T-SDYZXCP 002-2023 畜禽产品中甲氧苄啶残留量的检测微阵列生物芯片试剂盒法

学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载ICS

65.120学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载CCS

B

46团 体 标 准

002—2023畜禽产品中甲氧苄啶残留量的检测微阵列生物芯片试剂盒法 发布学ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准兔兔ｗ下载学ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准兔兔ｗ下载学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载T/SDYZXCP

002—2023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载 本文件按照

GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第

1

起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省优质畜产品协会提出并归口。张坤、孟超、时川、谢天群、闫传琦、张超、许丹科、周嘉明、徐海峰。Ⅰ学ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准兔兔ｗ下载学ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准兔兔ｗ下载学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载T/SDYZXCP

002—2023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载 1 范围本文件规定了畜禽产品中甲氧苄啶残留量检测的微阵列生物芯片试剂盒法。本文件适用于畜禽肉及其内脏中甲氧苄啶的检测。本文件方法的检出限为

，定量限为

μg/kg。2规范性引用文件文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理固定的人工抗原点竞争结合抗体，加入纳米颗粒进行显色，用生物芯片分析仪检测，标准曲线定量。5 试剂或材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂。5.1 水：GB/T6682，三级。5.2 乙腈。5.3 正己烷。5.4 抗体溶液：含有抗甲氧苄啶单克隆抗体。2

℃～8

℃避光保存。使用前摇匀。5.5 显色液

A：称取

0.17

g

硝酸银，用水溶解后定容至

100

，得到浓度为

的硝酸银溶液，2

℃～8

℃避光保存，有效期

6

个月。使用前摇匀。5.6 显色液

B：称取

1.10

g

对苯二酚，用水溶解后定容至

100

，得到浓度为

的对苯二酚溶液，2

℃～8

℃

6

个月。使用前摇匀。5.7 混合显色液：临用前将显色液

A（5.5）和显色液

B（5.6）

混合均匀。5.8

2.68

g

NaHPO·12HO），0.39

g

NaHPOO），8.5

g氯化钠（NaCl

1

000

。5.9

2.68

g

NaHPO·12HO），0.39

g

NaHPOO），8.5

g氯化钠（NaCl），2

吐温-20，加水溶解后稀释至

1

。1学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载T/SDYZXCP

002—2023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载5.10 10

）：准确称取

1

CAS

号：-70-595.0%），准确至

0.000

1g，用乙腈（5.2）溶解，定容至

100

。-

℃以下避光保存，有效期

6

个月。5.11 1

μg/mL

1

5.10

10

。2℃～8℃避光保存，有效期

6

个月。5.12 ），用复溶液（

0

μg/mL、0.6

μg/L、

μg/mL、

、

μg/mL、9.6

标准系列工作溶液，2℃～8℃期

6

个月。5.13 微阵列生物芯片：

微孔。固定有人工合成甲氧苄啶抗原。2

℃～8

℃

个月。使用前置于

20

℃～

℃平衡

30

min

以上。6 仪器设备6.1

生物芯片分析仪：分辨率不低于

1200

ppi6.2

分析天平：精度为

0.01

g

和

0.000

1

g。6.3

芯片孵育仪：可调温度范围为室温～100

℃

600

。6.4

离心机：转速不低于

4000

。6.5

氮吹仪。6.6

涡旋振荡器。7 样品取不少于

g

样品，去除皮、筋膜及脂肪，均质混匀，-18

℃以下避光保存。取类型相同，均匀一致，且仪器响应值小于方法定量限

30%的样品，作为空白样品。8 试验步骤8.1 提取平行做两份试验。称取试样

1.00

g±0.05

g（准确至

0.01g）至

5

乙腈（5.2），涡旋

3

min，4000

离心

5

min

55℃

1

复溶液（5.8）和

1

正己烷（），涡旋

2

min，4000

离心

5

min。除去上层有机相，下层清液待测。8.2 加样分别取

50

µL

5.12）、50

µL

8.15.13再加入

50

µL

37℃、600

反应

15

min。8.3洗板倒出孔中液体，加入

250

洗涤液（5.9

10

s

后倒掉洗涤液，反复洗涤

3

次，在吸水纸上拍干。8.4 显色加入

℃、600

2学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载𝑉2

×

学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载𝑉2

×

𝑚

×

1000

×

1000

⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（1）避光显色

±1

min

µL

5.9

3

干，待测。8.5测定将显色后的芯片放入生物芯片分析仪中进行分析。以标准品百分比灰度值为纵坐标（%μg/L据标准曲线计算试样所对应的浓度对数后，再转化成甲氧苄啶的浓度。9试验数据处理试样中甲氧苄啶的含量以质量分数

计，数值以毫克每千克（）表示，按式（1）计算：𝜔

= 𝐶

×

𝑉1

×

𝑉

×

1000式中：——试样中甲氧苄啶的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C——由标准曲线查得的试样溶液中甲氧苄啶的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；——提取溶液的体积，单位为毫升（）；——定容的体积，单位为毫升（）；——分取溶液的体积，单位为毫升（）；——g）；1000——单位换算。10 质量控制10.1 阴性对照称取空白试样，按照

8.1～8.5

操作。10.2 阳性对照称取空白试样

1.00

g±0.05

g（准确至

0.01g），置于

（）

，此质控样中的甲氧苄啶的浓度为

。按