《植物组织培养实验》课程教学大纲

PAGEPAGE2《植物组织培养实验》课程教学大纲课程中文名称：植物组织培养实验课程英文名称：Experimentofplanttissueculture课程类型：选修学分数：2学时数：16(要与实际实验课学时吻合)适用专业：生物科学、生物技术、生物教育、食品生物技术开课学期：6先修课程：植物学、植物生理学、生物化学、细胞学执笔人（课程负责人）：陈刚、钟佩桥审核人（系主任）：陈刚生命科学学院一、课程的地位、教学目标和基本要求课程的地位：植物组织培养课程实验是生物科学专业学生选修的一门专业课的重要组成部分。目的是通过本课程的教学，使学生了解植物组培实验室建设，掌握植物组织培养的基础理论知识和基本技能。近几十年来此项技术得到了迅速的发展，已渗透到生物科学的各个领域，成为生物科学的重要研究技术和手段。通过植物组织培养实验的学习，为培养生物科学教学和科研人员奠定基础。教学目标：为了进一步加强学生综合素质和创新能力的培养，树立科学的世界观，增强学生分析问题和解决问题的能力而开设植物组织培养课程实验，尤其是在增强生物科学专业（师范方向）毕业生就业能力是十分必要的。基本要求：开设植物组织培养课程实验，使学生学习植物组培养的培养基母液的配制、培养基的配制、灭菌及无菌操作一般技术，掌握外植体消毒、愈伤组织诱导、不定芽诱导、生根培养及炼苗移栽，在科学工作态度和植物组织培养一般实验技能等方面获得初步的训练，为学生将来从事中学教学、科研、开发等多方面工作，奠定良好的基础。二、教学学时分配序号内容实验学时1培养基的制备32外植体消毒33愈伤组织的诱导及培养34不定芽的诱导25生根培养26炼苗和移栽或试管花卉的制作3总学时16三、教学内容与要求实验一培养基的制备实验目的：1．了解植物对营养的要求；2．掌握培养基的基本成分和培养基的制备方法；3．了解高压灭菌锅的使用和维护知识。实验内容：1．母液的配制（一种配制方法）2．MS培养基的配制(1)取1L三角烧瓶加蒸馏水约600ml+蔗糖30g，称取MS干粉4.74克，琼脂粉7g，加植物生长调节剂6-BA（）+NAA（）+蒸馏水定容1L；(2)pH调整至5.8-6.2：pH试纸：0.1mol/L的HCl或0.1mol/L的NaOH(3)分装(4)灭菌：121℃20分钟(5)冷却备用实验二外植体消毒实验目的：1．了解常用的消毒剂及其使用效果；2．掌握外植体消毒的一般方法；3．掌握超净工作台的使用和维护。实验内容：1．无菌水制备（老师做）2．消毒液的配制：HgCl2为例HgCl21g溶于蒸馏水100ml，定容，备用。3．取植物材料（叶、茎）：自来水冲洗10分钟——75%酒精漂洗（15秒）——0.1%HgCl2处理5~20分钟——（超净台内操作）无菌水冲洗3次——切取边长或高约0.5ml的材料——接种到初代培养基4．注意事项（1）消毒剂的浓度和处理时间（2）无菌水中如何避免污染实验三愈伤组织的诱导和培养实验目的：1．了解愈伤组织形成的基本条件和愈伤组织形成过程；2．掌握愈伤组织诱导和培养方法。实验内容：1．材料：试管苗植物的叶片，茎段；2．材料处理：无菌操作，取试管苗叶片，剪取约边长0.5cm的方块，接种，每瓶2~3个。3．培养基MS+2,4-D1mg/L（单位以下同）MS+2,4-D1+NAA0.2MS+2,4-D2MS+2,4-D2+NAA0.24．观察，记录，总结：每周记录一次，4~5周后总结，写实验报告。实验四不定芽诱导实验目的：1．了解植物形态发生的影响因素；2．掌握不定芽诱导的一般方法。实验内容：1．材料：试管苗植物叶片产生的愈伤组织。2．材料处理与接种：从上实验中获得的愈伤组织，其中一部分把愈伤组织也初起外植体分离，另一部分保留原外植体和产生愈伤组织，并接到诱导培养基中去。3．培养基MS+6-BA1MS+6-BA2MS+6-BA1+NAA0.2MS+6-BA2+NAA0.24．观察、记录、实验报告。实验五生根培养实验目的：1．了解无根苗试管生根的原理；2．掌握生根培养的一般方法。实验内容：1．材料：愈伤组织诱导的不定芽。2．材料处理与接种。从增殖培养中获得的不定芽，选取较健壮，切取芽高1~2cm的不定芽或枝，接种到生根培养茎中，带幼小芽体的外植体可接种到增殖培养基中。培养基：温度25℃±3℃光照2000lx12h/d。培养基：A：MS+NAA0.1B：1/2MS+NAA0.1观察、记录、实验报告。实验六炼苗和移栽实验目的：1．了解炼菌的原理和方法；2．掌握试管菌的移栽方法。实验内容：1．材料：生根培养后半月，具3—5条根长2cm的瓶苗。2．炼菌：移栽前3—5天，打开瓶盖，置于80%遮光率的阴栅，培养3—5天，叶片转深绿，即可移栽。3．床准备：荫栅内，基质珍珠岩和泥炭土混合，比例3：1或4：1。4．瓶苗处理：自来水冲洗干净，切莫损伤苗株。5．种植：株行距3*3cm。6．定根水。7．模弧行遮盖。8．苗期管理：保湿、保温、遮光、根外施肥。9．观察、记录、写出实验报告。实验六试管花卉的制作（选）一、预习内容1.查阅资料，了解试管花卉的制作方法。二、目的要求1.了解试管花卉的制作方法，掌握试管花卉的制作方法。三、实验内容1.材料：选取试验中获得不定芽。2.方法：将带色素的培养基加热，转入相应的小瓶中，冷却，接种小苗到瓶中。培养1星期，无污染的试管花卉即为制作成功。四、实验报告或作业1.写出实验报告。四、考核成绩分配比例（实验课）平时成绩实验报告出勤操作35%15%50