DB21-T 3043-2018苹果芽变鉴定规范

ICS65.020.20

B05

备案号：61339-2019DB21

辽宁省地方标准

DB21/T3043—2018

苹果芽变鉴定规范

Identificationofapplesport

DB21/T3043—2018

苹果芽变鉴定规范

1范围

本标准对苹果芽变的形态学、解剖学、孢粉学和生理生化等常用的鉴定技术进行规范。

本标准适用于全省各地开展苹果芽变选种工作。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T19557.1植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南总则

NY/T2424-2013植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南苹果

3术语和定义

NY/T2424-2013确立的以及下列术语和定义适用于本文件。下列术语和定义适用于本文件。

3.1芽变sport

体细胞突变的一种,即突变发生在芽分生组织细胞中,当芽萌发长成枝条,并在性状上表现出与原来

植株类型不同的性状即为芽变。

3.2芽变选种sportselection

体细胞突变的一种,即突变发生在芽分生组织细胞中,当芽萌发长成枝条,并在性状上表现出与原来

植株类型不同的性状即为芽变。

3.3饰变modification

由种种环境条件造成的不能遗传的变异。

4鉴定

4.1原则

依据NY/T2424来确定芽变品种与原品种的特异性、一致性和稳定性。鉴定原则按由田间观察、调

查到室内测定，由简单方法到复杂的方法顺序进行鉴定。

4.2材料及方法

4.2.1材料

苹果的叶片、枝条、花粉和果实。

1

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4.2.2方法

苹果芽变形态学鉴定见附录A，解剖学鉴定见附录B，孢粉学鉴定见附录C，生理生化鉴定见附录

D。

4.3芽变初选时期

苹果花朵性状发生的变异筛选，应着重在开花期；叶片性状发生变异的筛选，应在8月～10月，叶

片形成以后；枝条性状发生变异的筛选，主要在果树休眠期；果实性状发生变异的筛选，主要在果实采

收期进行；果实成熟期发生变异则应在采收前1个月开始；抗性为育种目标时，应着重抓住灾害发生之

后的时期进行筛选。

4.4芽变初选地点

苹果芽变初选在各地果园进行。

4.5芽变识别方法

变异的性质如属于典型的质量性状，可判定是芽变；变异体发生范围如是不同立地、不同技术的多

株变异，即可排除环境和技术的影响，可判定是芽变；变异的方向，凡是与环境的变化不一致的，如树

冠下部或内膛处发现果实浓红色变异，可判定是芽变；变异性状虽经不同年份的环境变化而表现稳定，

可判定是芽变。

4.6田间试验

4.6.1鉴定地点

鉴定通常在原发地进行。如果某些芽变性状在该地点不能充分表达，可在其他符合条件的地点对芽

变品种及原品种进行观测。

4.6.2繁殖材料的要求

按照NY/T2424中的标准繁殖材料。

4.6.3田间管理

按照NY/T2424中的标准进行田间管理。

4.6.4芽变鉴定周期

鉴定周期至少为2个正常生长并开花结果的年生长周期。

4.6.5变异性状描述

按照NY/T2424规定的方法对基本性状和变异性状进行描述。根据测试需要，将性状分为基本性状

和变异性状。变异性状是测试中必须观测的性状。

4.6.6鉴定时期

按照NY/T2424中的性状描述的标准，针对不同器官变异性状，在适于观测的时期进行鉴定。

4.6.7鉴定数量

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对芽变品种与原品种的观测应至少分别在10株树上进行，在观测植株的器官或部位时，每个植株上

取样数量应至少为3个。

4.6.8不同变异性状的鉴定内容

①短枝型变异的品种，应着重调查叶片厚度、枝条的长度、粗度、节间长、枝类比、树体的树

高、冠径、始果年限及产量。

②花的变异，应着重调查花期、花冠大小、花瓣大小形状及颜色。

③果实大小发生变异的品种，应着重看果实成熟阶段的发育规律及果实成熟时果实纵径、横径

及单果重的变化。

④着色变异的芽变品种，应着重看果实将近成熟时果实着色的变化。

⑤果实成熟期的变化应确定果实适宜的采收期。

⑥果实品质变异重点在果实成熟时对果实的可溶性固形物、可滴定酸、硬度等变异的测定。

⑦树体抗性发生变异应对不同的抗性变异相关的指标进行检测；抗寒性变异，重点通过田间调

查树体的抗性，测定休眠期枝条的电导率；抗锈变异，重点调查果面锈斑多少；抗病虫变异

重点调查不同变异病情指数的变化。

⑧树体倍性发生变异应对遗传物质进行测定，重点对染色体数目进行检测。

4.6.9芽变品种判定

依据NY/T2424提供的标准，结合调查统计的结果，对芽变品种与原品种的特异性、一致性和稳定

性进行判定。

A

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附录A

（规范性附录）

苹果芽变的形态学鉴定

A1针对叶片变异的形态学鉴定

A1.1材料与方法

按照NY/T2424方法，将苹果原品种与芽变品种在同一栽培管理条件下，在8月～10月，叶片形成后，

描述叶片形状，调查叶片形态。

A1.2调查结果

将调查结果填入表A.1和A.2。经调查分析，上述性状原品种与芽变品种间有显著性差异的可判定为

新类型。

表A.1叶片的形态描述

品种叶长（cm）叶宽（cm）叶柄长（cm）叶形指数叶长与叶柄长比值

原品种

芽变品种

表A.2叶片的形态调查

品种叶长（cm）叶宽（cm）叶柄长（cm）叶形指数叶长与叶柄长比值

原品种

芽变品种

A2针对果实变异的形态学鉴定

苹果果实大小、形状、着色等发生变异，要开展果实形态描述及调查。

A2.1材料与方法

按照NY/T2424的方法，将苹果原品种与芽变品种在同一栽培管理条件下，在果实成熟后，调查描

述果实的形态。

A2.2调查结果

将调查结果填入表A.3和A.4。经观察统计分析，上述指标原品种与芽变品种间有明显不同且表现稳

定的，结果有显著性差异的可判定为新类型。短枝型变异品种果柄明显变短。

表A.3果实形态描述

品种形状底色盖色着色程度着色类型果面的光洁度

原品种

芽变品种

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表A.4果实形态调查

品种单果重(g)纵径(cm)横径(cm)果形指数果柄长(cm)

原品种

芽变品种

A3针对树体、枝条变异的形态学鉴定

短枝型、垂枝型变异品种需要进行树体、枝条形态学鉴定。

A3.1材料与方法

将苹果原品种与芽变品种在同一栽培管理条件下，在果树结果后，按照NY/T2424的方法，调查描

述树体、枝条的形态。

A3.2调查内容

将调查结果填入表A.5，A.6。经调查分析，上述指标芽变品种表现树体矮小，结果早、产量高，一

年生枝短、粗，节间短，短枝比例高，可判定为短枝型变异类型；垂枝型变异表现树体开张，枝条基角

大于90°，萌芽率高，短枝比例高。

表A.5短枝型变异的相关性状调查

品种树高（m）冠径始果年限（年）亩产量（kg/667m2）长度（cm）粗度（cm）节间长枝类

（m）（cm）比

原品种

芽变品种

表A.6垂枝型变异的相关性状调查

品种树形树高（m）冠径（m）枝条基角（°）萌芽率枝类比

原品种

芽变品种

B

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附录B

（规范性附录）

解刨学鉴定一叶片结构解剖学鉴定

B1材料

选用在同样栽培管理条件下的苹果芽变品种及原品种的叶片。

B2方法

B2.1苹果叶片气孔的观察

采用酸解离法。10%的硝酸溶液和10%的铬酸溶液按1：1比例混合即配成叶片解离液。在8月中旬采

集圃内供试品种的叶片，叶片取于向阳面树枝的中上部。采叶时间一般在晴日上午，保证气孔完全开放。

取材于叶片第2叶脉与第3叶脉之间，取叶片1cm2大小左右。将新鲜叶片使用叶片解离液浸泡16～26小

时。解离后用镊子取出下表皮，用清水浸洗，在光学显微镜下进行观察。在显微镜下观察视野内的气孔

数目（M），用测微尺测量视野直径（D），观测时每叶片观察5个视野，调查每视野的气孔个数，中心

视野的气孔长和气孔宽，共观察30个视野。气孔密度＝M/3.14（D/2）2。结果用LSD方法进行差异显著

性分析。

B2.2苹果叶片结构的观察

叶片截面观察采用徒手切片法。每品种随机选6个叶片进行调查，在叶片的第2叶脉与第3叶脉之间

制作徒手切片，每个叶片要观测5个切片并在光学显微镜下观察叶片截面的结构，调查上表皮厚、栅栏

组织、海绵组织、下表皮及叶片厚度。共观察30个视野，结果进行差异显著性分析。

B3调查内容

将调查结果填入表B.1和B.2。芽变品种的保卫细胞的宽度与原品种比较有变长的趋势；短枝型芽变

品种中的气孔密度有变小的趋势；短枝型芽变品种栅栏组织厚度与原品种比较有变小的趋势。经统计分

析，上述指标芽变品种与原品种间有显著性差异的可确定为新类型。

表B.1苹果芽变品种气孔观察

品种气孔密度（个/mm2）保卫细胞长(µm)保卫细胞宽(µm)

原品种

芽变品种

表B.2苹果芽变品种叶片结构的观察

(单位：m)

Cµ

品种上表皮厚栅栏组织厚海绵组织厚下表皮厚叶厚

原品种

芽变品种

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附录C

（规范性附录）

孢粉学鉴定－花粉形态扫描电镜观察

C1材料与方法

C1.1材料

选用在同样栽培管理条件下的苹果芽变品种及原品种的花粉。

C1.2方法

花粉采集后凉干，用棉签蘸花粉，轻拍手腕，让花粉均匀撒在粘有双面胶的样品托上，用吸耳球吹

去多余的花粉。用离子溅射仪做喷金处理，喷镀电流为7mA～8mA，喷镀时间约为300s，然后置于扫描

电镜下观察，选取典型的花粉粒拍照。取6个不同的视野，每个视野选5个方位一致、典型的花粉调查花

粉粒的极轴及赤道轴的长度。在1800倍下分别对花粉粒的双沟侧面和单沟侧面进行拍照，在3000倍下对

花粉的极面进行拍照，每品种取6个典型的花粉在5000倍下对花粉纹饰拍照，并将相片通过扫描，在电

脑中观察花粉纹饰，调查不同品种花粉条脊宽、条脊距、穿孔最大直径，每项指标调查50个数据，调查

结果用LSD方法进行统计分析。

C2调查内容

将调查结果填入表C.1。芽变品种的P/E值与原品种比较有变小的趋势，早熟类型变异品种的P/E值

要小于其他变异类型的P/E值。经统计分析，上述指标原品种与芽变品种间有显著性差异的可确定为新

类型。

表C.1不同苹果芽变品种花粉的扫描电镜观察比较

(单位：µm)

品种极轴长赤道轴长极轴/赤道轴（P/E）条脊宽条脊距穿孔直径

原品种

芽变品种

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DA

附录D

（规范性附录）

生理生化鉴定

D1材料与方法

D1.1材料

选用的试材为在相同的栽培管理条件下的原品种和芽变品种（树龄、树势、树形、负载量等应一致）。

测定成熟果实果实可溶性固形物、总糖、可滴定酸含量及果皮中花青素含量及果皮色泽。

D1.2方法

可溶性固形物含量采用数字手持袖珍折射仪测定，以%表示；总酸含量采用数字测酸仪检测，以百

分含量表示；果实去皮硬度采用果实硬度计测定，以kg/cm2表示；花青素采用盐酸乙醇法，以mol.g-1FW

表示。果实色泽测定用色差计，测定每个果实对称两面的L（光亮度）、a（红绿色差）、b（黄蓝

色差）。L值表示表面颜色深浅，L值越大颜色越浅、果面越有光泽，反之颜色越深果面暗淡无光泽；

a值表示红绿的程度，a值越大红色越深；b值表示黄青的程度，b值越大黄色越深，底色越好。结果

进行LSD方法统计分析。

D2检测内容

将调查结果填入表D.1。经LSD方法统计分析，上述指标原品种与芽变品种间有显著性差异的可确定

为新类型。一般情况下在果实成熟期，同一阶段的早熟变异品种与原品种比较可溶性固形物、花青素含

量高而可滴定酸和硬度变低。果实色泽也优于同期的原品种。

表D.1苹果芽变果实品质检测

品种可溶性固形物可滴定酸(%)