高脂饲料喂养诱导营养性肥胖大鼠模型的建立及评价

高脂饲料喂养诱导营养性肥胖大鼠模型的建立及评价

随着人们生活水平的提高以及食品结构和习惯的变化，体重超标的发病率在发达国家和发展中国家呈惊人的速度增加，已成为世界范围内的主要健康问题。研究肥胖症及其相关疾病的发病机制及防治措施,已成为目前科学研究的迫切任务。本研究通过高脂饮食诱导成年SD大鼠,成功制作了肥胖动物模型,为肥胖症及其相关疾病的后续研究奠定了良好的基础。1材料和方法1.1分组和给药,饲料配方SPF级雄性SD大鼠45只(体质量200～220g),由上海斯莱克实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(沪)2007-0005。大鼠随机分为正常对照组(n=5只)和模型组(n=40只),分别喂养8周。根据文献资料,并适当调整饲料配方,对照组给予普通饲料(由苏州双狮实验动物饲料科技有限公司提供),模型组给予高脂饲料:脂肪53%,蛋白14.5%,碳水化合物32.5%,盐5%,其中普通饲料47.7%,猪油15%,蛋黄粉10%,全脂奶粉10%,白砂糖10%,胆固醇2%,胆盐0.3%,食盐5%。大鼠自由摄食,自由饮水,室内昼夜温度(22±2)℃,昼夜时间均为12h,湿度控制于55%～65%。1.2测试指标和方法1.2.1一般情况下包括精神状态、活动、饮水量、尿量、食欲、大便及毛发光亮度,每日观察并记录。1.2.2体质量增长曲线(bodyweightindex,BMI)于分组时及饲养后每周测一次体质量(g),记录大鼠体质量增长曲线。每周测量大鼠鼻尖至肛门的距离(cm),即体长,使用普通软尺测量(检验分度值0.1cm)。BMI(kg·m-2)=体质量/体长2。1.2.3空腹血糖等增血率造模8周后,经断尾取血,使用ACCU-CHEKAdvantageⅣ血糖仪(罗氏,美国)及配套血糖试纸测量空腹血糖,葡萄糖溶液按2g/kg体质量灌胃,测2h血糖;经异氟烷吸入麻醉后,由内呲静脉取血2ml,分离血清。血总胆固醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C由东方医院检验科采用全自动生化仪(罗氏ModularP800,美国)测定。1.3大胖模型的构建大鼠肥胖判断标准:凡经高脂饲料喂养,大鼠的体质量超过普通饲料喂养大鼠体质量的20%作为实验性肥胖大鼠。1.4统计学处理方法所有数据采用()表示,通过SPSS17.0统计软件进行统计学处理。两组间均数比较采用独立样本t检验;同一组实验前后指标比较采用配对t检验。以P<0.05为有统计学意义。2结果2.1大鼠的饮食情况造模初始1周,模型组大鼠食欲较对照组差,这可能与大鼠不适应高脂饮食有关。但1周后模型组大鼠逐渐适应了饮食,进食量逐渐增加。与对照组比较,模型组大鼠饮水量及尿量较多,粪便较稀软且臭味重。8周末时,模型组大鼠饮水量及尿量均明显增多,毛发光亮度减退,活动减少,精神出现不同程度的萎靡。2.2增加与对照组区别大鼠通过两种不同饲料喂养8周后,模型组体质量增加明显超过对照组,差别有高度的统计学意义。整个实验过程中,两组大鼠的体长差别均无统计学差异,但是BMI比较,差别有统计学意义,见表1。2.3各组大鼠8周空腹血糖和空腹血糖的差别模型组大鼠与对照组比较,血清总胆固醇,LDL-C明显升高,HDL-C则明显下降,见表2。模型组与对照组相比,大鼠8周空腹血糖差别无统计学意义,但是其8周2h血糖与其空腹血糖进行配对t检验,差别有统计学意义,且8周2h血糖与空腹血糖的差值,与对照组2h与空腹血糖的差值进行独立样本t检验比较,差别有统计学意义,见表3。故可得出结论,8周存在糖耐量异常。3大鼠肥肥的主要动物模型及测量肥胖是指进食热量多于身体消耗量并以脂肪形式储存于体内,当体脂增加使体质量超过标准体质量20%或BMI>24kg/m2者称为肥胖症。单纯性肥胖症是由遗传、饮食及生活习惯等多种因素共同作用而产生的。大量研究显示,肥胖症是高血压、糖尿病、冠心病、脑血管疾病、慢性肾脏病等多种疾病的危险因子。因此,防治肥胖症具有十分重要的临床意义。肥胖动物模型是研究肥胖及其相关疾病的发病机制的主要工具。目前研究肥胖的动物模型主要有高脂饮食诱导肥胖模型、遗传性肥胖的转基因动物模型、下丘脑性肥胖模型(谷氨酸钠或金硫葡萄糖)、内分泌性肥胖模型(去卵巢、注射胰岛素)等诱导形成。其中与人类肥胖最为接近的高脂饮食诱导营养性肥胖动物模型的应用最为广泛。本研究采用高脂饲料喂养大鼠,结果表明,高脂饮食可引起大鼠营养性肥胖,通过高脂饲料喂养的模型组大鼠体质量增加明显大于普通饲料喂养的大鼠,且模型组大鼠BMI明显高于对照组,显示造模成功。模型组总胆固醇及LDL-C明显升高,而HDL-C则明显降低,且存在葡萄糖耐量异常。目前关于肥胖的动物实验研究很多,但是没有衡量动物肥胖指标的统一标准。世界卫生组织制定的体质量指数,适用于衡量人体的肥胖程度的判断。国内判断大鼠的肥胖指数多用Lee’s指数,而国外则多用BMI。本研究采用BMI能较好地体现大鼠肥胖程度。由于在同一饮食环境下,大鼠对高脂饮食的反应性不同,部分大鼠体质量升高不明显,即存在“肥胖易感”和“肥胖抵抗”现象,8周末时