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食用百合与药用百合化学成分比较

《神农本草经》记载了《百合》,后历代的草本植物都有记载。《中华人民共和国药典》(2005年版一部)规定为百合科植物卷丹Liliumlancifolium.百合LiliumbrowniiF.E.Browniivar.viridulumBaker.细叶百合LiliumpumilumDC.的干燥肉质鳞叶。百合性味甘寒,具有养阴润肺,清心安神之功,用于治疗阴虚久咳,痰中带血,虚烦惊悸,失眠多梦,精神恍惚等症。全世界百合有100多种,产于我国的有39种,其中有10个品种可供食用,临床上药用的多为药典收载的3个品种。江苏宜兴、湖南邵阳、甘肃兰州、浙江湖州栽培百合历史悠久,为全国“四大百合产区”。其中兰州百合为川百合变种(L.davidiiDuch.var.willmottiae(Wiison)Raffil),也叫菜百合、大百合。鳞茎白色,球形或扁球形,鳞片扁平,肥厚宽大,洁白如玉,品质细腻无渣,纤维少,含糖量高,香棉纯甜,无苦味,故称兰州甜百合,为我国食用百合最佳品种,目前主要作为蔬菜食用。有报道大百合用于临床治疗虚烦不眠28例,症状均无明显改善。用于治疗肺热咳嗽23例,其中19例症状无明显改善,4例配伍其他清肺止咳药,症状减轻。所以认为大百合(食用百合)不能作为药用百合用于临床。为此,有必要对食用百合和药用百合作一区别。笔者通过对4个主产地7个样品的浸出物及多糖含量测定、HPLC法、指纹图谱相似度检查、GC-MS法,对食用百合及药用百合的作了一次较为全面的化学成分比较,为临床准确用药提供实验依据。各样品产地分别如下:江苏宜兴、浙江嘉兴、浙江湖州、湖南龙山、湖南隆回、江西万载、甘肃兰州。其中前6个产地为药用百合品种,甘肃兰州为食用百合品种。各样品均经南京中医药大学鉴定教研室陈建伟教授鉴定。1提取物含量的比较按照2005版药典一部附录XA项下浸出物测定法测定,水和醇浸出物值见表1。2百合多糖多糖标准曲线的绘制对照品溶液的制备:精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖5.0mg,至50mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液(C=0.10g/mL)。供试品溶液的制备:精密称取各产地百合生品粉末(60目)各5.0g,加入80%乙醇超声30min,抽滤,分别取上述药渣,挥干乙醇,以水超声提取两次,每次加水50mL,超声30min,2500转/min离心15min,分离上清液,合并两次上清液,减压回收至含药材0.5g/mL,加无水乙醇至含醇量80%,静置24h,抽滤,滤渣用无水乙醇、乙醚反复洗涤,真空干燥,称重。精密称取百合多糖10mg,用蒸馏水溶解并定容至100mL,作为供试品溶液。精密吸取不同产地百合多糖供试品液、对照品液、蒸馏水各2mL置干燥刻度试管中,分别加入5%苯酚溶液1.0mL,摇匀,然后加入浓H2SO49mL摇匀,另以1.0mL水同上操作,作为空白液,于沸水浴中恒温30min,取出,冰水冷却15min后,在波长488nm处测其吸光度值,绘制标准曲线,计算得回归方程A=6.13C+0.0252,r=0.9998,P<001。多糖换算因素的测定:精密称取真空干燥的百合多糖10.0mg,用蒸馏水溶解后定容到100mL容量瓶中,混匀,作为多糖储备液。精确量取多糖储备液2.0mL,按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素:f=W/CD,式中:W为粗多糖含量(mg),C为多糖液中葡萄糖的浓度(mg/mL),D为多糖的稀释因素。测得f=0.6653根据回归方程及换算因素计算5.0g药材多糖含量,结果见表1。3百合液相色谱测定仪器:Agilent1100液相色谱仪(美国惠普公司);电子天平(MettlerToledoAG285)。色谱条件:色谱柱:EclipseXDBC18–ODS(4.6×250mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱。柱温30℃,检测波长:305nm,参比波长:480nm。流速:1.0ml/min。供试品溶液制备:分别精密称取各百合样品(过60目筛)各1g,置25mL容量瓶中,加入75%甲醇定容,超声提取(功率250W,频率20KHZ)60min,滤过,再用75%甲醇定容至25mL,取上清夜15000rpm离心15min后,通过孔径为0.45μm的微孔滤膜,滤液作为供试品溶液。测定法:取供试品溶液20μL注入液相色谱仪,得各样品的液相色谱图。因篇幅所限就以主流产地江苏宜兴的卷丹液相色谱图与兰州百合相比较,见图1、图2。HPLC谱图表明食用百合与药用百合有明显的区别。4相似度评价结果将各百合样品按HPLC法项下的供试品溶液制备方法及色谱条件,注入高效液相色谱仪分析,利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件系统(由浙江大学研发),进行相似度的评价,具体数值见表4。从不同产地百合药材相似度计算结果以及液相图谱可以看出,4个卷丹样本的相似度均在0.96以上;而2个百合样本的相似度小于0.95而大于0.85;平时只作食用而不作药用的兰州产川百合相似度小于0.63。由此可见此共有模式不但可区分药用与非药用百合品种,而且可以区分不同来源的药用百合.但是其对同品种不同产地的百合区分意义不大。5回复加量试验仪器及操作条件:HP-6890GC/5973NMS气-质联用仪(美国安捷伦公司);HP7683自动进样器;色谱柱:HP-5MS5%PhenylMethylSiloxane,柱长:30m,液膜厚度:0.25μm,内径:0.25mm;载气:He;进样口压力:13.5psi;恒流模式:0.8mL/min;进样口温度:260℃;柱温:程序升温初始50℃,以每分钟8℃升至160℃后以3℃每分钟升至206℃,保留10min,再以以3℃每分钟升至260℃,保留20分钟;离子源温度:230℃,四级杆温度150℃;电离方式:EI:电子能量:70eV;溶剂延迟时间为5min;质量扫描范围:50~500u;采集方式:扫描。进样量1μl。供试品溶液的制备:精密称取各百合样品2g,置50mL锥形瓶中,加人20mL三氯甲烷浸泡20min,超声提取(功率250W,频率20kHz)60min,0.45μm的微孔滤膜滤过,挥干溶剂,三氯甲烷定容至1mL作为供试品溶液。测定法:精密吸取各供试品溶液各1μL,注入气相色谱仪测定,分别得到总离子流图,因篇幅所限就以主流产地江苏宜兴的卷丹气相色谱图与兰州百合相比较,见图3、图4。GC-MS图表明药用百合与食用百合具有明显的区别。6兰州百合的药用特性本实验采用五种方法对食用百合与药用百合化学成分进行比较,其结果表明,食用百合与药用百合的差异性显著,药典亦未将川百合收载为药

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