酶制剂发酵产品检验-发酵液中还原糖含量的测定

子情境：酶制剂发酵过程检验--发酵液中还原糖含量的测定什么是糖化酶？糖化酶的概述

糖化酶有什么用途？怎样才能测得糖化酶中的还原糖的含量呢？以及样品的预处理方法？什么是糖化酶？资讯糖化酶是一种习惯上的名称,学名为α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucanglucohydrolace)。糖化酶是由曲霉优良菌种经深层发酵提炼而成。能把淀粉从非还原性未端水介a-1.4葡萄糖苷键产生葡萄糖，也能缓慢水解a-1.6葡萄糖苷键，转化为葡萄糖。糖化酶有什么用途？资讯糖化酶的底物专一性较低，它能从淀粉链的非还原性未端切开a-1.4键，也能缓慢切开a-1.6键。因此，它能很快的把直链淀粉从非还原性未端依次切下葡萄单位，从而使支链淀粉水解成葡萄糖。（一）酒精工业（二）啤酒工业（三）酿造工业（四）味精工业（五）淀粉糖工业怎样才能获得糖化酶呢？糖化酶在微生物中的分布很广,在工业中应用的糖化酶主要是从黑曲霉、米曲霉、根霉等丝状真菌和酵母中获得,从细菌中也分离到热稳定的糖化酶,人的唾液、动物的胰腺中也含有糖化酶。①根霉固体发酵法工艺流程:试管菌种→三角瓶款曲扩大培养→帘子曲种→通风制曲→成品②黑曲霉液体深层发酵法工艺流程:试管斜面种子→种子扩大培养→发酵→过滤→浓缩→干燥→粗酶制剂发酵液中还原糖含量的测定

还原糖含量的测定斐林试剂法

酶法

3，5－二硝基水杨酸比色法

斐林试剂法测定还原糖的含量

①碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。②碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL。③乙酸锌溶液：称取1.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，溶于水并稀释至100mL。④106g/L亚铁氰化钾溶液。⑤1g/L葡萄糖标准溶液。1．试剂斐林试剂法测定还原糖的含量样品处理

标定碱性酒石酸铜溶液

样品测定

测定步骤2．测定步骤斐林试剂法测定还原糖的含量3．计算式中m2—10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）；V—测定时消耗样品溶液的体积（mL）；250—样品溶液的总体积（mL）；m—称取试样质量（g）。3，5－二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量

1．试剂①3，5－二硝基水杨酸试剂（DNS）。甲液：溶解6.9g重蒸酚于15.2mL100g/LNaOH溶液中，并稀释到70mL，在此溶液中加入6.9g亚硫酸钠。乙液：称取255g酒石酸钾钠，加到300mL100g/LNaOH溶液中，再加入880mL10g/L3,5－硝基水杨酸溶液。将甲液与乙液相混合即得黄色试剂，贮于棕色瓶中。在室温下放置7～10d后使用。②葡萄糖标准液（1mg/mL）。2．测定步骤葡萄糖标准液（1mg/mL）

1葡萄糖标准曲线的绘制

2样品中还原糖的测定

33，5－二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量

3，5－二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量

还原糖（%）=n—稀释倍数1000—mg换算成gm—称取试样质量g计算A—通过样品液吸光度从葡萄糖标准曲线查得葡萄糖质量mg3，5－二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量

还原糖（%）=n—稀释倍数1000—mg换算成gm—称取试样质量g计算A—通过样品液吸光度从葡萄糖标准曲线查得葡萄糖质量mg糖化酶发酵过程检验

检查