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文档简介
微生物的基本培养技术【基础强化题组】1.下列关于培养基的说法,正确的是()A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水B.培养基只能分为两类:液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.配制培养基时要注意各种组分的浓度和比例2.下列关于微生物的营养的说法,正确的是()A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量3.自养微生物与异养微生物的培养基的主要差别是()A.碳源B.氮源C.无机盐D.特殊营养物质4.下列操作与消毒或灭菌无关的是()A.接种前用酒精灯火焰灼烧接种环B.接种前用酒精擦拭双手C.将平板倒置,放入培养箱中培养D.在酒精灯的火焰旁完成接种5.培养基、培养皿、接种针、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是()①化学药物消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤湿热灭菌⑥巴氏消毒A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤6.下列有关倒平板操作的叙述,错误的是()A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌面上D.等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置7.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是()A.对比观察培养基有没有被微生物利用B.对比分析培养基是否被杂菌污染C.没必要放入未接种的培养基D.为了下次接种时再使用8.下列关于酵母菌的培养和分离实验的叙述中,错误的是()A.接种环灼烧灭菌时,应放在火焰上直到烧红B.在全营养培养基平板上进行酵母菌的分离C.利用稀释涂布平板法对细菌计数时,需借助显微镜D.在挑取菌种前和接种完毕后,均要将菌种试管口通过火焰9.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察、计数。请回答与此实验相关的问题:(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌的培养提供了________和________。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是________和________。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是________________。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于____________中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有________种细菌。一般来说,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越________。【综合应用题组】(学业水平四)10.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验,包括制备培养基、灭菌、接种培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述中正确的是()A.实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉B.利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数C.观察细菌培养的实验时,最好是在另一块平板上接种清水作为对照实验D.培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源11.勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果,研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程如图。下列叙述正确的是()A.统计洗手前手部细菌的数量,选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外,还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型,需要用显微镜观察菌体的形状12.(不定项选择)微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖,下列有关微生物培养的说法不正确的是()A.乳酸菌与硝化细菌所利用的氮源不同,碳源相同B.微生物培养基中通常需要加入一定量的抗生素C.培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利D.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧等的影响13.(不定项选择)如图为酵母菌纯培养过程中的部分操作步骤,下列说法正确的是()A.①步骤使用的培养基已经灭菌并调节过pHB.②步骤接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落C.④中每次划线前后都需要对接种环进行灼烧处理D.①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行14.为了减轻废弃农作物秸秆对农村环境污染,某科研小组使用如下图所示接种方法分离纯化分解纤维素的微生物并用于生产。请据图回答下列问题:(1)图中接种工具的名称是________,制备培养微生物的培养基时,灭菌与调pH的先后顺序是________。(2)步骤②中,将接种工具冷却的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)图示接种方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)为从富含纤维素的土壤中分离获得分解纤维素的微生物单个菌落,某同学配制了一个培养基(成分见下表):成分酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂水培养基++++++注:“+”表示有。据表分析,该培养基含有微生物所需的________、氮源、水、无机盐四大类营养物质。该培养基________(选填“能”或“不能”)用于分离纤维素分解菌,原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。【素养养成练】15.炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。炭疽杆菌呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的寄主专一性,通过实验进行确诊。①细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。②细菌鉴定:实验流程图如图所示。注:题目中的噬菌体只能侵染炭疽杆菌。(1)对配制的液体培养基要采用______________________(方法)进行灭菌。培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是____________________________________。(2)挑选可疑菌落制片后,用____________观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。(3)接种可疑菌后,35℃培养24h,液体培养基变浑浊,原因是________________________。图中的对照组试管中应加入____________。两组试管同时培养6h后,进行比较,若实验组液体培养基的浑浊度________(填“提高”“降低”或“不变”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染。此实验依据的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。课后分层检测案2微生物的基本培养技术1.解析:不同微生物对营养物质的需求不同,如自养微生物的培养基不需要加碳源,自生固氮菌的培养基不需要加氮源;按不同的分类标准,培养基种类也不同,如培养基按物理性质可分为液体培养基和固体培养基两大类,按培养基用途可分为选择培养基和鉴别培养基;固体培养基是在液体培养基里加入琼脂等凝固剂配制而成的,而固体培养基中去除琼脂,才可获得液体培养基,但一般不好操作;配制培养基时要注意各种组分的浓度和比例。答案:D2.解析:对一些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源;CO2是光能自养细菌的碳源,但不能提供能量;CO2和N2都是无机物,也是微生物的碳源和氮源;硝化细菌所利用的氮源是氨,氨为无机氮源,同时氨也为硝化细菌提供进行化能合成作用的能源。答案:D3.解析:自养微生物利用的碳源是二氧化碳、碳酸盐等无机碳,异养微生物利用的碳源是含碳有机物,所以培养两种微生物的培养基的主要差别是碳源。答案:A4.解析:接种用具、器皿、空气中都存在大量微生物,必须进行严格地消毒或灭菌。A、B、D三项都是实验操作过程中涉及的消毒或灭菌的措施。将平板倒置,放入培养箱中培养与灭菌无关。答案:C5.解析:培养基用湿热灭菌法灭菌;培养皿能耐高温且需要保持干燥,可用干热灭菌法灭菌;接种针可用灼烧灭菌法灭菌,以达到迅速彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药物如酒精进行消毒;空气可用紫外线消毒法;为了不破坏牛奶的营养成分可采用巴氏消毒法。答案:A6.解析:整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁,打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰,培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不能将培养皿盖完全打开,等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置。答案:C7.解析:对未接种的培养基进行培养,起到对照作用,可用来确定培养基是否被杂菌污染。答案:B8.解析:接种环灼烧灭菌时,需要放在火焰上直到烧红达到彻底灭菌,A正确;在全营养培养基(必须有水、无机盐、碳源和氮源等)平板上进行酵母菌的分离,B正确;利用稀释涂布平板法对细菌计数时,是计数菌落,不需借助显微镜,C错误;在挑取菌种前和接种完毕后,均要将菌种试管口通过火焰,防止杂菌进入,D正确。答案:C9.解析:用于培养微生物的培养基中,一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和无机盐等成分,碳源、氮源一般分别由糖类和蛋白质类物质所提供。对培养基常用的灭菌方法是湿热灭菌。在检测湖水中细菌的污染情况时,应设置对照实验,才能得出可靠的结果。答案:(1)氮源碳源无机盐水(2)湿热灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高10.解析:实验用过的带菌培养基经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉,A错误;应利用稀释涂布平板划线法对细菌进行分离纯化并计数,B错误;要使实验结果可靠,最好是在另一块平板上接种无菌水作为对照实验,C错误;培养基中含有的淀粉、蛋白胨可以分别为细菌培养提供碳源和氮源,D正确。答案:D11.解析:平板划线无法得知稀释倍数,不能用于活菌计数,故统计洗手前手部细菌的数量,选择的接种方法是稀释涂布平板法,A项错误;除图中操作外,还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养,验证培养基是否被杂菌污染,B项正确;由于当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个或者几个活菌,C项错误;由于菌落肉眼可见,故初步判断培养基上菌种的类型,可用肉眼观察菌落特征,D项错误。答案:B12.解析:乳酸菌利用的是有机碳源,而硝化细菌可以利用无机碳源,A错误;抗生素对细菌生长有抑制作用,通过添加抗生素利于筛选出真菌,B错误;培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水,将出现失水过多而死亡的现象,对生长不利,C错误;微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧等的影响,D正确。答案:ABC13.解析:①步骤为倒平板,使用的培养基已经灭菌并调节过pH,A正确;②步骤为接种,接种环经火焰灭菌后应待其冷却后再挑取菌落,以防高温杀死酵母菌,B错误;④中每次划线前后对接种环进行灼烧处理,是为了杀死接种环上残留的菌种,使划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到单菌落,C正确;①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染,D正确。答案:ACD14.解析:(1)图中接种工具是接种环,制备培养基的基本过程为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板五个步骤,所以是先调pH再灭菌。(2)接种前需要将灼烧后的接种工具冷却,避免高温烫死接种菌种。(3)由图中步骤③可知,接种方法是平板划线法。(4)由表可知,该培养基含有碳源(酵母膏、淀粉、纤维素粉)、氮源(酵母膏)、水和无机盐四大类营养物质,但该培养基中纤维素不是唯一碳源,故不能用于分离纤维素分解菌。答案:(1)接种环先调pH再灭菌(2)避免高温烫死接种菌种(3)平板划线法(4)碳源不能纤维素不是唯一碳源15.解析:(1)培养基一般采用湿热灭菌。在配制培养基时,需要先调节pH,后灭菌。(2)菌落可
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