0.05),HE组诊断阳性率低于CD38、CD138联合组。可以认为CD38、CD138联合检测诊断较HE染色方法更正确率更高。见表1。3讨论子宫内膜炎是妇科常见疾病，发病率国内外报道不一，国内郑益红等［2］报道的子宫内膜活检标本中，慢性子宫内膜炎发病率占3%〜11%,国外Ekanem等［3］对140例子宫内膜活检病例进行分析，结果显示慢性子宫内膜炎占16.4%。子宫内膜炎分为急性子宫内膜炎和慢性子宫内膜炎两种。急性子宫内膜炎通常症状比较明显，进展较快，可蔓延至周围组织和脏器，甚至可发展为败血症、感染性休克、中毒性休克综合征等，危及生命。慢性子宫内膜炎大多症状轻微，全身症状不明显，但病程较长，治疗不彻底容易复发，影响女性生活质量。无论是急性子宫内膜炎，还是慢性子宫内膜炎，如果治疗不及时、不彻底，严重时影响子宫肌层，同时还可出现盆腔痛及反复发作。该病还可导致女性生殖疾病和影响产后子宫恢复。同时一旦形成慢性子宫内膜炎对身体危害较大且治疗较为困难。慢性子宫内膜炎还与女性生殖疾病密切相关。有研究表明，行体外授精-胚胎移植术反复胚胎着床后失败、不明原因的不孕不育及不明原因反复流产等均与慢性子宫内膜炎有关［4-7］。Sukhikh等［8］发现存在慢性子宫内膜炎时内膜发生的变化将会影响妊娠早期胚胎的发育。慢性子宫内膜炎发病率较高，对女性生殖健康的影响较大、范围较广，因此，慢性子宫内膜炎的诊断及早期发现和早期治疗对防治女性疾病进展和提高女性生活质量有着极其重要的意义，具有一定的临床研究价值。慢性子宫内膜炎临床表现为：不规则阴道出血或月经不规则，有时有轻微下腹痛及白带增多，不孕症。其症状不具有特异性。该疾病常因宫腔内的分泌物通过子宫颈口流出体外，而症状不明显。且本病约有20%无症状，易忽略诊断，多数是由妇科其他疾病如做诊断性刮子宫术时发现的。即使有症状的CE也可能会被忽略，因为受子宫内膜取样满意度和病理组织学检测方法所限。慢性子宫内膜炎确定诊断的可靠方法落脚在诊断性刮宫术联合组织内膜病理检查。赵健［9］在子宫内膜细胞学诊断系统中指出：慢性子宫内膜炎病理改变：在子宫内膜细胞之间，有散在淋巴细胞及浆细胞、吞噬细胞、细胞碎片等，子宫内膜细胞少见。浆细胞并不是正常子宫内膜的组成细胞，因而，浆细胞的出现是慢性子宫内膜炎的重要诊断指标［10］，但是，人们对识别子宫内膜中的浆细胞还存有一定的难度［11］。而且，常规的组织染色技术很难检测子宫内膜间质中的浆细胞［12］。传统HE法存在对浆细胞分辨困难的情况，如月经后期、早期增生的内膜、大量有丝分裂的基质细胞、以及呈浆细胞样的基质细胞。研究表明辨认浆细胞可通过切片的免疫染色法检测CD38、CD138、免疫球蛋白、VS38。而在1997年，Anthony等[13]用VS38单克隆抗体检测子宫内膜的浆细胞，结果发现VS38不仅使浆细胞着色，而且上皮和基质细胞也呈颗粒状着色，故而降低了VS38检测浆细胞的特异性。目前国内外的研究表明，正常浆细胞的主要免疫表型为：CD38、CD138等[14]。有研究显示浆细胞最特异的指标是CD138[15-16]。CD138的免疫组化适合用于检测石蜡包埋标本中的子宫内膜间质浆细胞，并改善了慢性子宫内膜炎的诊断率[17-19]。Kitaya等[17-20]也证实了CD138对子宫内膜炎中浆细胞的检测率较其他方法高，而且准确率也高，在慢性子宫内膜炎的诊断中发挥着必不可少的作用。Bhan[21]在实验中，对B细胞各个发育阶段进行了分析，发现浆细胞表面的CD38分子着色很强。1997年，Anthony等[13]使用CD38对慢性子宫内膜炎的组织中浆细胞的检测达100%。综上所述，可见CD38、CD138均对浆细胞的检测具有较高特异性。但鉴于CD38、CD138均在人体内表达、分布广泛，而各自对子宫内膜中浆细胞的检测所具有的高敏感性、特异性无定论，且目前国内外对于CD38、CD138均为单项检测的研究，故本实验将免疫组织化学染色法联合检测CD38、CD138,并与传统HE染色法用于辨别浆细胞是否存在的病理结果比较，旨在提高两者联合检测对慢性子宫内膜炎中诊断的特异性，并得出结论：采用免疫组织化学方法联合检测CD38、CD138较传统HE染色法诊断慢性子宫内膜炎价值更高。本实验研究对象选择范围界定为因症需行诊断性刮宫术并考虑病因为慢性子宫内膜炎，故范围有限，其结论仍需要大宗临床资料的研究论证。也为本实验的不足之处。[参考文献]BayerGIB，KorourianS.Plasmacellsinchronicendometritisareeasilyidentifiedwhenstainedwithsyndecan-1[J].ModPathol，2001，14（9）：877-879.[2]郑益红，雷英.CD38和CD138在慢性子宫内膜炎病理诊断中的应用及临床意义[J].实用心脑血管病杂志，2013，12（21）：45-46.EkanemIA，EkanemAD.EndometrialpathologyassociatedwithinfertilityamongNigerianwomen[J].NigerPostgradMed，2006，13（4）：344-347.JohnstonMEB，HartnettJ，EngmannLL，etal.Chronicendometritisisafrequentfindinginwomenwithrecurrentimplantationfailureafterinvitrofertilization[J].FertilSteril，2010，5（93）：437-441.KitayaK，YasuoT.AberrantexpressionofselectinE，CXCL1，andCXCL13inchronicendometritis[J].ModPathol，2010，4(23)：1136-1146.[6]KitayaK.Prevalenceofchronicendometritisinrecurrentmiscarriages[J].FertilSteril，2011，8(95)：1156-1158.KitayaK，TadaY，TaguchiS，etal.Localmononuclearcellinfiltratesininfertilepatientswithendometrialmacropolypsversusmicropolyps[J].HumReprod.2012，9(27)：3474-3480.SukhikhGT，ShurshaAV，VeryasovVN.Immunomorphologicalcharacteristicsofendometriuminwomenwithchronicendometritis[J].BullExpBiolMed，2006，141(1)：104-106.[9]赵健.子宫内膜细胞学诊断系统[J].中国生育健康杂志，2006,17(1)：6-8.Heatl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