维生素类药物的分析

维生素类药物的分析

TheAnalysisofVitamines1整理ppt＊维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质。＊如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。

例如:VA缺乏—夜盲症VB1缺乏—脚气病概述2整理ppt按溶解性分类VA、VD、VE、VK等B族〔VB1、VB2等〕、VC、烟酸、叶酸、泛酸等脂溶性维生素：水溶性维生素：3整理ppt

第一节维生素A的分析一．结构与性质1．化学结构R=HVA醇VA1R=—COCH3VA醋酸酯R=—COC15H31

VA棕榈酸酯4整理ppt〔1〕环己烯+共轭多烯侧链；〔2〕天然VA侧链为全反式；〔3〕天然来源主要是鱼肝油，为醋酸酯，棕榈酸酯等,目前多由人工合成。结构特点：5整理ppta.

紫外吸收＊具有共轭多烯侧链—紫外吸收。＊最大吸收波长在325~328nm，随VA存在状态以及所用的溶剂，最大吸收波长的位置有所不同。2.性质不溶于水，溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油。b.溶解性：6整理ppt＊共轭多烯侧链—性质非常活泼.c.

不稳定性7整理pptCH2OHOCH2OHOCHOCOOH维生素A的氧化产物〔无生物活性〕：环氧化物维生素A醛维生素A酸or8整理pptd.与SbCl3作用〔Carr-Price反响〕维生素A在氯仿中与SbCl3试剂作用，产生不稳定的蓝色。

★鉴别★含量测定9整理ppt1.

三氯化锑反响

二.鉴别试验维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液中即显蓝色，渐变成紫红色。2.

紫外吸收光谱VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。10整理ppt确认醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯，例：VA和其标准品用环己烷溶解展开剂：环己烷—乙醚〔80：20〕板：硅胶G显色：SbCl3T.S.Rf：VA醇0.08VA醋酸酯0.41VA棕榈酸酯0.753、TLC11整理ppt三．含量测定1、概述＊共轭多烯的结构—具有特征的紫外吸收。＊相关物质—结构相似,维生素A最大吸收波长附近也有吸收，对测定有影响。＊Morton和Stubbs等人提出了三点校正法。紫外分光光度法－三点校正法12整理ppt三点校正法:在三个波长处测得吸收度，根据校正公式计算含量，故称为“三点校正法〞。13整理ppt2.

原理〔根据、假定〕1、物质对光的吸收具有加和性，即2、维生素A中的无关吸收在310~340nm范围内近似一条直线。14整理ppt效价为维生素A1的40%，

max345~350nm3.

相关物质的吸收a.

维生素A的衍生物维生素A2

去氢维生素A15整理ppt效价低于维生素A1，

max385~390nmb.

维生素A的氧化产物维生素A3

去水维生素A16整理ppt

c.

合成时的中间体侧连有4个双键—应有24〔16〕种异构体。目前，包括维生素A在内，共发现有6种异构体。它们是：e.

维生素A异构体d.

鲸醇维生素A醇的二聚体，没有生物活性17整理ppt名称顺反异构

max(nm)相对效价新维生素Aa2-顺式32875%新维生素Ab4-顺31924%新维生素Ac2,4-二顺31115%异维生素Aa6-顺32321%异维生素Ab2,6-二顺32424%维生素A全反式325~328100%18整理ppt新维生素Aa新维生素Ab19整理ppt新维生素Ac异维生素Aa20整理ppt异维生素Ab维生素A21整理ppt

1：维生素A的

max

2、

3：分别在

1两侧4、三个波长的选择方法

等波长差法：两个波长分别在

1两侧12nm处，即

1=328nm;

2=316nm;

3=340nm22整理pptVA在这两个波长下的吸光度应该等于

1下的吸光度的，即

1=325nm;

2=310nm;

3=334nm等吸光度法：23整理ppt5.方法Ch.p收载有2种方法。第一法〔适用于酯式维生素A的测定〕a.

操作方法规定波长：300、316、328、340和36024整理ppt

max不在326~329nm，第二法测定。b.

计算方法〔1〕最大吸收波长确认

max在326~329nm，第一法测定。25整理ppt测定波长吸光度吸光度比值吸光度比值差计算值规定值300

0.555

316

0.907

(326)

328

A328

1.000

(329)

340

0.811

360

0.299

26整理ppt〔2〕计算吸收度比及比值差首先要计算吸收度比值。然后计算吸收度的比值差。27整理ppt测定波长吸光度吸光度比值吸光度比值差计算值规定值300

0.555

316

0.907

(326)

328

A328

1.000

(329)

340

0.811

360

0.299

28整理ppt29整理ppt〔3〕计算校正吸收度吸收度校正公式：30整理ppt〔4〕换算因数定义：每一个数值所相当的效价。1IU=0.344

g全反式维生素A醋酸酯，1g的维生素A醋酸酯就相当于31整理ppt维生素A醋酸酯维生素A醋酸酯：1530〔环己烷、328〕32整理ppt

消除植物油干扰：适合VA醇第二法〔皂化法〕：在波长300、310、325、334nm处测定吸收度，找出λmax。1g维生素A醇所含VA的国际单位数=×1830b.计算33整理pptc.校正公式A325〔校〕=6.815A325-2.555A310-4.260A334d.判断

max不在323~327nm或A300/A325大于0.73，先纯化后再测定。max在323~327nm之间且A300/A325小于或等于0.73，那么：34整理ppt35整理ppt〔1〕VA遇光易氧化变质，操作应半暗室中快速进行，所用试剂不得含氧化性物质，以防VA受紫外线或氧化性物质破坏。本卷须知〔2〕用三校正法测定时，一点在λmax处，其余两点均为吸收曲线的上升和下降陡坡处。对波长的正确性要求严格。340nm处，假设波长误差±0.5nm，可影响结果-3.1~2.07%。所以测定时所用仪器的波长读数应注意，必要时应作标准对照。36整理ppt第二节维生素B1的分析一、化学结构与性质1.结构：氯化4-甲基-3[〔2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基〕甲基]-5-〔2-羟乙基〕噻唑嗡离子盐酸盐37整理ppta.氨基嘧啶—次甲基—噻唑环季铵化合物b.碱性基团：嘧啶环上的氨基噻唑环上的季铵

与酸成盐2.结构特点：38整理ppt①

硫色素反响VB1噻唑环在碱性条件下可被铁氰化钾K3Fe(CN)6等一些氧化剂氧化后，与嘧啶环上的氨基缩合成具有荧光的硫色素。3.性质：②

加碱分解后与醋酸铅反响VB1与NaOH试液一起加热，分解产生NaS，可与PbAc2反响生成PbS的黑色沉淀。39整理ppt③

沉淀反响VB1的含氮杂环，能和生物碱沉淀试剂反响产生沉淀。如：VB1与硅钨酸反响可生成组成一定的沉淀。重量法测定VB1含量。④

硫胺显碱性具有两个碱性基团:嘧啶环上的氨基、噻唑环上的季铵可以和酸成盐。如：盐酸硫胺、硝酸硫胺40整理ppt

⑤维生素B1的水溶液显氯化物的特征反响。⑥紫外吸收特性41整理ppt二.鉴别试验1.硫色素荧光反响42整理ppt可与某些生物碱沉淀试剂生成组成恒定的沉淀如：与碘化汞钾产生淡黄色沉淀与碘生成红色沉淀与硅钨酸生成白色沉淀与苦味酸生成扇形白色结晶2、沉淀反响：3、加碱分解后与醋酸铅反响43整理ppt非水滴定法〔Ch.P所用方法〕硅钨酸重量法银量法硫色素荧光法紫外分光光度法比色法络合滴定法三.含量测定44整理ppt1、原理：VB1分子中含有已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。2、方法：溶剂：冰醋酸〔醋酸汞〕指示剂：喹哪定红-亚甲蓝混合指示液滴定剂：高氯酸终点：天蓝色T=16.86mg/ml〔一〕非水溶液滴定法〔Ch.PVB1原料药〕45整理pptVB1分子中具有共轭双键结构。〔二〕紫外分光光度法〔Ch.PVB1制剂〕〔三〕硫色素荧光法硫色素反响所形成的硫色素与VB1的浓度成正比，可用于含量测定。46整理ppt第三节维生素C的分析一.化学结构二稀醇内酯手性碳47整理ppt③维生素C分子中具有2个手性C原子，具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是L〔+〕-抗坏血酸结构特点：①

具有内酯结构。碱性下可水解。

②

具有烯二醇基。☆复原性，能够被氧化成去氢抗坏血酸。☆酸性,能与碱成盐。48整理pptD(-)-异抗坏血酸L(+)-异抗坏血酸L(+)-抗坏血酸D(-)-抗坏血酸49整理ppt

1.

酸性烯二醇结构—酸性。▲C3-OH，pKa=4.17(共轭效应)酸性强，▲C2-OH，pKa=11.57(邻位羰基)酸性极弱，表现为一元酸。能与NaHCO3作用生成钠盐。二．性质与鉴别试验50整理ppt2.复原性〔烯二醇基〕去氢抗坏血酸51整理ppt3、糖类的反响VCHCl-CO2水解-H2O戊糖糠醛吡咯蓝色△4.

荧光反响5.

URBP52整理ppt

三、杂质检查1、溶液的澄清度与颜色检查内酯结构水解-CO2糠醛有色聚合物Ch.P〔2005〕VC原料、片剂、注射液2、铁、铜离子的检查Ch.P〔2005〕VC原料53整理ppt四、含量测定1.

碘量法

原理54整理ppt操作终点颜色：无色→蓝色1ml0.1mol/L碘液1ml相当于8.806mg

C6H8O655整理ppt

反响条件：＊酸性〔使VC在空气中氧化速度减慢〕＊溶剂：新沸放冷的水〔减少水中溶解氧的影响〕。

讨论复原性物质的影响及排除＊VC注射液中常加有亚硫酸盐如NaHSO3作为抗氧剂。排除：参加丙酮或甲醛56整理ppt+57整理ppt原理：在酸性下2,6-二氯吲哚酚氧化型是红色的;复原型是无色的酸性下直接用2,6-二氯吲哚酚滴定，用滴定剂自身的颜色变化指示终点，不需要另外的指示剂。2、2,6-二氯吲哚酚滴定法58整理ppt终点的颜色是溶液由无色变为红色。氧化型〔红色〕复原型〔无色〕++59整理ppt一．化学结构与性质第五节维生素E的分析60整理ppt1、硝酸反响本品，无水乙醇溶解，加硝酸，75℃加热约15分钟，显橙红色。2、水解后氧化反响本品，在碱性条