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文档简介

热烈欢迎各位领导和同仁莅临指导！房瑞安徽省含山中学基因工程基本操作程序：一、获取目的基因二、构建表达载体三、导入受体细胞四、目的基因检测与鉴定生物材料人工合成基因组文库mRNADNAcDNA文库PCR一定大小的DNA构建表达载体目的基因获取导入受体细胞第一步目的基因检测与鉴定得到转基因生物第二步第三步第四步cDNADNA文库构建DNAmRNA转录cDNAcDNA逆转录cDNA文库构建PCR第一轮第一轮PCR第二轮PCR第二轮第二轮人工合成蛋白质功能氨基酸顺序mRNA碱基顺序DNA碱基对顺序化学合成DNA即目的基因合成第二步、表达载体构建多酶切位点选择标记基因复制原点启动子终止子质粒结构酶切连接第三步、导入受体细胞一、导入植物细胞1、农杆菌转化法2、基因枪转化法3、花粉管通道法二、目的基因导入动物细胞：显微注射法三、目的基因导入微生物细胞：

首先用Ca2+处理细胞，让其变为容易吸收DNA的感受态细胞。再让感受态细胞与重组DNA的缓冲溶液混合完成转化。第四步、目的基因检测与鉴定检测方法一、分子水平检测：1、检测DNA是否插入目的基因2、检测目的基因是否转录了mRNA3、检测是否翻译了蛋白质二、个体水平检测：

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