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ICS67.120.30DB21/T3848DB21/T3848—2023

DB21辽 宁 省 地 方 标 准DB21/T3848—2023中华小长臂虾种质鉴定规范发布辽宁省市场监督管理局2023发布辽宁省市场监督管理局2023113020231030DB21/T3848DB21/T3848—2023前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位:沈阳农业大学。本文件主要起草人:李应东、赵莹莹、李晓东、魏华、胡清彪、姜宏波、邢跃楠、包杰、丰程程、于业辉。I(号242347862。文件起草单位通讯地址:沈阳农业大学(沈阳市沈河区东陵路120号),联系电话DB21/T3848DB21/T3848—2023DB21/T3848DB21/T3848—2023中华小长臂虾种质鉴定规范范围本文件适用于中华小长臂虾的种质鉴定。规范性引用文件(包括所有的修改单适用于本文件。GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分:检验规则GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分:抽样方法1GB/T18654.14养殖鱼类种质检验 第14部分DNA含量的测定SC/T1102-2008虾类性状测定术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。学名与分类学名中华小长臂虾分类地位1GB/T18654.14养殖鱼类种质检验 第14部分DNA含量的测定SC/T1102-2008虾类性状测定术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。学名与分类学名中华小长臂虾分类地位(Palaemonidae)主要生物学性状外部形态5~61125mm~50mm1.18mm~1.50mm1.00mm~1.04mm,卵呈棕绿色。自头胸甲两侧至第63图1 中华小长臂虾外形可数性状额剑齿式:上额角齿数/5~6/1~2可量性状可数性状额剑齿式:上额角齿数/5~6/1~2可量性状~2.538~0.772~0.972。繁殖性成熟中华小长臂虾雌雄异体,可当年性成熟。怀卵量40~230产卵类型产卵期为4月中旬至7月中旬,沉性兼粘性卵。遗传学特性细胞遗传学特性检测染色体数2体细胞染色体二倍数,2n88。7.1.2 核型2n8866m10sm4st8tm33sm5st2(t)4NF1642。图2 中华小长臂虾染色体分裂相及核型分子遗传学特性中华小长臂虾线粒体基因标记对线粒体CRL6SGCTGTTATAAAACAT6S:CCGGTCTGAACTCAGATCACGT523bp2%,序列如下:5’-tatgagctattaatataaagtctagcctgcccactgagtaattaaagggctgcagtaatttgactgtgcaaaggtagcataatcagtagtcttttaattgaaggcttgaatgaatggctggatgagggagaaactgtctttttggtaaattaaaatttgacttttaagtgaaaaggcttaaatttattaaggggacgataagaccctataaaacttaatatttatttatattttgtttttaaattttaaataaactttacaaagtttagtatatattttgttggggagacattgacataattaataactgtctaatttaaatgtttatagctattgttattatatgatccttctttgaaggataaaaagagcaagttactttagggataacagcgtaattttttctgagagttcttatcgaagaaaatagttgcgacctcgatgttgaattaaaatttctgttaggtgtagccgtttaacaagtaggtctgttcgaccttttaaattttacatgatttgagttcaaaccggt-3’中华小长臂虾线粒体基因标记对线粒体LCO:GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG,HCO:TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA674bp2%,序列如下:5’-atattggcccactatactttgtatttggagcttgagcaggaatagtaggaacttctttaagactactaattcgagctgaacttggacaaccaggcaccttaatcggaaatgatcaaatttacaatgtggttgtaacggcacacgctttcgttataatcttctttgtagtaataccaattataattggtggatttggaaattgacttgtacccctaatgctaggagctcctgatatagcattcccacgtataaataacataagattttgactcctccccccttctttaacactcattctttctagaggtatagtagaaagaggagtcggaactggttgaacggtttaccctcccctagcgagagggttaggccacgctggagcttcggtagacctgggtattttctctttacatttagcaggagtgtcttctattttgggtgctgtaaatttcattacaactgtaattaatatacgagctccgggaataactatggaccgaactccactttttgtatgagcagtttttttaactgctattttattactactttctctacctattttagcaggggctattactatgcttttaacagaccgaaatctaaatacttctttctttgaccctgctggagggggggatcctattctttatcaacatttattttgatttttt-3’检测方法3抽样方法GB/T18654.2性状检测按SC/T1102-2008执行。年龄与生长测定GB/T18654.4繁殖性能测定GB/T18654.6染色体检测GB/T18654.12DNA含量测定GB/T18654.14分子遗传学标记方法DNA的提取200µL(EDTA(pH8.0):200ProteinaseK:2003h~4(体积比25µL8000r/min20min22乙醇沉淀,-2012500r/min20min70250µL的1TE(pH8.0)DNADNA20PCR扩增反应5µNA0g、0×ufer.5L,g+25mol-1).5μNT0molL1)各.25Laq酶U10olL1)各.15A,DNA)。16S955min;9430s、5230s、72℃30s,357210min。线粒体955min;9430s、5530s、72℃延伸30s,35725min。5µL1µL120min,120v,紫外灯下观察结果并拍照记录。PCR结果分析22455GB/T18654.14567及8.7.366附录A(资料性)中华小长臂虾可量性状比例表A.1所示了不同组别中华小长臂虾可量性状比例。表A.1项目I组II组III组IV组全长/体长2.031±0.2722.143±0.1822.366±0.1722.109±0.200头胸甲长/体长0.279±0.0170.278±0.0160.283±0.0170.291±0.033头胸甲宽/体长0.172±0.0150.165±0.0110.151±0.0130.166±0.015头胸甲高/体长0.199±0.0150.194±0.0120.179±0.0140.202±0.017腹部长/体长0.715±0.0490.708±0.0280.716±0.0560.692±0.037腹部宽/体长0.146±0.0110.140±0.0180.134±0.0110.141±0.015腹部高/体长0.167±0.0170.161±0.0130.164±0.0140.162±0.017尾扇长/体长0.204±0.0160.205±0.0150.203±0.0220.189±0.021尾节高/体长0.074±0.0070.075±0.0070.071±0.0070.077±0.011额剑长/头胸甲长0.753±0.0720.728±0.0740.896±0.0760.708±0.096头胸甲宽/头胸甲长0.618±0.0500.594±0.0440.533±0.0450.575±0.069头胸甲高/头胸甲长0.714±0.0500.701±0.0440.634±0.0520.698±0.073腹节宽/头胸甲宽0.855±0.0790.855±0.1120.894±0.0900.856±0.105眼窝距/头胸甲宽0.327±0.0620.345±0.0370.032±0.0040.054±0.012腹节高/头胸甲高0

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