第十章-免疫学的应用课件

第十章 免疫学的应用第一节 免疫诊断与检测10/22/20232一、免疫诊断试剂免疫诊断是应用已知诊断试剂，对患病动物进行抗原或抗体的测定，从而诊断疾病。用微生物制成抗原诊断液，即利用细菌或病毒经过培养后，将菌体（病毒）灭活（或将菌体裂解）后

制成。应用凝集反应的有：布氏杆菌试管凝集抗原、

鸡白痢杆菌有色抗原；用于补体结合反应的鼻疽杆菌、布氏杆菌补体结合反应抗原。用于变态反应变应原，如结核菌素、鼻疽菌素，则是用细菌培养、浓缩、裂解、抽提而制成诊断液。诊断血清是用抗原免疫动物而制成的，一般采用给动物多次注射抗原，然后采集免疫动物血液，分离血清，加入一定防腐剂而制成。免疫血清经过提纯后得到IgG，再用酶、荧光染料、放射性同位素标记，制成标记抗体。我国一些生物制品厂作为商品进行生产的，有用辣根过氧化物酶标记的抗体，如猪瘟酶标抗体、羊抗兔酶标抗体。用荧光染料标记抗体，有猪瘟荧光抗体、鸡新城疫荧光抗体。用同位素标记的抗体，有测定动物激素含量的试剂盒等。10/22/20233二、免疫诊断与检测的应用10/22/20234（一）用于家畜传染病的检疫1.用血清学方法诊断疫病利用抗原抗体反应的特异性、敏感性来诊断疾病。用已知抗原诊断液，检查患病动物血清中是否存在有相应的特异性抗体，借以诊断传染病。亦可用已知诊断血清或标记抗体，检查动物体内及排泄物中是否存在特异性抗原，用以检查病原体的存在。常用的血清学诊断方法有沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应等。2.用变态反应进行家畜的检疫用变应原如结核菌素，给牛点眼或皮内注射，看其是否发生炎症反应来判定其是否感染结核杆菌。用鼻疽菌素给马点眼，检查是否感染了马鼻疽杆菌。此外，还有检查布氏病的布氏杆菌水解素等。10/22/20235（二）用于病原的分型与鉴定10/22/20236用已知抗血清或不同型的单因子血清，对分离的病原菌进行鉴定，以确诊该病原。用单因子血清分析细菌的抗原组分，确定细菌的类型，如用沙门氏菌的单因子血清分析待检沙门氏菌的菌体抗原及鞭毛抗原的种类，从而确定该菌属何种沙门氏菌。（三）细胞免疫功能的检测10/22/20237动物机体对疾病的抵抗力，决定于机体

的免疫状态，其免疫力的强弱除了抗体外，还有细胞免疫功能。测定细胞免疫功能，能说明机体的总体免疫力，对疫病的预防及治疗具有重要的指导意义。1.E玫瑰花环试验T淋巴细胞有绵羊红细胞的受体，将红细胞

加入T细胞中，则几个红细胞结合于T细胞表面形成花环，这种花环称E玫瑰花环，可用以测定T细胞数。如人、猪T细胞可与绵羊红细胞形成花环。10/22/20238EA

玫瑰花环试验

B

细胞膜上有抗体受体，鸡红细胞与抗鸡红细胞的抗体结合后，能结合在

B细胞表面而形成花环，这种花环可用于B细胞的测定。淋巴细胞转化试验

T 细胞在植物(PHA)作用下，转化为淋巴母细胞，T细胞转换率高，则T细胞的免疫活性强，可用以测定T细胞的功能。10/22/20239抑制移动试验

机体中的致敏淋巴细胞

受抗原刺激后，能释放抑制移动因子，使白细胞、巨噬细胞停留在抗原作用的部位，增强对抗原作用的免疫能力。此试验可用毛细管法或琼脂糖平皿法。淋巴细胞毒试验

测定淋巴细胞杀伤能力，以测定机体的免疫力。10/22/202310第二节 免疫预防及免疫治疗10/22/202311免疫学应用的一个重要目标是免疫预防及免疫治疗，就是利用人工自动免疫与人工被动免疫两方面。人工自动免疫是给动物注射（或吸入、饮服）一定种类的疫（菌）苗或类毒素，使其产生对该种微生物的抵抗力，以达到预防传染的目的。人工被动免疫是给动物注射免疫血清（或病愈动物血清），使动物获得免疫性，用于紧急预防或治疗传染病。一、免疫预防10/22/202312（一）疫苗的种类动物机体获得对某种传染病的免疫力可通过4种途径：天然主动获得—自然感染病愈（免疫时间长）。人工主动获得—接种疫苗（较长）。天然被动获得—幼畜从初乳获得母源抗体；幼禽从卵黄获得母源抗体(短)。人工被动获得—人工注射免疫血清或高免蛋黄（短）。疫苗概念：给动物进行人工主动免疫的生物制品。1.活疫苗10/22/202313简称活苗.有强毒苗、弱毒苗和异源苗三种。强毒苗是应用最早的疫苗种类。使用强毒进行

免疫有较大的危险性，非情况特殊不宜采用。弱毒苗是目前应用最广泛的疫苗，特点：10/22/202314注射后可在动物体内短期繁殖用量少，不需佐剂可诱导体液免疫、细胞免疫,刺激机体产生干扰素研究过程较长，保存条件要求冻干冷藏，毒力有返强的潜在危险异源苗是用具有共同保护抗原的不同种病毒制备的疫苗。例如用火鸡疱疹病毒（HVT）接种鸡，

预防鸡马立克氏病，用鸽痘病毒预防鸡痘，等等。2.死苗（灭活苗、灭能苗）10/22/202315研制：选择毒力强、免疫原性好的毒株大量培养,加0.4%左右甲醛灭活，保留免疫原性+佐剂。特点：研制时间较短，安全，可常温保存。免疫原性较差，只产生体液免疫，效果比弱毒疫苗差。用量较大，须加入适当的佐剂。3.类毒素——外毒素的灭活苗研制：液体大量培养产毒细菌,去除菌体，提取外毒素+甲醛，灭活成类毒素+佐剂。

应用：(1)直接作疫苗注射(2)反复注射免疫马匹，制备抗毒素血清。4.多价苗——同种病原微生物多种血清型毒株制成的疫苗(例如大肠杆菌多价苗、禽流感多价苗)

。10/22/202316多联苗——不同种病原微生物联合制成的疫苗例:新支二联苗(新城疫病毒+传染性支气管炎毒)。

猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联苗犬瘟热/腺病毒/传染性肝炎/副流感/细小病毒钩端螺旋体六联苗。特点:一针防多种病，节约人力、物力注意:疫苗不能任意混合注射，可能互相干扰。10/22/2023175.亚单位疫苗——提取细菌或病毒结构中

的有效抗原+佐剂例如：猪大肠杆菌菌毛K88苗禽巴氏杆菌微荚膜苗特点：安全，成本高10/22/2023186.基因工程疫苗10/22/202319A

.基因工程亚单位苗基因工程亚单位疫苗是用DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗原的基因导入受体菌（如大肠杆菌）或细胞，使其在受体细胞中高效表达，分

泌保护性抗原肽链，然后提取保护性抗原肽链，加入佐剂即制成基因工程亚单位疫苗。如预防仔猪和犊牛下痢的大肠杆菌菌毛基因工程疫苗，是一个成功的例子。B

.基因工程活载体苗是用基因工程技术将保护性抗原基因（目的基因）转移到载体中，使之表达。痘病毒、腺病毒和疱疹病毒等都可以用作载体。国外已

研制出以腺病毒为载体的乙肝疫苗和以疱疹病

毒为载体的新城疫疫苗等。10/22/202320C

.基因缺失苗是用基因工程技术将强毒株毒力相关的基因切除构建的活疫苗。此种疫苗安全性好，不易返

祖；其免疫接种与强毒感染相似，机体可对病毒

的多种抗原产生免疫应答；免疫力坚实，免疫期

长，尤其是适于局部接种，诱导产生黏膜免疫力，因而是较理想的疫苗。目前已有多种基因缺失疫

苗问世，猪伪狂犬病基因缺失疫苗已商品化并普遍使用。10/22/2023217.

诊断液豚鼠概念：用于诊断传染病或寄生虫病的生物制品类型：

诊断抗原 诊断抗体冻干补体制备：

用已知细菌病 用已知细菌病毒高血清毒等灭活制成 免血清,标记抗体等

用途：

检血清抗体,诊 鉴定抗原,诊断急性 补体结合试验断慢性传染病 传染病例：布氏杆菌抗原鸡白痢抗原沙门氏菌因子血清、猪瘟荧光抗体结核菌素10/22/2023228、免疫血清10/22/202323概念：用已知病原免疫动物制备的高效价抗血清。类型：

抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清。用途：免疫治疗或作短期被动免疫例：破伤风抗毒素、小鹅瘟血清、鸭肝炎血清。（二）免疫途径10/22/202324接种疫苗的途径有滴鼻、点眼、刺种、注射、饮水和气雾等，应根据疫苗的类型、疫病的特点及免疫程序来选择每次免疫的

接种途径。例如灭活疫苗、类毒素和亚单位疫苗都不能经消化道接种，一般用于肌肉或皮下注射。注射时应选择活动量小的易于注射的部位，如家畜颈部皮下、家禽胸部肌肉等。1.滴鼻与点眼10/22/202325免疫效果较好，仅用于接种弱毒疫苗，

可直接刺激眼底哈德腺和结膜下弥散淋巴组织。另外还可刺激鼻、咽、口腔黏膜和扁桃体等，产生局部免疫。据报道，在新城疫免疫中，滴鼻和点眼产生的抗体效价比饮水接种高4倍，而且免疫期也长。但该方法比较麻烦，费劳力，因而对大群鸡免疫很困难。2.饮水免疫10/22/202326是最方便的疫苗接种方法，适用于大

型鸡群，但只有当疫苗接触到鼻咽部黏膜时才引起免疫反应，当其进入腺胃时在较酸的环境中很快死亡，失去作用。饮水免疫的免疫效果较差，不适于初次免疫。3.刺种与注射10/22/202327也是常用的免疫方法，适用于某些弱毒苗如鸡痘与鸡马立克氏病免疫。另外，灭活苗的免疫也必须用注射的方法进行。刺种与注射方法免疫确实，效果好。4.气雾免疫10/22/202328分为喷雾（Spray）免疫和气溶胶（Aerosol）

免疫两种方式。喷雾免疫的雾粒大小为10～100µm，气溶胶为<1～50µm。在新城疫免疫中，气雾免疫效果较好，不仅可诱导产生循环抗体，而且也可以产生局部免疫力。但气雾免疫会造成一定程度的应激反应，容易引起呼吸道感染。试验证明，气雾引起的应激反应程度与雾粒的大小成反比，因此在有呼吸道病史的鸡场，更适于采用较大雾滴气雾免疫。（三）免疫程序10/22/202329免疫程序概念：不同畜群、禽群应该接种的各种疫苗的最适计划。包括各种疫苗的一免、二免、

三免……的安排。制订免疫程序的基本原则：10/22/202330.一免注意幼畜（禽）母源抗体水平。.二免、三免…注意原有抗体水平。.注意疫病在本地区的流行情况及规律、疫苗的种类、性质和免疫途径等。.注意畜群健康情况。二 免疫治疗10/22/202331（一）高免疫血清及免疫球蛋白的制备及应用给传染病病畜注射抗该病原的高免血清或病愈动物的血清，能起到治疗作用。（二）单克隆抗体10/22/202332单克隆抗体是从一个细胞经无性繁殖而来的具有同一基因型的细胞群。其概念是：由个克隆化的淋巴细胞杂交瘤细胞所产生的高度同质性的抗体，成为单克隆抗体。单克隆抗体目前应用于制备标准诊断剂及治疗用的高效价血清，同时应用于免疫机制

的探讨及抗原决定簇的研究。经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量Study