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文档简介

知识目标1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。能力目标掌握DNA粗提取及鉴定方法,能利用DNA的性质进行实验设计和操作。态度观念目标通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。1、鸡血细胞做实验材料,一是因为鸡血细胞核DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,其作用是分解蛋白质,使提取出的DNA纯度较高4、预冷的乙醇溶液具有以下优点:一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解,二是降低分子运动,易于形成沉淀析出,三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂;5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁,破坏细胞膜,同时也能使蛋白质变性;6、在60—75度条件下加温处理,蛋白质变性,而DNA结构不会受到破坏,提取纯度较高的DNA7、二苯胺的沸水浴能使DNA染成蓝色根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案:方案一:30mL含DNA的滤液+2mol/LNaCl→同方向搅拌,DNA溶解→参加蒸馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶解液方案二:30mL滤液+嫩肉粉〔木瓜蛋白酶〕→静置10~15分钟→DNA滤液方案三:30mL滤液→60~75℃恒温保温10~15分钟→过滤获得DNA滤液两种材料的DNA粗提取与鉴定过程以鸡血为材料以花菜为材料①释放组织细胞中的DNA,②粗提取DNA,③将粗提取的DNA进一步纯化,④鉴定提取物是DNA鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图2mol/L鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图5、过滤→取纱布上的滤物纱布过滤6、再次溶解DNA2mol/LNaCl溶液取滤物鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图7、加冷酒精使DNA析出〔纯化〕冷酒精鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图DNA的鉴定DNA的粗提取与鉴定实验原理DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同DNA与二苯胺呈现蓝色反应DNA粗提取选择适宜材料破碎细胞DNA的溶解和析出DNA的纯化鉴定DNA与二苯胺混合,沸水浴,呈现蓝色反应总结:1.以下关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的选项是A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大B.人血也可代替鸡血进行实验C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D.DNA不能溶于酒精2.在破碎鸡血细胞时,要先参加20ml的蒸馏水,其作用是A.DNA溶解于水B.血细胞破裂,DNA释放C.稀释血液,防止凝固D.有利于搅拌3.假设选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要参加一定量的洗涤剂和食盐,参加食盐的目的是A.利于DNA的溶解B.别离DNA和蛋白质C.溶解细胞膜D.溶解蛋白质4.在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断参加蒸馏水的目的是A.有利于溶解DNA

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