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文档简介
实验三、种子发芽测定一、目的要求要求掌握种子发芽测定的操作方法,学会计算种子发芽的各种质量指标。二、材料器具1.材料:刺槐种子。2.器具及药品:恒温箱、培养皿、滤纸、镊子、温度计(0~100℃)、取样匙、直尺、量筒、烧杯、高锰酸钾、标签、蒸馏水、洗瓶、解剖刀、解剖针等。三、方法步骤1.抽取测定样品
从净度测定选出的纯净种子中提取。用四分法将种子分成4份,从每份中随机提取25粒种子组成100粒。共取4个100粒,即成为4次重复。种粒大的可以50粒或25粒为一次重复,样品数量有限或设备条件不足时,也可以采用2-3次重复,但应在检验证中注明。2.消毒灭菌
为了预防霉菌感染,干扰检验结果,检验所使用的种子和各种物件一般都要经过消毒灭菌处理。①
用具消毒:培养皿、纱布、小镊子仔细洗净,并用沸水煮5~10min。②
种子消毒:常用福尔马林、或高锰酸钾、过氧化氢等。药剂种类不同,处理的方法和时间也不一致。刺槐种子用0.2~0.5%的高锰酸钾溶液浸2h,取出用清水冲洗数次即可。测定样品的预处理目的是解除休眠,使种子发芽整齐,便于统计。一般的种子可进行浸水处理,但深休眠的种子需要经过不同方法的预处理才能发芽,如低温层积法。刺槐用始温为85℃的热水浸种(种子与水的体积比为1:3),不断搅拌至水凉,然后放置24h,浸种期间更换室温水1~2次。置床将经过消毒、浸种的种子摆放到发芽床上。视树种而不同,常用的发芽床有纱布、滤纸或细砂。一般中粒、小粒种子可在培养皿中放上纱布或滤纸作发芽床。刺槐种子以滤纸为发芽床。在每个培养皿床上整齐地安放100粒种子,种粒之同保持的距离大约相当于种粒大小的2~3倍,以减少霉菌蔓延感染,并避免幼根纠缠。培养皿贴上标签,写明样品号、重复号、姓名和置床日。将培养皿盖好放入恒温箱内。根据树种的特性使用变温或恒温,刺槐适宜的发芽温度为20~30℃。湿度为60~70%。发芽测定的管理(1)定时检查发芽环境的温度;(2)保持发芽床的水分,水分不足时应及时加水;但水分也不能过多,种粒四周出现水膜,表示水分过多。(3)通气,种子发芽需要足够的氧气,并会释放出大量的二氧化碳。有盖的培养皿缺点之一就是通气不良,应当定期揭开盖子充分换气。(4)将轻微感染霉菌的种子取出(不要使它们触及健康的种粒),用清水冲洗数次,直到水无混浊再放回发芽床。发霉严重时整个滤纸和座垫,甚至整个培养皿都要更换。这些情况在发芽记录表中应有记录。观察记载发芽测定的情况要定期观察并及时纪录。本实验要求每天作一次观察记录。记录时拣出正常发芽粒、腐坏粒和异状发芽粒。发芽测定的持续时间
发芽测定的持续天数参见国家标准《林木种子检验规程》。以置床之日为零起算,不包括种子预处理的时间。如果确认某样品已经达到最高发芽率,也可在规定的时间以前结束测定。如到规定的结束时间仍有较多的种粒萌发,也可酌情延长测定时间。发芽测定所用的实际天数应在检验报告中填明。本次实验中刺槐种子发芽测定的持续天数拟定为7天。记载项目日期,发芽种子数,腐烂种子数,异状发芽种子数。判断标准正常发芽粒——长出正常胚根。其长度大于该种粒一半的称为正常发芽粒。异状发芽粒——指胚根短而生长迟滞、胚根呈负向地性;胚根异常纤弱;胚根腐坏;胚根出自珠孔以外的部位;种壳暴烈脱落;胚根卷曲;子叶先出;胚根联结。腐烂粒——内含物腐败成胶状的无生命种子称腐烂粒。应及时提出并在表格中记述。未发芽粒——每次剔除发芽粒、异状发芽粒和腐烂粒之后将余下的未发芽粒重新排放整齐,并点数,以便及时核查,避免差错。到发芽终止日期后,分组用切开法对尚未发芽的种粒进行鉴定,分别归成新鲜健全粒、腐烂粒、空粒、涩粒(多见于杉木、柳杉)等几类并记入表中。实验数据及计算表第一组第二组日期发芽腐烂异状发芽发芽腐烂异状发芽6月8号230020026月9号250029006月10号17026106月11号8008206月12号2004106月13号1404426月14号0403406月15号0300406月16号020000合计7613274164未发芽种子9个硬化无空粒6个硬化无空粒发芽率76%74%绝对发芽率76%74%发芽势48%49%平均发芽速度0.1180.121
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