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文档简介
特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增。所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光水2.引物经过优化,特异性强。预期的PCR产物长度为560bp。发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其wan全溶解。②两相分离每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合③RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm离心10分钟。此时离心④RNA清洗移去上清液,每1mITRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙⑤RNA干燥小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。⑥溶解RNA沉淀溶解RNA时,先加入无RN全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。1⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列有适宜的酶切位点,这对酶切分析2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。指示扩增的增加。运用
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