茶多酚、大豆黄酮对蛋鸡生产性能的影响

茶多酚、大豆黄酮对蛋鸡生产性能的影响

黄酮类化合物广泛存在于自然界。据研究，类黄酮类化合物具有改善血液循环、增强身体免疫、抗菌等作用。现在人们对类黄酮化合物的研究主要集中在具有二酚结构的类黄酮,由于二酚类黄酮在芳香环上有对应于雌激素C0位的羟基结构,所以在动物体内具有弱的雌激素作用,也常被称为植物雌激素。日粮中添加或皮下注射二酚类黄酮物质,能显著提高大鼠、肉仔鸡、仔猪生产性能,但其效果似乎受动物性别影响较大。茶多酚的主体为儿茶素,属于多酚类黄酮,具有很强的抗氧化和抗病毒、抗真菌等作用。目前尚未见到类黄酮对蛋鸡脂类代谢影响的研究报道,本试验旨在研究日粮中添加2种类黄酮对蛋鸡脂类代谢的影响。1材料和方法1.1试验材料选用茶多酚(95%),含79%儿茶素,由海南群力生物制药有限公司惠赠。大豆黄酮(98%),河北宣化化工厂惠赠。1.2分组、研究方法及试验期限选用产蛋率、体重相近的30周龄海赛克斯褐壳蛋鸡270只,采用单因素随机试验,随机分为9个处理,每个处理5个重复,每个重复6只鸡,预试期1周,正式试验从31周龄持续至38周龄,为期8周。基础日粮组成及营养水平见表1。1.3鸡舍光照测定采用密闭式鸡舍,3层立体笼养,同一列3个笼为一个重复单位,每个笼(30×45cm)分配2只蛋鸡。同一处理的各重复均匀分布于鸡舍。试验期鸡舍温度变化范围12-21℃,湿度变化范围50%-70%。白天为自然光照,早晚辅以人工照明,每日恒定光照为16h,光照强度为14lx。饲喂干粉料,自由采食、饮水。按常规防疫程序进行防疫和鸡舍消毒。1.4血样的采集每日以重复为单位,记录产蛋数、破壳蛋数,总产蛋数减去破壳和软壳蛋数,计算产蛋率。试验结束时每个重复随机选2只鸡前腔静脉采血,离心后制备血浆(肝素钠抗凝),用于血浆指标分析,然后屠宰,取肝脏样,用编号的硫酸纸包好(室温-4℃),立即转移到实验室后,-30℃冷冻保存,每个重复收集2枚鸡蛋。上述每个重复内的2只鸡的样品合二为一用与分析。1.5指标和方法的测量1.5.1生产能指示器产蛋率、蛋重、采食量、饲料转化率(料蛋比)。1.5.2总胆固醇ct、hdl-c、ldl-c和甘油试剂盒法,用TECHNICONRA-1000生化自动分析仪测定。1.5.3血浆葡萄糖和雌激素用放射免疫法检测血浆中胰岛素、雌二醇水平,试剂盒购自中国原子能科学院同位素所,仪器为FT-646A微机单头放免仪。1.将含有30ml的详细混淆粉末转换为所有粉末的重量suviedprovilogy，mg，kgCu4.0,Fe40,Mn48,Zn40,I0.15,Se0.31。2.实测值的测定VA7800IU,VD32100IU,VE15IU,VK2.55mg,VB10.98mg,VB28.00mg,VB120.006mg,烟酸Niacin20.00mg,叶酸Folicacid0.97mg,泛酸钙Pantothenicacid6.00mg,生物素Biotin0.12mg。*为实测值。Analyzedvalue.1.5.4肝脂肪氯仿-甲醇法。1.5.5pap法测定准确称取1~2mg鲜蛋黄,用去离子水按1∶1稀释,混匀,采用GPO-PAP法试剂盒测定。测定参数:波长550nm,光径1.0cm,温育温度37℃,测定温度25℃。测定仪器:UV-HP8452。1.6统计分析采用SAS6.12软件包ANOVA模型进行单因素方差分析,多重比较用DUNCAN法。2结果与讨论2.1大豆黄酮添加量对黄酮产蛋率的影响日粮中添加茶多酚、大豆黄酮对蛋鸡产蛋率有不同程度的改善。随着茶多酚添加水平升高,产蛋率有相应提高的趋势,当添加量为40mg/kg时,产蛋率提高了5%,见表2。日粮中添加大豆黄酮对产蛋率有较大幅度提高,添加10mg/kg大豆黄酮时,产蛋率显著提高7.2%(P<0.05),日粮中添加40mg/kg大豆黄酮时,产蛋率下降。从促进生产性能和经济效益上考虑,添加10mg/kg大豆黄酮较好。日粮中添加这两种类黄酮物质,对蛋重没有显著作用(P>0.05)。茶多酚似乎有减少耗料量的趋势。日粮中添加20mg/kg茶多酚和10mg/kg大豆黄酮,料蛋比达到最佳,分别为2.43和2.46。2.2外源激素对产蛋期鸡蛋血工酶活性的影响本试验条件下,日粮添加茶多酚和大豆黄酮对血脂指标没有显著影响(P>0.05),见表3。只是40mg/kg茶多酚和10mg/kg大豆黄酮3个处理组的血浆甘油三脂、总胆固醇和LDL-C表现出降低的趋势。有研究表明,日粮添加40mg/kg茶多酚或10mg/kg大豆黄酮显著降低血浆甘油三酯、总胆固醇和LDL-C(P<0.05)。本试验2种类黄酮对血脂的影响不显著,分析其原因可能是:(1)目前得出类黄酮物质降低血脂的研究大多是在机体雌激素水平不高或相对产蛋高峰蛋鸡较低的动物上进行的,如去子宫小鼠、性不成熟的肉仔鸡、雄性动物或绝经妇女,大豆黄酮或茶多酚在体内的作用不涉及或很少涉及到与高水平雌激素相互作用。据报道,外源雌激素使未达到性成熟的蛋鸡血脂升高,表明雌激素具有维持产蛋高峰期蛋鸡高血脂的作用。(2)茶多酚、大豆黄酮对雌激素具有调节作用。大豆黄酮具有弱的雌激素作用和抗雌激素作用,其作用取决于体内的雌激素水平,对于在体内雌激素水平较低的个体表现出雌激素的作用,对于雌激素水平较高的个体则表现出抗雌激素作用,产蛋高峰期蛋鸡体内雌激素水平较高,大豆黄酮主要表现为抗雌激素的作用。据推测添加特定量大豆黄酮,使其与雌激素竞争受体的同时,又不至于引起雌激素反馈性分泌大量增加,其降血脂作用才可以充分地表现出来,当超过一定量时,其抗雌激素作用引起体内雌激素分泌大量增强,则其对血脂的调节作用被雌激素保持高水平血脂的作用所掩盖,无法表现出来。茶多酚不具有雌激素作用,但是其降血脂作用与雌激素维持高血脂的作用势必会发生冲突,必须通过调节雌激素,消弱雌激素维持高血脂的作用,才能表现其作用。因此,对于产蛋高峰蛋鸡,类黄酮可能只有在特定添加量时才具有降血脂和调节脂蛋白水平功能。(3)产蛋高峰蛋鸡,个体血脂水平变异较大,也是导致类黄酮对蛋鸡血脂影响不显著的原因之一。总之,本试验2种类黄酮未能显著降低血脂,可能与蛋鸡正处于产蛋高峰,血脂水平相对较高且变异较大,而且机体维持高水平血脂的能力很强有关。2.3其它指标的影响日粮中添加茶多酚和大豆黄酮,显著降低了蛋黄中甘油三酯的含量(P<0.05)。茶多酚降低蛋黄甘油三酯的最低有效剂量为10mg/kg,添加20mg/kg时,甘油三酯含量降低了14.7%(P<0.05),添加量进一步增加,甘油三酯水平没有进一步下降。大豆黄酮降蛋黄甘油三酯的最低有效剂量为5mg/kg,并在10-20mg/kg时甘油三酯含量达到一个稳定点,较对照组降低16.7%(P<0.05),见表4。随着茶多酚添加水平升高,肝脂肪含量呈下降趋势。大豆黄酮对肝脂肪的影响未表现出明显的规律性。说明茶多酚和大豆黄酮调节蛋鸡脂类代谢的机理并不完全一致,其中差别可能与二酚类黄酮(大豆黄酮)具有弱的雌激素作用有关,这方面有待于进一步的研究。2.4代谢的2种主要激素对鸡蛋生产性能和血脂水平的影响雌激素和胰岛素是蛋鸡体内协调各种生理功能、调节营养物质代谢的2种最重要激素,与蛋鸡生产性能和血脂水平密切相关。可以从茶多酚、大豆黄酮对蛋鸡血浆这2种激素水平的影响,揭示2种类黄酮对蛋鸡生产性能、脂质代谢作用的可能机理。2.4.1大豆黄酮对鸡血浆胰岛素水平的影响从表5中可以看到,添加5mg/kg茶多酚、大豆黄酮对雌二醇水平没有影响(P>0.05),茶多酚添加10mg/kg时,雌二醇水平达到最高点,较对照组提高96%(P<0.05)。大豆黄酮在添加10mg/kg时,雌二醇水平显著升高(P<0.05),并在添加20mg/kg时,雌二醇水平达到最高点,较对照组提高70%(P<0.05)。大豆黄酮具有弱的雌激素作用,其效能大约是雌二醇的1/500000,在体内和雌二醇竞争靶器官细胞膜上的受体,类黄酮与雌激素受体结合,并产生弱的雌激素效应,这种弱的雌激素作用在一定浓度下会表现出抗雌激素活性。不同种动物,同种动物不同性别,同种性别不同的靶组织,同一靶组织不同的功能状态以及给药途径,都会使二酚类黄酮呈现出不同雌激素活性。放射免疫受体分析表明,饲喂3mg/kg大豆黄酮能使肉鸡下丘脑、垂体的雌二醇受体(E2-R)的最大结合容量和平衡解离常数(Kd)有不同程度的提高,揭示了大豆黄酮能与下丘脑和垂体E2-R结合干扰内源雌二醇的反馈调节,从而影响内源激素水平。这表明大豆黄酮可以首先通过提高靶组织雌二醇受体(E2-R)的最大结合容量和平衡解离常数来与雌激素受体结合,发挥自己的作用。随着植物雌激素在动物体内的浓度增加,其取代雌激素与受体结合的程度越高。当大豆黄酮超过这一限度时,通过竞争受体,反馈调控雌激素的水平,使雌激素水平升高。可以看出,二酚类黄酮实际上对雌激素具有双重调节作用,以维持机体适宜的雌激素水平,雌激素通过与靶细胞结合,发挥其在体内广泛的调节作用。大豆黄酮能与下丘脑、垂体等E2受体不同程度地结合,影响动物的神经内分泌系统的性轴,同时也影响生长轴,增强机体同化作用。本试验中胰岛素水平增强验证了这一观点。茶多酚属于多酚类黄酮,它对雌激素的作用机理,目前尚不清楚,有待进一步的研究。雌激素在下丘脑内经2-羟化酶的作用形成儿茶酚雌二醇或儿茶酚雌酮。这类激素具有儿茶酚胺与雌激素的双重作用,它可一方面通过抑制酪氨酸羟化酶与儿茶酚-0-位甲基转换酶的活性,从而增强脑内去甲肾上腺素的作用,促进促性腺素释放激素的释放,另一方面,它又由于结构上与雌激素相似,可在下丘脑、垂体同雌激素竞争受体,抵消雌激素对下丘脑与垂体的负反馈作用,增加垂体对促性腺素释放激素的敏感性。茶多酚主体为儿茶素,有可能在体内通过影响儿茶酚胺或儿茶酚雌激素的合成,调节神经内分泌系统的活动。日粮中添加茶多酚或大豆黄酮,显著升高血浆胰岛素水平(P<0.05),见表5,与先前报道的结果基本一致。茶多酚在添加10mg/kg时,胰岛素达到最高水平,比对照组提高120%(P<0.05)。大豆黄酮的添加量从20mg/kg升高到40mg/kg时,胰岛素水平突然升高20多倍,其机理有待于进一步研究,其生理意义也有待于探讨。2.4.2加强对组织中vtg、vldl-1、3-四氢-3-醇的诱导转染,诱导细胞不转引,一般可提高人体生物系统水平,有利于提高抗氧化性产蛋高峰蛋鸡保持较高的产蛋率,机体同化作用很强。雌激素和胰岛素水平在很大程度影响蛋鸡的生产性能。雌激素调控多种脂蛋白和载脂蛋白在肝脏合成,这些脂蛋白和载脂蛋白对于蛋鸡体内脂质转运和蛋黄的形成至关重要。卵黄生成素(VTG)和VLDL是家禽蛋黄脂蛋白的主要前体,由肝脏合成,其基因转录受雌激素的调控,分泌进入血液后,转运至卵母细胞,通过受体介导的胞吞作用被生长中的卵母细胞吸收。家禽体内VTG和VLDL两种脂蛋白转运系统对雌激素的作用都产生快速反应,雌激素不但诱导VTG的合成,也增加肝脏VLDL的合成。另外,雌激素极大地加强肝脏脂肪合成,以满足卵黄生成素合成的需要。胰岛素加强机体对营养物质的吸收,在蛋白质、碳水化合物和脂类物质的代谢中发挥重要作用,加强脂类物质的合成,加强糖类物质转化为脂类物质以满足现代高产蛋鸡产蛋对营养物质的需要。蛋鸡产蛋高峰,体内脂类物质合成、转化及其转运非常强,作为机体脂质转运渠道,血脂水平高就不难理解。类黄酮是自然界中一类重要的植物活性物质,是许多植物药的主要活性成分。目前在医学领域的大量研究中并未发现常规剂量的类黄酮具有毒性作用。茶多酚、大豆黄酮分别是人类饮食中的茶叶和大豆中的类黄酮,具有更好的安全性,而且这两种物质对人体预防动脉粥样硬化有积极作用。当然今后仍有必要对类黄酮在蛋品中的沉积及对人类健康的作用进行深入研究。3降低血浆总胆固醇、糖脂质和ldl-c、多糖含量3.1茶多酚和大豆黄酮两种类黄酮有提高产蛋率的作用,尤其是添加10mg/kg大豆黄酮时,产蛋率显著提高7.2%(P<0.05)。3.2茶多酚和大豆黄酮分别在添加40mg/kg和10mg/kg的添加量时有降低血浆总胆固醇、甘油三酯、LDL-C的作用,本试验此作用不显著,可能与蛋鸡高峰期血脂