卡维地洛普萘对缺血性心律失常余

钾通道Kv4.2mRNA表达的研究1010410韩长余卡维地洛、普萘洛尔对大鼠缺血性心律失常研究背景及意义：目前，卡维地洛、普萘洛尔对心肌电生理学特性影响的有关研究较少。随着研究的继续深入，相关报道会愈来愈多，这将进一步为临床应用卡维地洛、普萘洛尔治疗心律失常提供药理学理论基础。研究的主要内容：通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型，监测心电图。卡维地洛1小时：空白对照组（Sham），心肌梗死模型组（MI），卡维地洛组（Carvedilol）：普萘洛尔48小时：空白对照组（Sham），心肌梗死模型组（MI），给药组（Propranolol）。提取大鼠缺血区心肌组织总RNA，应用半定量逆转录-聚合酶链反应RT-PCR技术，琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统检测各组Kv4.2mRNA水平。研究所需条件：健康成年雄性Wistar大鼠，体重150克-250克。超净工作台；紫外分光光度仪；微型离心机；涡旋混合器；PCR仪；水平电泳槽；-86度ULT冰箱；制冰机；超纯水系统；电子天平；生物机能实验系统。普萘洛尔；卡维地洛；RT-PCR反应体系试剂盒；引物；Taq酶；Trizol；液氮；氯仿；异丙醇；DNAMarker；无水乙醇。研究假设：短期内（1小时）卡维地洛对心律失常的大鼠心肌Kv4.2mRNA有一定恢复作用。短期内（48小时）普萘洛尔对心律失常的大鼠心肌Kv4.2mRNA有一定恢复作用。主要研究方法：构建心肌梗死模型提总RNA应用半定量逆转录-聚合酶链反应RT-PCR技术琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统分析研究结果：

在大鼠麻醉后，记录正常标准II导联心电图一段时间。在左冠状动脉前降支结扎后，记录1小时心电图。出现S-T段拾高，并渐与QRS波融合，QRS波增宽、增高、心律失常等，说明心肌梗死模型建立成功。

研究结果：图1正常大鼠心电图图2结扎成功缺血模型心电图图3室性早搏图4室速图5室颤研究结果：以大鼠心肌总RNA为模板，在同一反应体系中以特异性引物同时扩增Kv4.2和β-actin的特异片段，在1.0%琼脂糖凝胶电泳后可见在345bp处及250bp处各出现条带，与预期的目的条带位置相符，结果见图6.

研究结果：图6.提总RNA电泳图

500bp250bp345bp-kv4.2250bp-β-actinMarkerShamMICar图6PCR产物电泳图345bp研究结果：结果显示，心肌梗死模型的大鼠心肌钾通道Kv4.2mRNA表达低于假手术组（p<0.05，n=3），卡维地洛组Kv4.2mRNA表达低于假手术组（p<0.05，n=3），卡维地洛组Kv4.2mRNA表达比心肌梗死模型组稍高，但不具有统计学意义，结果见图7。研究结果：图7.PCR产物电泳图

研究结果：

以大鼠心肌总RNA为模板，在同一反应体系中以特异性引物同时扩增Kv4.2和β-actin的特异片段，在1.0%琼脂糖凝胶电泳后可见在500bp处及345bp处各出现条带，与预期的目的条带位置相符，结果见图8。

研究结果：图8.大鼠MI后1小时Kv4.2mRNA表达水平的变化250bp500bp345bp-kv4.2500-β-actinMarkerShamMIPro图8PCR产物电泳图345bp研究结果：

结果显示，心肌梗死模型的大鼠心肌钾通道Kv4.2mRNA表达低于假手术组（p<0.01，n=4），普萘洛尔组Kv4.2mRNA表达高于心肌梗死模型组（p<0.05，n=4），但普萘洛尔组Kv4.2mRNA表达仍低于假手术组（p<0.05，n=4），结果见图9。研究结果：图9PCR产物电泳图研究结论：卡维地洛，普萘洛尔作为β受体阻滞剂，通过阻断β受体，降低胞内cAMP水平，使PKA活性减弱，Raf-1的活性增强，从而使Kv4.2RNA表达量提高。但因卡维地洛作用时间仅1小时，现象不明显。而普萘洛尔作用时间为48小时，因此Raf-1的活性增强较明显，从而使Kv4.2mRNA表达量提高较多，但仍低于假手术组。研究结论：一、心肌梗死模型组Kv4.2mRNA表达与假手术组