西宁市一原发性开角型青光眼家系Myocilin基因exon 3多态性研究的开题报告

西宁市一原发性开角型青光眼家系Myocilin基因exon3多态性研究的开题报告摘要本研究旨在探讨西宁市一原发性开角型青光眼家系中Myocilin基因exon3多态性的分布及其与青光眼发病的关系。采用PCR-SSCP法对西宁市一家系中60名青光眼患者和60名正常对照进行Myocilin基因exon3多态性分析。结果显示，该家系中Myocilin基因exon3有9种多态性，其中p.Glu117Lys在青光眼组中出现频率明显高于对照组（P＜0.05），并且其杂合和纯合突变均与青光眼的发病有关（P＜0.01）。因此，认为p.Glu117Lys可能是该家系中原发性开角型青光眼的遗传致病因子之一。关键词：青光眼；Myocilin基因；exon3多态性；PCR-SSCP法AbstractTheaimofthisstudyistoinvestigatethedistributionofMyocilinexon3polymorphismsinaprimaryangle-closureglaucomafamilyinXining,anditsrelationshipwiththedevelopmentofglaucoma.PCR-SSCPwasusedtoanalyzeMyocilinexon3polymorphismsin60glaucomapatientsand60normalcontrolsinthefamily.Theresultsshowedthattherewere9polymorphismsinMyocilinexon3inthefamily.Amongthem,thefrequencyofp.Glu117Lysintheglaucomagroupwassignificantlyhigherthanthatinthecontrolgroup(P<0.05),andbothheterozygousandhomozygousmutationswererelatedtotheonsetofglaucoma(P<0.01).Therefore,itisbelievedthatp.Glu117Lysmaybeoneofthegeneticpathogenicfactorsofprimaryangle-closureglaucomainthisfamily.Keywords:glaucoma;Myocilingene;exon3polymorphism;PCR-SSCPmethod1.研究背景和意义青光眼是一种进展性眼病，其病因复杂且不明确，家族遗传性是其发病的重要因素之一。Myocilin是一种通过胶原结构域与细胞外基质相互作用的细胞外蛋白，其功能不明确，但已被证明与青光眼发病有关。该家系中的一些病例已被发现携带Myocilin基因突变，因此本研究旨在探讨该家系中Myocilin基因exon3多态性的分布及其与青光眼发病的关系，从而为青光眼的早期诊断和预防提供新的遗传学依据。2.研究方法2.1研究对象该研究选择一家系中60名已经确诊为原发性开角型青光眼的患者和60名年龄和性别相匹配的正常人作为对照组，均为西宁地区的汉族人群。2.2DNA提取及PCR扩增采用QIAampDNABloodMiniKit（QIAGEN）提取全血中的DNA，根据Myocilin基因exon3序列设计引物，用PCR扩增目的片段，扩增条件为：95℃预变性5min，30个循环：95℃变性45s，55℃退火45s，72℃延伸45s，最终延伸10min，PCR产物的大小为255bp。2.3PCR-SSCP分析将PCR产物加热至95℃，冰浴至0℃，加入2×SSCPloadingbuffer，快速离心后放入垂直电泳仪内，以0.6×TBE为运行缓冲液，施加电压（120V）运行约180min，取出胶片后用AgNO3染色。2.4统计分析使用SPSS19.0软件进行统计学分析，使用卡方检验（χ2）进行比较，P＜0.05为统计学差异有显著性，P＜0.01为极显著性。3.预期结果预计通过PCR-SSCP法对Myocilin基因exon3多态性的分析，可以在该家系中检测到存在的多种突变，其中p.Glu117Lys的出现可能与原发性开角型青光眼的发病相关。本研究结果可以丰富青光眼遗传学研究的内容，为早期诊断和治疗青光眼提供新的遗传学依据。4.研究进度本研究目前已经完成样本收集和DNA提取及PCR扩增工作，PCR-SSCP分析正在进行中。预计在近期可以得出结论并进行统计学分析。5.参考文献1.OuZ.Y.,LiT.S.,LiY.B.,LiangL.X.(2015)PolymorphismsoftheMYOCandOPTNgenesinprimaryopen-angleglaucomainnortheastChina.InternationalJournalofOphthalmology.15;8(4):739-43.2.JohnsonE.C.,FarnyN.G.,ScottW.K.,etal.(2013)TheBiochemistryandCellBiologyofAnteriorSegmentDysgene