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文档简介

芒果叶及芒果苷研究进展

果实叶子是油漆科植物的果实。芒果苷是芒果叶中的主要活性成分。研究发现芒果苷是治疗呼吸系统疾病的主要有效成分,并在其他科属植物中相继被发现。随着研究的不断扩大和深入,揭示了芒果叶及芒果苷更为广泛的生理活性和药理活性。本文对近30年来芒果叶及芒果苷在生药学、制剂学、药理学及临床应用等方面的研究成果作一综述。1细胞束的显微观察芒果始载于宋《开宝本草》,叶的应用始见于《岭南采药录》。《陆川本草》、《南宁市药物志》(1959年,第一辑)和《全国中草药汇编》对芒果叶也有相应记载,但均附录于芒果项下。而单独将芒果叶作为中药记载则始于1977年的《中药大辞典》。据《广西中药材标准》记载:芒果叶气微,味微涩,呈长圆形至长圆状披针形,长10~30cm,革质,稍卷曲,灰棕色或灰绿色,中部宽,两端渐细,稍有光泽,先端尖或渐尖,边缘常呈波浪状,无锯齿,基部楔形。叶柄长4~6cm,基部膨大。其显微鉴别为上表皮细胞不规则,细胞壁呈波状弯曲。下表皮细胞不规则形。大小不一,细胞壁稍弯曲;气孔较少,不定式,副卫细胞3~4个;可察见众多腺毛,腺头圆形,内含棕色分泌物;腺柄短,腺柄细胞1~2个。叶横切面:表皮细胞1列,近方形,细胞淡黄绿色,外细胞壁稍厚,细胞腔内含有众多细小的结晶;皮层细胞椭圆形,分布有众多草酸钙结晶,有的细胞腔内含有2~3个方晶;韧皮部细胞类圆形或椭圆形,细胞较皮层的细胞小,分布有大量的草酸钙方晶;形成层明显成环,细胞较小;木质部较小,导管3~5个成群;木射线细胞3~5列。粉末:草酸钙方晶众多,大小不等,大多数为正方体形和长方体形,少数呈腰鼓形;纤维束随处可见,胞腔线形或稍大,木化,有些可察见圆形纹孔,有的纤维束周围的薄壁细胞中含有草酸钙方晶,形成晶纤维;有的薄壁细胞中同时含有2~3个草酸钙方晶;叶表皮细胞类圆形,有时可察见已破碎的腺鳞,内含有棕黄色物质。2芒果形貌和最佳溶出率20世纪六七十年代参加全国中草药普选的一个小组在广西百色发现,那里的群众常以芒果叶裹糍粑,或以芒果叶代茶饮用,因此患呼吸系统疾病者较少。很长一段时间内芒果叶无成药剂型,人们习惯将芒果叶作为草药煮水服用。1973年广西中医学院将芒果叶开发成为芒果止咳片,并于1982年获药“准”字号批文,1998年被列为国家中药保护品种,同年又被列为国家基本药物。目前芒果叶的制剂较少,主要有利用芒果叶提取芒果苷后的母液制成的芒果叶冲剂和以芒果叶为原料的芒果止咳片。经临床证明芒果叶中的芒果苷有较好的祛痰镇咳效果。刘华钢等以芒果苷为指标,用转蓝法在不同条件下测定芒果止咳片体外溶出率,经方差分析表明,同一批号样品在不同条件下的溶出速率有显著性差异,溶出速率与转速无显著相关性。吴玉强用薄层色谱法,经溶剂提取制备样品,以氯仿-醋酸乙酯-甲酸(3∶4∶2)为展开剂,在与对照品相应的位置,显相同颜色的荧光斑点。方法简便快捷,层析斑点清晰易判断。谢东等对芒果止咳片质量标准的鉴别方法进行改进,分别用石油醚(60~90℃)-醋酸乙酯(8.5∶1.5)、苯-无水乙醇(8∶3)、醋酸乙酯-甲醇-稀醋酸(8∶3∶3)为展开剂。结果供试色谱中在与对照品色谱相应的位置,显相同颜色的斑点。斑点清晰,重现性好。刘华钢等用反相高效液相色谱法测定了芒果止咳片中芒果苷的含量。Shim-packCLC-ODS柱,甲醇-0.05mol/LH3PO4(用三乙胺调pH=3,37∶63)为流动相,UV258nm波长处检测。平均回收率为97.8%,相对偏差为1.84%。方法快速、简便、准确。黄华艺等利用高效毛细血管电泳的自由溶液毛细管区带电泳(CZE)技术分析从芒果树叶中提取的芒果苷,是一种简便、快速、成本低和效果好的方法,在临床药物分析中尤其适用。3芒果苷及其提取芒果叶含抗坏血酸237mg%,鞣质11.73%,芒果苷6.9%及鞣花酸、ɖ-儿茶精、莽草精、奎尼酸、山奈醇、ι-α-侧柏烯等多种成分;EL-sissi等从芒果叶中分离到芒果苷、槲皮素、高芒果苷、原儿茶酸、没食子酸等成分并层析检出有没食子酸、没食子酸甲酯及异芒果苷。周沛椿等用芒果叶制成水煎液、水煮醇溶、总苷等,经药理实验筛选,证明芒果叶水煎60%醇溶部分有一定的镇咳作用并分离出有一定镇咳、祛痰作用的芒果苷和对流感病毒和金黄色葡萄球菌有抑制作用的没食子酸。陆仲毅等用芒果叶粗粉经95%乙醇回流提取、浓缩,过滤得滤液及滤渣。滤渣用50%乙醇及活性炭重结晶,经聚酰胺粉干柱低压层析,甲醇为洗脱剂,合并Rf为0.4的荧光斑点部分,蒸干,重结晶得芒果苷。合并Rf为0.5的荧光斑点部分,蒸干,用石油醚、氯仿处理后再以55%乙醇重结晶得到高芒果苷。将30%乙醇洗脱液分段收集a-d四部分,a部分分得芒果苷,d部分经浓缩后析出固体,经纤维素干柱层析,重结晶得异芒果苷。同时还从芒果叶中分离得到没食子酸乙酯、原儿茶酸、没食子酸、槲皮素、金丝桃苷。其中芒果苷是芒果叶的主要有效成分。芒果苷(mangiferin)是一种四羟基吡酮的碳糖苷,属双苯吡酮类化合物,在多种植物中存在,如漆树科植物芒果树、扁桃树(Mangiferapersiciformis)的叶、果实、树皮,龙胆科植物东北龙胆(GentianamanshuricaKitag),川西獐芽菜(SwertiamussotiiFranch),百合科植物知母(AnemarrhenaasphodeloidesBge.),水龙科植物光石韦[Pyrrosiaclvata(Bak)Chinl]等。思秀玲等用95%乙醇渗漉提取,减压回收乙醇,稠膏依次用石油醚、乙酸乙酯萃取,回收溶剂得到石油醚提取部、乙酸乙酯提取部、水层沉淀物。其中水层沉淀物用55%乙醇热提,冷却得到黄色针状结晶,经反复纯化处理得到芒果苷。黄海滨等应用空气爆破法研究芒果苷提取工艺,在芒果苷渗漉实验中效果显著,浸出率达到90%和100%所需的时间均比无爆破法缩短一半。渗漉最初3h,浸出率达41.8%,而无爆破法的只有27.6%。刘青等用水作溶剂从芒果叶中提取芒果苷,用正交设计法确定影响芒果苷提取率的因素,选择50℃水为溶剂,考察不同频率超声波对芒果苷提取率的影响。结果发现19kHz超声波50℃提取60min的提取率相当于常规水煎煮120min的提取率,超声波频率对提取率有显著影响。4关于卡其色药物的有效性研究4.1芒果苷的药效学广西中医学院芒果叶研究小组通过药理学实验证实芒果叶浸膏具有较好的镇咳、祛痰作用和一定的平喘作用。扁桃叶煎剂和复方扁桃叶煎膏均有显著的镇咳、祛痰作用,能显著延长Ach对豚鼠的致喘潜伏期。郑作文等对芒果止咳片进行药效学研究,表明其能明显延长豚鼠Ach引喘的潜伏期和对抗Ach所致气管平滑肌的收缩,对小鼠二氧化硫引咳能明显延长咳嗽潜伏期,并能减少刺激猫喉上神经引起的咳嗽次数,明显增加小鼠气管的酚红排泌量,具有平喘、止咳、化痰作用。邓家刚等进行芒果苷的药效学实验,发现芒果苷对豚鼠组胺、乙酰胆碱混合引喘有明显延长引喘潜伏期作用;对小鼠浓氨水引咳有明显延长引咳潜伏期并明显减少小鼠咳嗽次数;对小鼠气管的酚红排泌有明显促进作用。4.2芒果苷是受免疫调节作用的药物王伟等选择了4个芒果苷剂量(5,15,50,100μg)使其作用于老化红细胞,观察对老化红细胞免疫指标(RBC-C3bRR,RBC-ICR,RBC-CaR)的影响,结果50,100μg剂量组RBC-C3bRR,RBC-ICR,RBC-CaR比对照组明显增高,而LPO含量和对照组相比明显降低,而另有文献报道在应用体外诱生抗体方法研究中药免疫调节作用机理的实验中,证明芒果苷(0.1μg/ml)有免疫抑制作用而不影响细胞活力。于庆海等发现芒果苷能抑制化合物48/80诱发的大鼠腹腔肥大细胞组胺释放。有研究发现芒果苷对腹腔巨噬细胞有激活作用,采用48h间隔腹腔注射10μg/g体重的芒果苷能产生强的峰诱导效应。经芒果苷诱导的或体外芒果苷处理的腹腔巨噬细胞,其酸性磷酸酯酶活性增加,细胞毒性提高,对腹水纤维瘤细胞的吞噬作用增强,但体内芒果苷激活巨噬细胞的作用是短暂的。郑作文、邓家刚等分别对芒果止咳片、芒果苷进行抗炎试验,发现能抑制蛋清致大鼠足趾肿胀和冰醋酸所致腹腔通透性增加,具有明显的抗炎作用。芒果苷本身并不具有镇痛作用,即使剂量达40mg/kg(i.p),然而以该剂量给药30min后,芒果苷能明显增强次镇痛剂量吗啡(2mg/kg,i.p)的镇痛作用(P<0.001)。4.3对肝脏的保护作用成海龙等利用醋氨酚、四氯化碳和D-氨基半乳糖三种大鼠肝损伤模型研究芒果苷的肝保护作用,芒果苷能明显降低三种肝损伤模型大鼠血清的GPT和GOT水平,病理检查结果显示,芒果苷还能使大鼠肝损伤显著减轻,表明具有一定的肝保护作用。杜继曾等采用模拟高原急性低氧造成大鼠肝损伤的方法,观察芒果苷对肝脏的保护作用,在大鼠肝溶酶体体外温孵实验中,芒果苷有稳定溶酶体膜的作用,且对溶酶体酸性磷酸酶活力有直接抑制作用。芒果苷具有明显的利胆作用。按20mg/kg体重剂量经静脉给药,受试动物胆汁流量30min后开始增加(增加190%),60min后胆汁分泌量达高峰(增加290%),90min后开始下降(220%),至240min后几乎恢复正常。给药后30min,60min和90min的胆汁流量与基础胆汁流量比较有明显的统计学意义(P<0.001)。4.4抗氧化活性研究Sato在研究芒果苷抗脂质过氧化作用机理中发现,芒果苷能快速彻底地清除1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH),并抑制大鼠肝脏微粒体中由烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯还原酶(NADPH)或非酶类因子抗坏血酸、Fenton’s反应物引起的类脂化合物过氧化反应的启动阶段;而在微粒体酶促系统或亚麻酸氢过氧化物所致的过氧化反应系统的类脂化合物过氧化反应过程中,芒果苷没有终止作用。这些结果提示芒果苷具有抗氧化活性,可能由于与它能专一清除类脂化合物过氧化反应启动阶段的自由基有关。夏维木等研究芒果苷等5种黄酮类化合物对超氧阴离子、羟自由基和单线态氧(102)的清除作用,结果显示芒果苷有良好的清除活性氧作用,且量效关系明显。黄华艺等发现芒果苷对四氧嘧啶造模大鼠能降低其血清LOP和Hb含量,提高GSH-PX和RBC-CAT活性,能显著提高大鼠脑匀浆液SOD活性和LOP含量,但对大鼠脑匀浆线粒体MAO活性的影响无显著性。4.5芒果苷体外药动力学对hsv-的作用叶惠珍等的实验结果表明芒果叶浸膏在鸡胚内对流感病毒有一定的抑制作用。郑民实等用组织培养法对从芒果树叶中提取的芒果苷进行抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)作用的实验观察。检测其抗病毒药效时,采用原代人胚肌皮单层细胞,病毒对照组与给药组平行操作,25~250μg/ml药物直接或同时作用病毒以及先感染病毒后给药或先给药后感染病毒,结果显示芒果苷均能阻止病毒在细胞内复制。而朱雪梅等采用空斑减数试验与产量减数试验对芒果苷体外抗Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)作用的研究表明,芒果苷抑制50%空斑形成有效浓度(ED50)为111.7μg/ml。药物加入和去除试验结果提示芒果苷抗HSV-Ⅱ作用的机制可能是抑制病毒在细胞内复制的晚期。4.6芒果苷可显著降低肺癌细胞周期的血清中e-cad和mao黄华艺等用MTT法观察芒果苷对人肝癌细胞株增殖的抑制作用、对细胞的毒性作用、对细胞凋亡的诱导作用和对细胞周期的干预作用。结果显示出芒果苷对肝癌细胞株有明显的毒性作用,能诱导肝癌细胞凋亡和阻滞细胞周期于G2/M期,具有潜在的药用价值。用Walker256肝癌细胞和Wistar大鼠建立大鼠肝癌模型,用ELISA法检测血清中上皮钙粘蛋白(E-cad)和癌胚抗原(CEA)含量,酶法测定MAO含量,结果显示芒果苷有明显降低肝癌大鼠血清中E-cad和MAO作用,但对血清CEA无明显影响。芒果苷还能明显降低Walker256肝癌细胞系培养液中可溶性E-cad含量。提示芒果苷具有干预由E-cad介导的细胞粘附和细胞信号转导作用,同时对减缓肝硬化的形成也有明显作用。但具体针对这个过程中哪一个环节,是受体酪氨酸蛋白激酶或磷酸酶或其他成分,有待进一步研究。4.7芒果苷对戊巴比妥睡眠时间的影响Bhattacharya等在对龙胆科植物Canscoradecussate提取的芒果苷的系统研究中发现,芒果苷具有明显的中枢神经系统兴奋作用;50~100mg/kg剂量的芒果苷腹腔注射,可使所有受试动物出现动作震颤、竖毛、强迫性撕打和自主活动增加等症状。这些行为改变的高峰是在给药后30min,并维持至60min,120min后逐渐下降。若试验动物预先腹腔注射氯丙嗪5mg/kg,则可阻断芒果苷这些作用。说明芒果苷可能是中脑边缘系统D2受体的激动剂。实验动物在腹腔注射给戊巴比妥30mg/kg之前先腹腔注射芒果苷50mg/kg,可明显延长戊巴比妥睡眠时间。先给予芒果苷的大鼠睡眠时间为56.2±7.8min,而空白对照组为36.2±5.7min。50mg/kg剂量的芒果苷能明显加强轻度麻醉剂量的乙醇的麻醉作用。在该剂量范围,60%的小鼠失去正常的反射而空白对照组则无此现象。4.8ger’s液灌注蛙心刺激剂1~2mg剂量的芒果苷对正常或功能低下的离体Ringer’s液灌注蛙心均有短暂、确切的增强心肌收缩力的作用,且该作用不被心得安所阻断。因此,它可能是一种心脏直接刺激剂。芒果苷对麻醉动物的血压无明显影响。4.9不同抗菌活性成分对金葡菌抗菌作用的影响体外抗菌试验观察复方芒果叶、扁桃叶煎剂、芒果叶冲剂的抗菌作用,结果表明对金葡25023菌、金葡京耐菌、白葡萄球菌、奈氏球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、福氏杆菌、伤寒杆菌均有较好的抗菌作用。5芒果研磨片治疗慢性呼吸道感染的临床效果据记载,芒果叶能行气疏滞,去瘀积。用于热滞腹痛,气涨,小儿疳积,消渴。陈扬选于1973年12月至1974年10月,应用广西中医学院制药厂生产的芒果片对129例慢性支气管患者作了临床治疗观察,初步证明有较好的疗效。另据报道,慢性气管炎经一个疗程治疗后,总有效率93.02%,显效率达54.26%以上。1975年又对78例进行治疗观察,与1974年129例疗效相近似,总有效率93.6%,显效率达62.8%;对中西医各型慢性气管炎均有较好的疗效,尤以虚寒型、痰湿型或单纯型疗效更显著。未发现有任何毒性作用和不良反应。广西中医学院芒果叶浸膏香烟研究组将芒果叶加入香烟,能降低香烟中焦油、烟碱的含量;对患有慢性支气管炎的吸烟者,吸用芒果叶浸膏香烟后咳嗽、气喘、咯痰、口苦、口干

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