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实验37有机磷农药中毒及其解救

【目的和原理】(1)观察有机磷农药中毒症状，根据阿托品和解磷定对有机磷中毒解救的效果及血中胆碱酯酶（ChE）活性的变化，初步分析两药的解救原理。

(2)学习复制有机磷农药中毒模型。

(3)学习全血ChE活性测定法（三氯化铁比色法）。

【实验步骤及观察项目】(1)取25～35g小白鼠1只，称重后观察其唾液分泌，大小便及有无肌颤等各项指标。然后从一侧眼球取血100μl，作为标准管和用药前正常ChE活力。

(2)按20mg／kg（0.08～0.09ml/10g）腹腔注射0.25％敌敌畏，观察并记录上述各项指标，待中毒症状(流涎、呼吸困难、大小便失禁、毛色湿润、震颤)明显后（6～10min）眼球取血50μl，然后立即腹腔注射0.05％阿托品0.1m1/10g，观察症状的改变，5min后眼球取血50μl。

(3)腹腔注射2.5％解磷定0.06～0.08ml/10g，观察症状的改变，10min后眼球取血50μl。

(4)另取小鼠1只，按0.15ml/10g腹腔注射0.25％敌敌畏，观察小鼠中毒症状。(5)ChE活性测定:按表10-3全血胆碱酯酶活性测定步骤（P133）加入各种试剂，混匀，过滤，用721型分光光度计于525nm处测各样品吸收度，根据结果计算ChE活力。【注意事项】1．敌敌畏中毒的小白鼠极易死亡，注射后严密观察中毒症状，一旦症状明显后立即取血并抢救。

2．每次取血均应在眼球或取血皿上擦上肝素抗凝。

3．每次取血后，应立即放入已加有0.5ml磷酸缓冲液的试管中，按下述方法测定胆碱酯酶（ChE）活力。

4.为了防止光电管疲劳，分光光度计在不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管的使用寿命。

5.取比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不要碰比色皿的光学表面，以免受污染。

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