宫炎平胶囊中四味药材的薄层色谱鉴别

宫炎平胶囊中四味药材的薄层色谱鉴别

宫炎平胶囊的制备方法是根据《中华人民共和国卫生部药物标准》中的中药成方制剂（第17卷）和“宫炎平片”（标准号：ws3-b-328-98）来确定的。应用原剂型“宫炎平片”质量标准对“宫炎平胶囊”进行质量控制,多采用理化鉴别的方法,地稔和两面针药材的薄层色谱鉴别斑点检出不明显,专属性较差,无法真正反映宫炎平胶囊的内在质量。为了更好地控制药品质量,2011年对宫炎平胶囊的质量标准进行了研究,建立制剂中地稔、两面针、当归、五指毛桃四味药材的薄层色谱鉴别方法,以提高“宫炎平胶囊”质量的可控性,为安全有效用药提供保障。1设备和材料1.1仪器和检测设备REPROSTAR3薄层色谱成像系统(瑞士GAMAG公司),TCQ-250型超声波清洗器(北京医疗设备厂),JA1203型电子天平(上海天平仪器厂),电热恒温水浴锅(上海衡平仪器仪表厂),CamagTLCSamplER4型自动点样仪(瑞士)。1.2药品对照品宫炎平胶囊(贵州省药物制剂重点实验室提供,批号20091004、20091009、20091013),没食子酸对照品(批号110770-2005110),补骨脂素对照品(批号110739-200511),阿魏酸对照品(批号110773-200611),两面针对照药材(批号21014-200302)均购至中国药品生物制品检定所;地稔对照药材(贵州省药物制剂重点实验室提供,由贵阳医学院药学院生药学教研室鉴定为正品),阴性对照品(自制),硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂),其它试剂均为分析纯。2方法和结果2.1阴性对照品溶液取宫炎平胶囊内容物1g,加70%乙醇25ml,加热回流1h,过滤,滤液蒸干,残渣加水20ml微热溶解,以稀盐酸调pH值至2,醋酸乙酯提取3次,每次15ml,醋酸乙酯液加无水硫酸钠适量,过滤,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液。配制缺地稔药材的样品,按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取地稔对照药材2g,加水40ml,加热回流1h,滤过,滤液浓缩至约10ml,加乙醇20ml,摇匀,静置1h,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml微热溶解,以下操作同供试品溶液制备方法制备对照药材溶液。取没食子酸对照品,加甲醇制成0.2g/L的溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验方法,分别吸取上述4种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-醋酸乙酯-甲酸(5∶4∶0.8)为展开剂,展开、取出、晾干,喷以2%三氯化铁乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,置日光下检视,供试品在与对照品、对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。见图1。2.2阴性对照溶液的制备取宫炎平胶囊内容物1g,加70%乙醇30ml,加热回流1h,过滤,滤液蒸干,残渣加水25ml微热溶解,用正丁醇提取2次,每次15ml,过滤,滤液蒸干,残渣加甲醇2ml,溶解后作为供试品溶液。配制缺两面针药材的样品,按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取两面针对照药材0.5g,加水25ml,加热回流1h,过滤,滤液浓缩至约5ml,加乙醇10ml,摇匀,静置30min,过滤,滤液蒸干,残渣加水25ml微热溶解,以下操作同供试品溶液制备方法制备对照药材溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验方法,吸取上述两3种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,使之成条带状,以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂,展开、取出、晾干,喷改良碘化铋钾试液溶液,日光下检视,供试品在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照无干扰。见图2。2.3阿魏酸的鉴别取宫炎平胶囊内容物2g,加70%乙醇50ml,加热回流1h,过滤,滤液蒸干,残渣加水25ml微热溶解,以稀盐酸调pH值至2,用乙醚提取3次,每次15ml,乙醚液用2%碳酸钠溶液提取2次,每次10ml,碳酸钠液用醋酸乙酯提取2次,每次15ml,弃醋酸乙酯液,碳酸钠液用稀盐酸调pH值至2,以乙醚提取3次,每次15ml,乙醚液加无水硫酸钠适量,过滤,浓缩至干,残渣加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液。配制缺当归药材的样品,按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取阿魏酸对照品,加甲醇制成0.2g/L的溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验方法,吸取上述3种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-氯仿-冰醋酸(6∶5∶1)为展开剂,展开、取出、晾干。置紫外光灯(365nm)下检视。供试品在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。色谱分离好,斑点显色清晰。阴性对照无干扰。见图3。2.4种抗菌材料的总含量5.宫炎平胶囊内容物2g,加70%乙醇50ml,加热回流1h,过滤,滤液蒸干,残渣加水25ml微热溶解,用氯仿20ml提取,氯仿液蒸干,残渣加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液。配制缺五指毛桃药材的样品,按照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。取补骨脂素对照品,加甲醇制成0.2g/L的溶液,作为对照品溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录ⅥB)试验方法,吸取上述3种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-甲苯-醋酸乙酯(5∶5∶1.5)为展开剂,展开、取出、晾干。见图4。喷以10%氢氧化钾乙醇溶液,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。3地光药物的鉴别经多次实验,改进了地稔、两面针药材的薄层色谱鉴别方法,并增加了当归、五指毛桃药材的薄层色谱鉴别方法,实验结果表明,斑点分离清晰,重现性好,阴性对照无干扰,检测方法用于控制宫炎平胶囊的质量,具有专属性强、重现性好的优点,可有效控制宫炎平胶囊的质量。根据文献资料和试验结果表明,地稔药材含没食子酸,故在制剂中地稔药材的鉴别以地稔对照药材和没食子酸对照品作对照,薄层色谱检出明