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文档简介

改良“红细胞渗透脆性测定”的实验准备工作

引言：

红细胞渗透脆性是指红细胞在一定渗透压条件下发生溶血的能力，具体可通过测定红细胞在一定浓度的渗透剂中溶血的程度来评估。本实验旨在改良已有的红细胞渗透脆性测定法，提高测试的准确性和可靠性。下面将介绍改良实验的准备工作。

一、材料准备：

1.动物红细胞：选择新鲜采集的动物全血，如小鼠血液。采用肝素抗凝方法采集血液，避免造成红细胞聚集。

2.渗透剂：常用的渗透剂有多种选择，如高低渗液、NaCl溶液、葡萄糖溶液等。根据实验需求，选择合适的渗透剂。

3.试剂：肝素、PBS缓冲液、纳氏液、磷酸二氢钠(NaH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)等。

4.仪器：离心机、恒温水浴、显微镜、离心管、试管、移液管、计数室等。

二、实验方案设计：

参照现有的红细胞渗透脆性测定方法，进行相应的改良。改良的实验方案如下：

1.准备不同浓度的渗透剂。

2.取适量的血液，加入等体积的渗透剂和肝素，充分混匀。

3.在37°C恒温水浴中孵育不同时间，一定时间后离心沉淀。

4.取上清液，放入显微镜计数室计数。观察红细胞溶解情况，评估渗透脆性。

三、实验流程：

1.收集适量新鲜动物血液，并放入抗凝血管中。

2.用PBS缓冲液稀释血液，将血液稀释至适当浓度。

3.新鲜冰冻离心红细胞制备：立即将血液进行离心，平均转速约为1000-1500转/分钟，离心5-10分钟。

4.除去红细胞上清液，加入等体积的渗透剂和肝素，充分混匀。

5.在37°C恒温水浴中孵育不同时间，设定时间间隔，如15分钟、30分钟、60分钟等。

6.定时取出试验样本，进行离心，以除去红细胞。

7.取上清液，放入显微镜计数室计数。观察红细胞的状况，并根据溶解情况评估渗透脆性。

四、实验注意事项：

1.选取新鲜的动物血液，避免活细胞的影响。

2.测定时注意控制温度，保持37°C的恒温水浴。

3.实验过程中低温保存样品，避免样品变性。

4.严格按照实验方案操作，避免误差的产生。

结论：

通过本实验的改良，我们提高了红细胞渗透脆性测定的准确性和可靠性。实验准备工作主要包括材料的准备、实验方案设计以及实验流程的设计。实验结果将有助于更好地评估红细胞的渗透脆性，为相关疾病的研究提供实验依据通过本实验的改良，我们成功地评估了红细胞的渗透脆性。实验流程中，我们收集了适量的新鲜动物血液，并用PBS缓冲液稀释至适当浓度。随后，我们制备了新鲜冰冻离心红细胞，并在37°C恒温水浴中孵育不同时间。最后，我们通过离心和显微镜计数室计数上清液中的红细胞，并观察了红细胞的状况来评估其渗透脆性。

在实验过程中，我们注意选择新鲜的动物血液，以避免活细胞的影响。我们也严格控制了温度，保持了37°C的恒温水浴，以确保实验结果的准确性。此外，我们还低温保存样品，以避免样品变性。通过严格按照实验方案操作，我们最大程度地避免了误差的产生。

通过本实验，我们

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